吴炳礼
- 作品数：16 被引量：53H指数：5
- 供职机构：汕头大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省高等学校自然科学研究重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 医学生参加分子生物学科研项目的综合素质调查分析被引量：1
- 2008年
- 近十余年来，中国的高等医学教育获得了很大的发展，但与此同时，医学生的科研创新能力较差等深层次问题也逐渐凸现出来。为了切实提高医学生的科研创新能力。更好地培养高素质高等医学人才，近年来，汕头大学医学院生物化学与分子生物学教研室一直致力于开展医学生参加的科研项目。为了准确把握医学生的整体状况，在实施项目研究之初，对他们的综合素质进行了一次系统问卷调查，结果发现英语水平和电脑水平较低是医学生综合素质中的主要负性因素，可能会对他们的科研创新能力的培养带来不良影响。
- 吴炳礼佘凌冰李恩民
- 关键词：医学生英语水平
- 食管癌患者血清中NGAL蛋白含量检测及其临床意义被引量：3
- 2007年
- 目的:探讨食管癌患者血清中NGAL蛋白的含量及其临床意义。方法:双抗体夹心ELISA法检测97例食管癌患者和85名正常人血清中NGAL蛋白的含量。联合Western blot和免疫荧光技术检测5种食管癌细胞系表达NGAL蛋白的异质性情况。结果:97例食管癌患者血清中NGAL蛋白含量为(5.94±2.86)μg/L,85名正常人为(4.94±2.58)μg/L,差异有统计学意义,P=0.015。实验数据散点分布结果表明,血清NGAL蛋白含量最高值亚群属于食管癌患者,最低值亚群属于正常人;而多数数据相互交叉。Western blot和免疫荧光检测结果一致,表明SHEEC、EC18和EC8712与EC109和EC171相比,前3种食管癌细胞系表达NGAL蛋白的水平明显高,提示食管癌细胞表达NGAL蛋白异质性明显。结论:食管癌患者血清中NGAL蛋白的含量明显高于正常人。因为异质性所致,通过检测血清中NGAL蛋白含量来判定食管癌的发生发展,其临床意义是有限的。
- 杜则澎李恩莲吴炳礼张晓玲庄东红
- 关键词：食管肿瘤酶联免疫吸附测定血清
- pPIC9载体高效表达数学模型的建立及其实验验证
- 对甲醇营养型毕赤酵母表达系统的研究和应用有近20年的历史。大量文献资料表明,许多外源基因可以在毕赤酵母中成功表达,但表达水平有时相差很大。基因表达的影响因素较多。迄今为止,人们尚不能在实验前对目的基因的表达水平进行有效评...
- 吴炳礼
- 关键词：毕赤酵母数学模型判别函数
- 文献传递
- 重组毕赤酵母及其表达NGAL蛋白的方法
- 本发明涉及NGAL蛋白，公开了重组毕赤酵母及其表达NGAL蛋白的方法。本发明通过PCR扩增、连接、转化与筛选，最终获得高效表达NGAL蛋白的重组毕赤酵母菌株。该菌株能将目标蛋白分泌到培养基中，可达＞100mg/L，而且无...
- 李恩民张丕显吴炳礼杜则澎许丽艳
- 文献传递
- 食管癌细胞SHEEC中NGAL基因5'-UTR和3'-UTR的克隆与鉴定被引量：10
- 2003年
- 背景与目的:NGAL(neutrophilgelatinase-associatedlipocalin)基因是lipocalin家族的一个新成员。以往我们曾研究发现NGAL基因在TPA诱导永生化食管上皮细胞SHEE向食管癌细胞SHEEC恶性转化的过程中显著过表达,但表达调控机制不清楚。本研究拟从SHEEC细胞中克隆NGAL基因的5'-UTR和3'-UTR(untranslatedregion)并进一步明确其结构特征。方法:采用RACE方法从SHEEC细胞中克隆NGAL基因的5'-UTR和3'-UTR;在测序基础上进行BLAST分析鉴定。结果:结合以往的实验结果,从SHEEC细胞中克隆了NGAL基因的69bp5'-UTR和147bp3'-UTR,而且序列分析未发现突变。结论:SHEEC细胞中的NGAL基因具备完整的5'-UTR和3'-UTR结构。
- 李恩民许丽艳熊华淇蔡唯佳吴炳礼张灿张永发林艳沈忠英
- 关键词：食管肿瘤NGAL基因基因过表达RACE法
- NGAL及其功能相关蛋白正反馈环促食管癌发生发展分子机制研究
- 李恩民许丽艳谢剑君方王楷杜则澎吴炳礼许镒洧彭裕辉谢仰民吴健
- 中国是世界上最主要的食管癌高发国，全世界每年40余万食管癌病例的一半，甚至有些年份一半以上发生在中国；广东潮汕地区是中国六大食管癌高发区之一，而且还是唯一的沿海食管癌高发区，地区疾病特色十分鲜明。因此，立足潮汕，研究解决...
- 关键词：
- 关键词：食管癌
- 食管癌相关功能未知基因的电子克隆延伸与ncRNA的发现被引量：3
- 2008年
- 背景与目的:运用电子克隆等生物信息学方法研究筛查出的48个与食管癌相关功能未知的DNA序列片段,为食管癌相关研究提供指导。材料与方法:以48个DNA序列片段为核心,运用BioEdit建立本地数据库;通过电子克隆的方法对48个DNA序列中功能未知的基因片段进行序列延伸;通过BLAST同源分析搜索48个基因的内含子以及上下游基因间隔区中存在的非编码RNA(noncodingRNA,ncRNA)。结果:48个DNA序列中功能未知的基因片段通过电子克隆的方法平均能够延伸190bp以上;在48个基因的内含子以及上下游基因间隔区存在着与已知ncRNA相似性很高的片段。结论:运用电子克隆的方法可以使某些食管癌相关功能未知基因的序列得以明显延伸;一些食管癌相关基因所在的染色体区段存在着某些与ncRNA高度相似的片段,这提示我们,ncRNA可能参与食管癌的发生过程,其具体功能有待深入研究。
- 吴炳礼许丽艳应晓敏牛永东李伍举李恩民
- 关键词：生物信息学非编码RNA电子克隆
- 人食管癌cDNA酵母杂交文库的构建与鉴定及其应用被引量：5
- 2003年
- 以往在研究由促癌物 12 o 十四烷酰佛波醇 13 乙酯 (12 o tetradecanoylphorbol 13 acetate,TPA)诱导的人永生化食管上皮细胞恶性变中基因的差异表达情况时 ,曾获得中性粒细胞明胶酶相关lipocalin (neutrophilgelatinase associatedlipocalin ,NGAL)等新的食管癌癌变相关基因 .为深入研究这些癌变相关基因在食管癌中以蛋白质 蛋白质或蛋白质 DNA相互作用为基础的功能网络调控关系 ,建立了一个食管癌cDNA酵母杂交文库 .采用Trizol试剂从一种新的人食管癌细胞 (SHEEC ,由人永生化食管上皮细胞转化而来 )中提取细胞总RNA ,采用OligotexmRNAKit从细胞总RNA中制备PolyA+ mRNA ,采用SuperScriptTM ChoiceSystemForcDNASynthesisKit合成cDNA ,以PolyA+ mRNA为探针 ,化学发光法监测cDNA合成的质量 ,以 pGADT7为载体构建了SHEEC细胞的cDNA酵母杂交文库 .文库的滴度为 1 19× 10 9cfu/ml,重组片段大小主要集中在 0 5～6 0kb ,重组率为 5 0 % .在此基础上 ,应用酵母单杂交技术手段对该文库中的NF κB元件结合因子进行了筛选 ,在SD/ his/ leu/[+15mmol/L 3 AT ]缺陷培养基平板上共获得了约 36 0个单克隆 .按照平板上酵母单克隆直径的大小 ,选择直径大于 2mm者 91个 ,提取质粒进行酶切鉴定和一对一酵母单杂交验?
- 许丽艳李恩民牛永东蔡唯佳韩溟吴炳礼张灿沈忠英曾毅
- 关键词：人食管癌CDNA文库
- 食管癌细胞SHEEC中NGAL基因5′端转录调控区的克隆及其顺式作用元件定位分析被引量：5
- 2003年
- 目的 :从食管癌细胞SHEEC中克隆NGAL基因 5′端转录调控区并进行顺式作用元件定位分析。方法 :采用PCR法克隆NGAL基因 5′端转录调控区 ,并通过NCBI公共数据库BLAST序列分析鉴定突变。应用KEGG序列数据库对该调控区进行顺式作用元件定位分析。结果 :从SHEEC中获得了NGAL基因 5′端转录调控区 - 112 4～ +6 5区段的克隆 ,该区段序列有 3处点突变 ,在NGAL基因- 112 4～ +6 5区段共鉴定出 78个有效顺式作用元件位点。结论
- 李恩民许丽艳吴炳礼张灿张永发林艳蔡唯佳沈忠英
- 关键词：食管癌细胞基因NGAL基因转录调控顺式作用元件TPA
- NGAL蛋白诱导食管癌细胞发生自噬被引量：4
- 2009年
- 以往研究证明,中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白NGAL(neutrophil gelatinase-associated lipocalin)与食管癌密切相关,改变NGAL表达能够对癌细胞的形态结构产生明显影响,但确切的作用机制不明.在酵母细胞中表达NGAL蛋白,柱层析分离纯化.筛选NGALR(NGAL receptor)高表达与弱表达的人食管癌细胞系EC1.71和EC109作为实验细胞模型.5-FAM标记NGAL蛋白,加入到细胞培养上清中,对比研究NGAL蛋白入胞情况、细胞形态学改变、细胞自噬体产生、自噬相关基因表达、细胞内铁离子与铁蛋白水平以及相关细胞信号转导激酶的活性等.结果表明,NGAL蛋白可经由内吞途径进入食管癌细胞发挥作用,致使细胞发生典型的自噬性形态结构变化,自噬体大量产生,自噬相关基因的表达发生相应变化,ERK被激活,但细胞内的铁离子与铁蛋白未受明显影响.上述结果提示,诱导细胞发生自噬是外源性NGAL蛋白经由内吞途径进入食管癌细胞发挥作用的机制之一,与NGAL蛋白跨膜转铁未见直接关联,而ERK信号转导途径可能参与了这一过程.
- 张丕显方王楷许丽艳蒋纪恺沈忠英杜则澎陆晓峰周飞谢剑君吴炳礼崔有宏谢东李恩民
- 关键词：NGAL自噬细胞周期食管癌细胞
