周游
- 作品数：13 被引量：80H指数：7
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：湖北省卫生厅科研基金国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 负载HSP60树突状细胞对小鼠动脉粥样斑块影响研究被引量：9
- 2007年
- 目的:探讨负载热休克蛋白60(HSP60)树突状细胞(DC)接种对ApoE-null小鼠粥样硬化斑块的影响。方法:小鼠髓源性DC体外培养成熟,分别用磷酸缓冲液(PBS)、卵清蛋白(OVA)和HSP60处理,体外检测各组DC的功能;同系小鼠予以高脂饮食16周形成斑块,各组DC用荧光物质标记后,分别经皮接种3次,48h后取主动脉HE染色及荧光观察,测血清IL-10、IFN-γ浓度。结果:体外HSP60及OVA可促进DC表达CD86,而PBS则无此效应。接种小鼠后,HSP60-DC和OVA-DC组血清IFN-γ较PBS-DC组高;而IL-10无明显差别;IFN-γ/IL-10比值增高。HSP60-DC促使主动脉粥样斑块炎性细胞浸润明显增加,斑块趋于不稳定;OVA-DC则对斑块无显著效应。结论:HSP60负载的DC可以特异性刺激主动脉粥样斑块炎性反应,诱导炎性细胞因子释放,引起免疫偏移。
- 吴伟李大主周游曾秋棠
- 关键词：树突细胞动脉硬化
- TNF-α对大鼠离体心肌组织块单相动作电位的影响及机制研究
- 2015年
- 目的:检测TNF-α对离体心肌组织块单相动作电位时程(MAPD)及离子通道电流的影响,初步探讨心梗后TNF-α诱导电生理异质性致室性心律失常发生的可能机制。方法:在离体大鼠心脏灌流的条件下,分离心肌组织块,电生理实验技术记录在不同浓度TNF-α灌流条件下的MAPD。用酶解法分离大鼠的心室肌细胞,应用膜片钳全细胞技术记录不同浓度TNF-α对单个心室肌细胞Ito和IK1的影响。结果:与对照组相比较,离体心肌组织块心内膜和心外膜MAPD浓度依赖性地随着TNF-α浓度的增加而增大(P<0.05);相同浓度TNF-α对心内膜和心外膜MAPD有不同的影响,尤其显著延长了心内膜的MAPD。经依那西普(TNF-α受体螯合剂)预处理后,相同浓度TNF-α对心内膜和心外膜MAPD影响不同导致的差异显著降低(P<0.05)。将TNF-α作用于大鼠心室肌细胞,与对照组相比较,Ito和IK1电流密度随着TNF-α浓度的增加而降低(P<0.05)。结论:TNF-α对心内膜及心外膜单相动作电位的不同影响可能对急性心梗后室性心律失常的形成有诱导或促进作用,其机制可能与TNF-α浓度依赖性抑制Ito和IK1电流,引起动作电位复极化异常从而诱发折返性心律失常有关。
- 张青陈志坚廖玉华赵欣冯凯歌官红权周游
- 关键词：单相动作电位
- 三维丝素支架材料制备及其与骨髓间充质干细胞的生物相容性被引量：19
- 2007年
- 目的:成为组织工程合适的三维支架材料,关键在于支架材料与骨髓间充质干细胞的生物相容性,实验应用天然高分子材料丝纤维制备三维丝素蛋白支架材料,并探索其方法的可行性。方法:实验于2006-07/2007-06在华中科技大学同济医学院协和医院中心实验室和骨科实验室完成。①用全物理相过程制备三维疏松多孔的丝素蛋白支架材料,将鼠骨髓骨髓间充质干细胞与上述载体材料体外复合培养。②观察指标:应用倒置显微镜、扫描电镜观察细胞与材料复合生长情况;复合培养1周后流式细胞仪检测细胞周期了解材料有无致畸性;在培养第2,4,6,8天用MTT法测定细胞增殖情况;诱导培养条件下在第2,4,6,8天测定碱性磷酸酶活性,了解材料对骨髓间充质干细胞分化的影响。结果:①倒置相差显微镜和扫描电镜观察显示材料为疏松多孔结构,孔隙大小较均一,骨髓间充质干细胞能在材料上良好地黏附、增殖和生长。②复合培养条件后流式细胞仪检测显示细胞周期未受材料的影响,未检测到有异倍体细胞。③MTT法检测显示细胞增殖未受材料的影响,诱导培养条件下检测碱性磷酸酶活性显示其未受到材料的影响结论:用全物理相过程可初步制备具有良好的生物相容性和较好孔隙率的三维疏松多孔的天然支架材料,其有望作为组织工程理想支架材料。
- 马亮王洪李艳军周游
- 关键词：丝素蛋白生物相容性
- 透明质酸钠不同给药途径干预早期骨关节炎兔软骨细胞的凋亡被引量：8
- 2007年
- 目的:观察前交叉韧带横断造成兔早期骨关节炎软骨细胞凋亡的变化,以及应用关节内和静脉注射透明质酸钠对软骨细胞凋亡的影响。方法:实验于2006-04/09在华中科技大学同济医学院协和医院骨科实验室完成。共选取36只新西兰兔,随机数字表法分成正常组、骨关节炎组、关节内注射透明质酸钠组、静脉注射透明质酸钠组,每组9只。正常组不做任何处理,作为对照;骨关节炎组仅行前交叉韧带横断术;关节内注射透明质酸钠组行前交叉韧带横断术后给予关节腔内注射透明质酸钠;静脉注射透明质酸钠组行前交叉韧带横断术后给予静脉内注射透明质酸钠。所有实验动物在术后8周处死。应用苏木精-伊红染色观察关节软骨组织的病理学变化,原位末端标记法标记凋亡细胞,在前交叉韧带横断术前、术后6,8周分别进行血液检测。观察各组动物的组织学检查、Mankin评分、凋亡指数和血液检测结果。结果:纳入新西兰兔36只,均进入结果分析。①所有动物的血液检查包括红细胞、白细胞、血小板计数以及血尿素氮、肌酐、电解质,结果均在正常范围内。②应用透明质酸钠干预的关节内注射透明质酸钠组和静脉注射透明质酸钠组与未用透明质酸钠干预的骨关节炎组相比较,前者组织病理学改变明显轻于后者。③骨关节炎组的Mankin评分与其他三组差异有显著性[(8.97±1.02),(0.00±0.00),(5.62±0.86),(6.13±0.64)分,P<0.05]。④各组均发现软骨细胞凋亡,并且骨关节炎组的凋亡指数显著高于其他三组[(27.38±3.46)%,(5.17±1.06)%,(12.47±2.13)%,(14.51±2.87)%,P<0.05],正常组的凋亡指数与其他三组差异有显著性意义(P<0.05)。结论:前交叉韧带横断所致兔早期骨关节炎的软骨细胞凋亡明显增加,关节内和静脉内注射透明质酸钠均能有效抑制其软骨细胞凋亡。
- 周游王洪杨述华马亮
- 关键词：透明质酸钠骨关节炎给药途径
- 过继负载HSP60的致耐受性DC对小鼠血管内皮功能的影响被引量：4
- 2006年
- 目的:探讨负载热休克蛋白60(HSP60)的致耐受性树突状细胞(DC)接种对apoE-nu ll小鼠血管内皮功能的影响。方法:分离apoE-nu ll小鼠骨髓DC,分别用HSP60和HSP60加雷帕霉素处理DC,分别获得负载HSP60 DC(DChsp)和致耐受DC(DChsp+r)。体外检测各组DC的功能。分别用DChsp、DChsp+r和盐水经静脉接种高脂饲养apoE-nu ll小鼠,共两次;设C57BL/6小鼠为未接种正常对照。末次接种后两周检测T细胞对HSP60的反应和主动脉环的内皮依赖性舒张功能。结果:体外HSP60可促进DC表达CD86及刺激淋巴细胞增殖,而致耐受DC其CD86表达显著下降。接种小鼠后,DChsp促进炎性反应,加重内皮舒张功能障碍;而DChsp+r明显抑制炎性反应,增强内皮舒张功能。结论:热休克蛋白60致耐受性树突状细胞接种可抑制HSP60特异性免疫应答,增强血管内皮舒张功能。
- 李大主吴伟周游杨克平胡英峰曾秋棠
- 关键词：热休克蛋白质类树突细胞免疫法
- 冷冻同种异体骨软骨移植修复大面积关节软骨缺损的可行性研究被引量：11
- 2007年
- 目的观察冷冻同种异体骨软骨移植修复大面积关节软骨缺损的可行性,为临床应用提供实验依据。方法共选取36只新西兰兔,随机数字表法分成供体组、实验组和对照组,每组12只。供体组制备冷冻同种异体胫骨内侧髁骨软骨移植物后处死;实验组将经程序深低温冷冻保存的同种异体胫骨内侧髁移植;对照组将取下的胫骨内侧髁原位植入。所有实验动物在术后12周处死。应用苏木精-伊红染色观察关节软骨组织的病理学变化,软骨缺损的组织学评分以半定量的改良Wakitani score法评估,内容包括:细胞种类、髓质染色、表面完整性、软骨的厚度、移植软骨在受体周围组织的完整性5个方面,采用0、1、2、3、4评分,最高总分14分。观察两组动物的大体标本、X线片、组织学检查、Waki-tani score评分及免疫组织化学检查结果。结果①移植软骨的大体观察:两组动物关节活动度正常,关节腔无粘连、无积液,实验组移植软骨颜色及高度与周围关节软骨大致相同,关节面较平整,基底部界限模糊。对照组关节软骨面平整、无塌陷,厚度不变。②两组动物关节X线片均见骨折线已模糊,对位、对线良好。③组织学检查:两组动物关节软骨均已被透明软骨覆盖,细胞排列有序,软骨基质大量分泌,未见淋巴细胞和浆细胞浸润。④两组动物关节软骨Wakitani score评分结果无显著性差异,总评分相近(P>0.05)。⑤两组修复软骨Ⅱ型胶原免疫组织化学染色强阳性。结论冻存同种异体骨软骨移植后可完全修复大面积关节软骨缺损,并与自体骨软骨块修复兔的关节软骨缺损在组织学上相近,未见免疫排斥反应。
- 王洪周游李宝兴马亮袁文旗李艳军崔树北
- 关键词：关节软骨同种异体移植
- 关节软骨损伤修复的研究进展被引量：3
- 2007年
- 关节软骨是滑膜关节重要的结构和功能单位，对维持关节运动功能具有非常重要的意义。各种疾病和外伤造成的关节软骨退变或缺损在临床上很常见，损伤后的关节软骨自身修复能力十分有限。因此，关节软骨损伤通常会导致更严重的关节软骨退变。关节软骨损伤修复一直是骨科领域亟待解决的重要课题，许多学者进行了有益的探讨。现就关节软骨损伤修复的研究进展作一综述。
- 周游王洪
- 关键词：骨损伤修复滑膜关节关节软骨退变关节运动功能关节软骨损伤骨科领域
- 负载热休克蛋白60的致耐受性树突状细胞疫苗对小鼠动脉粥样硬化斑块的影响被引量：10
- 2006年
- 目的:探讨负载热休克蛋白60(HSP60)的致耐受性树突状细胞(DC)接种对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块的影响。方法:制备ApoE-/-小鼠骨髓DC,分别用HSP60或HSP60加雷帕霉素(rap)处理获得DCHSP60和rap-DCHSP60,体外检测各组DC功能。分别用CFSE染色的DCHSP60和rap-DCHSP60及PBS经静脉接种高脂饲养ApoE-/-小鼠3次,末次接种后8周观察各组斑块面积,CD4+T细胞和DC在斑块中浸润情况及脾细胞对HSP60的反应。结果:体外HSP60负载DC CD86表达显著高于未负载DC,而致耐受DC CD86表达显著低于未负载DC。接种小鼠后,DCHSP60组斑块中炎性细胞浸润明显多于PBS组,DCHSP60组斑块面积大于PBS组;而rap-DCHSP60组炎性细胞浸润明显减少,斑块面积显著小于PBS组;HSP60刺激脾细胞后,DCHSP60组IFN-γ分泌增加,而rap-DCHSP6组IL-10分泌增加,反应呈抗原特异性。结论:负载HSP60的耐受性DC接种可抑制HSP60特异性免疫反应,抑制动脉粥样斑块中的炎症反应和斑块的进展。
- 李大主周游吴伟曾秋棠李裕舒王祥冯义柏曹林生
- 关键词：热休克蛋白质类动脉硬化树突细胞
- 热休克蛋白60对小鼠树突状细胞成熟及免疫功能的影响被引量：7
- 2006年
- 目的探讨动脉粥样硬化中重要炎性物质———热休克蛋白60(HSP60)体外对小鼠树突状细胞(mDC)功能的影响。方法从近交系C57BL/6J小鼠骨髓中提取mDC,体外培养成熟后分别与3、10μg/ml mHSP60或PBS孵育24 h,观察其形态改变;流式细胞仪检测mDC表面标志;混合淋巴细胞反应(MLR)测定mDC刺激功能;ELISA法测定MLR上清液中细胞因子浓度。结果mHSP60处理组较对照组,mDC突起增加明显;CD80及CD86表型显著增加;淋巴细胞刺激功能明显增强;上清液细胞因子IL-12、IFN-γ增加(P<0.01)而IL-4增加不明显(P>0.05),IFN-γ/IL-4比值升高。以上变化mHSP60高剂量处理组较低剂量处理组更明显。结论mHSP60体外可以促进mDC功能,且作用呈剂量依赖性。
- 吴伟李大主周游曾秋棠
- 关键词：热休克蛋白60树突状细胞动脉粥样硬化细胞表型细胞因子
- 热休克蛋白60对小鼠树突状细胞功能影响体外研究被引量：2
- 2007年
- 目的探讨动脉粥样硬化中重要炎性物质——热休克蛋白60(HSP60)体外对小鼠树突状细胞(mDC)功能影响。方法小鼠骨髓提取DC,体外培养成熟后与两种浓度mHSP60孵育,动态观察DC突起改变;流式细胞仪检测孵育前后mDC表面标志改变;MLR测定孵育前后mDC刺激功能变化;ELISA法测定MLR上清液中细胞因子浓度。结果孵育后,mDC突起增加明显;CD11c+、CD80及CD86表型显著增加;淋巴细胞刺激功能明显增强;分泌细胞因子IL-12、IFN-γ增加(P<0.01)而IL-4增加不明显(P>0.05),IFN-γ/IL-4比值升高。结论mHSP60体外可以促进mDC功能,作用呈剂量依赖性。
- 吴伟李大主周游曾秋棠
- 关键词：热休克蛋白60树突状细胞表型细胞因子
