夏辉
- 作品数：8 被引量：7H指数：2
- 供职机构：首都医科大学附属北京胸科医院更多>>
- 发文基金：陕西省科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- p16基因转染对胰腺癌JF305细胞的抑制作用
- 2004年
- 目的 :探讨抑癌基因 p1 6对胰腺癌 JF30 5细胞的抑制作用。方法 :以L ipofectamine TM2 0 0 0脂质体介导 p1 6基因转染胰腺癌 JF30 5细胞 ,MTT法测定 OD值 ,计算细胞生长抑制率 ,描绘 p1 6基因转染后 JF30 5细胞增殖曲线。结果 :p1 6基因转染对JF30 5细胞具有明显抑制作用 ( t=4.0 6,P<0 .0 1 ) ,细胞抑制率为 2 6.85 % ,细胞增殖曲线较 JF30 5细胞明显降低。结论 :p1 6基因转染对胰腺癌 JF30 5细胞具有明显抑制作用。
- 马红兵胡海涛王西京夏辉李铮马洁
- 关键词：P16基因转染胰腺癌
- p16基因转染对胰腺癌细胞生长及辐射敏感性的研究被引量：2
- 2006年
- 目的探索p16基因转染对胰腺癌细胞生长辐射敏感性的作用。方法将外源野生型p16基因连接到pCDNA3·1+载体构建pCDNA3·1+-p16重组质粒,利用LipofectamineTM介导转染胰腺癌JF305细胞,筛选阳性克隆。照射后,RT-PCR检测p16基因表达,Western blot检测蛋白表达;用MTT法测定细胞生长曲线和肿瘤细胞杀伤率。结果转染p16基因的JF305细胞有外源p16基因的整合及表达,生长速度明显减少,对辐射的敏感性增强。结论导入外源野生型p16基因可抑制胰腺癌细胞恶性增殖,提高胰腺癌细胞对辐射的敏感性。
- 薛兴欢马红兵王西京狄政莉刘小旭马洁夏辉李铮韩志楷白明华
- 关键词：胰腺癌P16基因
- 放射诱导p16基因胰腺癌靶向性表达的研究被引量：1
- 2005年
- 目的 构建 pcDNA3.1 Egr.1p-p16重组质粒并检测其在人胰腺癌 JF305细胞中的辐射诱导表达。方法 将人p16 cDNA基因连接到有辐射诱导特性的早期反应因子 Egr.1p的下游,构建成 pcDNA3.1 -Egr.1p- p16 重组质粒,利用脂质体介导转染人胰腺癌细胞系 JF305 细胞;采用 RT- PCR方法和 Western blot方法检测不同剂量 X射线照射后,被转染细胞中 p16 的转录和表达水平。结果 酶切鉴定证实 pcDNA3. 1 Egr. 1p -p16 重组质粒构建正确。被pcDNA3.1 Egr.1p -p16重组质粒转染的人胰腺癌 JF305细胞经不同剂量 X射线照射后,p16 基因表达均高于未照射组。结论 X射线可诱导 pcDNA3.1 -Egr.1p -p16重组质粒在人胰腺癌 JF305细胞中表达增强。
- 马红兵王西京胡海涛狄政莉夏辉李铮马洁白明华韩志楷吴丛梅
- 关键词：EGR-1启动子X射线P16表达胰腺癌细胞系
- pcDNA3.1-Egr.1p-p16基因联合放射治疗对裸鼠肿瘤的作用被引量：3
- 2005年
- 目的:探讨pcDNA3.1 Egr.1p p16基因联合放射治疗移植人胰腺癌细胞JF 305裸鼠的抗肿瘤作用的 适宜照射剂量和质粒注入量。方法:不同剂量X射线照射(2,10,20Gy)及瘤内不同量脂质体包裹的pcDNA3.1 Egr.1p p16质粒(10,20,30μg)注入接种JF305胰腺癌细胞的裸鼠体内,测定各组裸鼠体积以观察各种处理抑瘤效 应的差异,并用RT PCR检测放射治疗后48h各组肿瘤局部p16mRNA水平。结果:质粒注入后接受20GyX射线 照射组照射后4～28d,肿瘤生长速率明显低于2Gy和10Gy照射组(P<0.05)。质粒注入量为20μg或30μg的 联合治疗组照射后4～28d,肿瘤生长速率明显低于注入量为10μg的联合治疗组(P<0.05)。单纯接种 pcDNA3.1 Egr.1p p16质粒组和接种pcDNA3.1 Egr.1p p16质粒照射组小鼠的肿瘤组织内有p16mRNA表达,且 pcDNA3.1 Egr.1p p16质粒照射组的p16mRNA水平明显高于单纯pcDNA3.1 Egr.1p p16质粒组(P<0.05)。结 论:pcDNA3.1 Egr.1p p16基因联合放射治疗小鼠体内抗肿瘤作用的适宜射线照射剂量为20Gy,质粒注入量为20 μg;pcDNA3.1 Egr.1p p16基因联合放射治疗的抗肿瘤作用明显优于单纯放射治疗或单纯基因治疗,这可能与辐射 激活Egr.1p基因后增强抑瘤基因p16的表达有关。
- 马红兵王西京胡海涛狄政莉夏辉王铮李琤韩志楷马洁吴丛梅
- 辐射诱导pcDNA3.1-Egr.1p-p16对JF305细胞周期和凋亡的影响被引量：1
- 2007年
- 目的检测pcDNA3.1-Egr.1p-p16质粒对胰腺癌细胞JF305凋亡和细胞周期变化的影响。方法进行人胰腺癌JF305细胞培养,脂质体LipofectamineTM2000转染pcDNA3.1-Egr.1p-p16重组质粒,6MV-X射线4Gy照射(剂量率2.50Gy/min),流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡状况。结果pcDNA3.1-Egr.1p-p16质粒转染组和pcDNA3.1-Egr.1p-p16质粒转染+4Gy照射组的JF305细胞中早期凋亡细胞分别占6.4%、10.4%,晚期凋亡或继发性死亡细胞分别占16.8%、33.8%,均较阴性对照组显著升高(P<0.05)。质粒转染+4Gy照射组总的凋亡率高于单纯质粒转染组(P<0.05)。辐射明显导致JF-305细胞G2期阻滞。pcDNA3.1-p16质粒和pcDNA3.1-Egr.1p-p16质粒基因转染,可使JF-305细胞阻滞于G1期。当给予细胞4Gy照射后,两质粒转染组,阻滞于G1期细胞变化不大,阻滞于G2期的细胞有所增加。结论pcDNA3.1-Egr.1p-p16可致JF-305细胞凋亡,与放射联合增加了细胞凋亡率。转染pcDNA3.1-Egr.1p-p16可使细胞阻滞于G1期,联合辐射,增加了细胞的G2期阻滞。
- 马红兵王西京马洁夏辉王铮李琤韩志楷吴丛梅
- 关键词：质粒细胞周期凋亡
- 5-氮杂-2＇-脱氧胞苷对肺癌细胞H460生物学行为及抑癌基因RASSF1A表达的影响
- 2010年
- 目的 观察5-氮杂-2＇-脱氧胞苷（5-Aza-CdR）对肺癌细胞H460的生物学行为及RASSF1 A mRNA表达的影响.方法 5-Aza-CdR处理H460细胞,通过MTT方法、平板克隆试验观察细胞生长活性的变化,PCR检测RASSF1A甲基化状态,Western blotting法检测RASSF1A的蛋白表达,流式细胞术进行细胞周期分析.结果 H460细胞经5-Aza-CdR处理后,与未处理组相比,生长速度出现不同程度减慢,克隆形成率明显降低,RASSF1A甲基化程度降低,延缓H460细胞周期G1/S进程,使细胞阻滞于G1期.结论 在肺癌细胞系中,RASSF1A基因甲基化可能导致其表达缺失,而5-Aza-CdR能够恢复RASSF1A基因的表达,为肺癌的去甲基化治疗提供理论依据.
- 马红兵夏辉王西京
- 关键词：肺肿瘤DNA甲基化脱氧胞苷
- DNA甲基化与肺癌关系研究进展
- 2004年
- DNA异常甲基化是一种表观遗传改变,常发生在启动子区的CpG岛。某些基因甲基化与肺癌发生密切相关,且 是肺癌发生中的早期事件。可能发生在肺癌早期,可以通过去甲基化药物发生逆转。
- 夏辉张叔人马洁
- 关键词：肺癌甲基化去甲基化药物
- TGF-α与绿脓杆菌外毒素融合蛋白的表达、纯化及对肿瘤细胞的杀伤作用
- 2004年
- 目的:表达并纯化转化生长因子α与绿脓杆菌外毒素融合蛋白(TGFα-PE40),探讨其对EGF受体(EGFR)阳性肿 瘤细胞的靶向杀伤作用。方法:用pET28a表达载体构建表达TGFα-PE40蛋白的重组体pV28,IPTG诱导其表达后,提取包涵 体蛋白并用Ni柱纯化,MTT法观察复性融合蛋白对肿瘤细胞A431和SK-OV3的杀伤效用。结果:成功构建基因重组质粒 pV28,纯化后的包涵体蛋白中TGFα-PE40蛋白纯度达98％以上,这种活性毒素蛋白对EGFR高表达的A431癌细胞抑制率为 50％(IC50)时所需蛋白浓度为(0.86±0.07)μg／ml,低于EGFR低表达的SK-OV3癌细胞的IC50(6.37±2.18μg/ml),差异显 著(P<0.05)。结论:融合蛋白TGFα-PE40对肿瘤细胞的毒性与肿瘤细胞表面表达的EGFR数量成正相关,可选择性杀伤肿 瘤细胞。
- 李(王争)夏辉马洁
- 关键词：绿脓杆菌外毒素融合蛋白EGF受体
