和占龙
- 作品数：161 被引量：209H指数：7
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：云南省应用基础研究计划面上项目云南省技术创新人才培养基金云南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 小鼠resistin基因慢病毒表达载体构建及在KMB17细胞中的表达被引量：3
- 2016年
- [目的]构建携带小鼠resistin基因的慢病毒表达载体,并高效转导靶细胞。[方法]从小鼠脂肪组织提取总RNA,经PCR扩增、酶切、连接、转化后构建重组质粒;通过293T细胞包装为重组慢病毒颗粒,然后感染KMB17细胞,检测小鼠resistin基因在靶细胞中的表达。[结果]PCR扩增到预期的342 bp大小的resistin基因目的片段;构建的重组质粒经酶切得到了342 bp大小的目的片段,测序鉴定为小鼠resistin基因序列;重组慢病毒包装可观察到很强的绿色荧光,说明具有较高的质粒转染效率;重组慢病毒感染KMB17后可检测到小鼠resistin基因转录水平和蛋白水平的表达,证明resistin基因得到有效转导并可在靶细胞中高水平表达。[结论]成功构建了携带小鼠resistin基因的慢病毒表达载体并可在KMB17靶细胞中获得高效表达。
- 陈瑜赵远岳俊李鸿钧和占龙马开利马进吴正存唐东红鲁帅尧
- 关键词：RESISTIN慢病毒载体靶细胞小鼠
- 人工繁育恒河猴的肺炎链球菌携带状况调查及分析
- 2021年
- 目的探究人工繁育的恒河猴群体中肺炎链球菌的自然感染状况,为肺炎链球菌感染的临床诊断和治疗提供参考。方法从恒河猴猴群中随机采集20只婴猴、30只成年猴和30只老年猴的鼻拭子和咽拭子样本,采用细菌培养和实时荧光定量PCR方法同时筛查样本中肺炎链球菌的携带情况,并对筛查结果为阳性的婴猴的亲代母猴进行肺炎链球菌筛查。再结合革兰染色法、奥普托欣药敏试验、胆汁溶解试验、菊糖发酵试验和PCR扩增测序对样本进行进一步鉴定。结果恒河猴婴猴携带肺炎链球菌的检出率为20%(4/20),而这4只阳性婴猴的亲代母猴检测结果均为阴性。成年恒河猴和老年恒河猴中肺炎链球菌的检出率均为0%。细菌培养物在形态学上观测显示,该菌为灰白色凸起状,周围草绿色溶血环,呈脐窝状,为典型肺炎链球菌的菌落特征。革兰染色结果显示为阳性,胆汁溶解试验和菊糖发酵试验结果均呈阳性,并且该菌对奥普托欣敏感;以上结果表明本次从婴猴鼻咽拭子分离到的4株菌落均为肺炎链球菌。结论本调查发现在恒河猴中肺炎链球菌自然感染群体主要为婴猴,婴猴携带率约为20%,其鼻、咽部均为该菌寄住场所,且未发现母婴垂直传播情况。
- 刘雨李艳艳张伟杨凤梅刘权李咏洁靳玮华段素琴王俊斌陈丽雄徐鸿界赵远和占龙
- 关键词：恒河猴肺炎链球菌携带率
- 苜草素对断奶婴猴缓解应激的效果分析被引量：1
- 2006年
- 选择48只出生、母乳喂养时间相近,同一批断奶婴猴,随机分为2组,每个处理组24只,试验组在基础日粮中添加0.1%苜草素。结果表明:与对照组相比,试验组腹泻率减低25%,缓解应激的效果明显。
- 李仕成白文顺陈丽雄赵远鲁帅尧王俊斌和占龙
- 关键词：苜草素应激腹泻率
- 野生树鼩与人工饲养树鼩消化道不同部位微生物组成的比较研究被引量：2
- 2020年
- 目的以树鼩为研究模型,探讨野生树鼩与人工繁育树鼩不同肠段的菌群组成。方法分别收集3只健康野生及人工繁育树鼩七个胃肠段样本,提取细菌总DNA,采用高通量测序技术对16S rRNA基因的V3-V4高变区测序,分析比较菌群结构及多样性。结果不同肠段Alpha指数多样性分析显示野生组与人工繁育组树鼩在盲肠和胃Shannon指数存在显著差异(P<0.05)。野生组与人工繁育组各肠段微生物组成存在较大差异,门水平上,野生组直肠、结肠、盲肠及胃四个部位中Firmicutes菌门的平均占比显著高于人工繁育组(P<0.05);人工繁育组直肠、结肠、盲肠及回肠内Spirochaetes菌门的平均占比显著高于野生组(P<0.05);野生组直肠内Bacteroidetes菌门的平均占比显著高于人工繁育组(P<0.05);属水平上,野生组明显高于人工繁育组的主要菌属为:回肠、空肠和胃内的Weissella菌属,直肠内的Bacteroides菌属以及回肠段内的Lactococcus菌属;人工繁育组明显高于野生组的主要菌属为:直肠、结肠、盲肠及回肠内的Brachyspira属,盲肠和胃内的Prevotella9菌属,盲肠和空肠内的Streptococcus属以及回肠中的Lactobacillus菌属。不同肠段菌群功能基因预测显示两组共有5个解剖部位17个基因类别之间的差异有统计学意义(P<0.05)。结论野生树鼩与人工繁育树鼩各肠段菌群组成差异较大;各肠段细菌功能差异较大,且与其生理功能、饮食结构有一定关联;在肠道菌群研究中,应充分考虑粪便样品微生物的组成是否能够完全代表肠道微生物的组成。
- 李艳艳杨凤梅王俊斌陈丽雄段素琴杨亚平刘雨和占龙马进赵远
- 关键词：肠道菌群树鼩肠段
- 恒河猴婴猴离乳阶段行为观察及分析
- 2014年
- 目的了解婴猴离乳期的行为特点及规律,初步探讨婴猴早期断奶后心理和行为的变化。方法采用随意取样和时间记录法对2012年出生的290只婴猴离乳后的行为进行6个月的观察记录。结果离乳后1个月内出现团抱、吸手指、吸同伴身体3种行为,团抱、吸手指行为在第2、3月显著上升(P<0.05),吸同伴身体行为在第2月显著上升(P<0.05);第2个月,新增的踱步、吸生殖器的行为于第3个月显著上升(P<0.05),爬跨行为随时间的延长无明显变化;第3个月新增吸脚趾行为的比例未随时间的变化而发生改变。其中,雌性同笼发生团抱的比率显著高于异性及雄性同笼(P<0.05);雄性婴猴较雌性婴猴更易发生踱步行为;雄性婴猴吸手指及吸同伴身体的行为发生率显著低于雌性(P<0.05);吸脚趾行为雌、雄发生率无显著差异。结论通过观察婴猴离乳后的行为,观察到团抱、踱步、吸脚趾、吸手指、吸生殖器、吸同伴身体和爬跨7种行为,且各行为均随时间的变化而递增。团抱行为反映了恐惧心理;吮吸行为代表了生理需求及防卫心理;踱步行为初期是无目的,逐渐变成焦虑心理的体现。为研究人类婴幼儿早期断奶后心理和行为的变化,开展心理学、行为学等方面的评估实验提供研究思路和模型。
- 李艳艳陈丽雄乞素冬王俊斌杨凤梅赵远鲁帅尧禹文海和占龙
- 关键词：离乳恒河猴
- 树鼩Retn基因的克隆及序列测定被引量：2
- 2011年
- 目的克隆树鼩(Tupaia belangeri)Retn基因,为在树鼩中开展Retn相关研究提供实验资料。方法在树鼩脂肪组织中抽提总RNA,用RT-PCR进行基因扩增,通过基因克隆、重组质粒的酶切鉴定,对Retn克隆质粒的序列测定和分析。结果抽提的总RNA完整性较好,RT-PCR产物电泳检测得到了目的条带,重组克隆质粒经Pst I单酶切证明了Retn基因已克隆至质粒载体,测序获得了363个核苷酸序列,1个编码114个氨基酸的开放阅读框,序列提交GenBank,登录号为JF267792;经Blast软件进行序列分析,其核苷酸序列和氨基酸序列与鼠类的同源性分别为95%和99%。结论成功克隆了树鼩Retn基因及序列测定,为树鼩Retn基础数据的建立和开展相关研究提供了实验资料。
- 鲁帅尧和占龙禹文海赵远陈瑜李鸿钧
- 关键词：树鼩克隆测序
- 人类及部分实验动物MHC-DRB3.2基因核苷酸序列同源性分析被引量：2
- 2008年
- 目的研究人类及部分实验动物DRB3.2基因核苷酸序列的同源性。方法利用PCR技术扩增得到牛的DRB3.2基因片段,并测定其核苷酸序列;从GenBank中下载人类、猕猴、绵羊、山羊、猪的相应基因片段;利用DNAMAN软件进行碱基组成分析、同源性分析和构建分子进化树。结果所分析的物种该基因片段大小为267bp,没有发现碱基的缺失以及插入现象;A、T、G、C四种碱基以及G+C的含量在不同物种之间相差较小。就某种动物来说,G的含量最高,T的含量最低,G+C的含量要明显高于A+T含量;人类与猕猴、绵羊、山羊、牛、猪的同源性分别为91.8%、82.8%、82.4%、81.3%、81.6%。结论不同物种MHC-DRB3.2基因核苷酸序列的同源性都比较高;在研究人类有些疾病时,猕猴是其它实验动物不可替代的;DRB3.2基因是研究生物进化和系统发育分析的一个理想遗传标记。
- 禹文海黄芬和占龙鲁绍雄连林生杨亮宇赵远鲁帅尧杨竟凯
- 关键词：MHC核苷酸序列同源性分析
- 一种携带恒河猴抵抗素剪接体基因慢病毒载体的构建方法
- 本发明公开了一种携带恒河猴抵抗素剪接体基因慢病毒载体的构建方法，运用普通PCR直接同时扩增抵抗素全长和剪接体基因，用胶回收方法直接回收剪接体条带，然后进行载体的快速克隆测序；使用慢病毒载体高效转染试剂转染所有慢病毒载体质...
- 鲁帅尧马开利乞素冬李鸿钧和占龙马进陈瑜吴正存
- 文献传递
- 两种抗应激剂对恒河猴抗热应激作用的试验研究被引量：1
- 2008年
- 目的研究两种抗应激剂对恒河猴热应激的影响。方法将6只恒河猴随机分为A,B两组采血做9项血液学及9项血液生化指标测定,A组日粮中每只添加VC300 mg/d和VE50 mg/d;B组日粮中添加0.2%苜草素,饲喂两个月后分别将A、B两组恒河猴放入(32±1)℃,湿度70%猴房内,1 h后采血,测定相应血液学及血液生化指标。结果两组动物血液学各项指标试验前后差异不显著(P>0.05);而血液生化值呈现:A组试验后AST、ALP、LDH分别为(101±23.64)U/L,(623.67±233.12)U/L,(1384.33±807.66)U/L,试验前后差异不显著(P>0.05);B组试验后TP、ALB分别为(83.83±16.32)g/L,(38.53±0.57)g/L;试验前后差异不显著。结论VC和VE在恒河猴抗热应激过程中主要作用于维持血液中AST、ALP、LDH的活性稳定,而苜草素主要作用于维持血液中TP、ALB的稳定,两种添加剂能有效提高恒河猴抗热应激的能力。
- 赵远和占龙吴海兴李云龙王俊斌陈丽雄鲁帅尧
- 关键词：恒河猴热应激抗应激剂血液学血液生化苜草素
- 一种CV-B3感染的啮齿动物模型的构建方法和用途
- 本发明属于动物模型构建技术领域，具体提供了一种CV‑B3感染的啮齿动物模型的构建方法和用途，其构建方法为通过腹腔注射或鼻腔滴注的方式对啮齿动物模型感染CV‑B3，建立CV‑B3感染的啮齿动物模型。本发明建立了一种可以用于...
- 李艳艳张伟和占龙杨凤梅李咏洁靳玮华徐鸿界陈丽雄李明学刘权邓自君唐洁孙文亭张凡邦
