吕茜
- 作品数:27 被引量:35H指数:3
- 供职机构:徐州市中心医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省自然科学基金徐州市科技计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- ERH基因在制备膀胱癌诊治产品中的应用
- 本发明涉及ERH基因在制备膀胱癌诊治产品中的应用。发明人通过检测膀胱癌组织及癌旁组织,发现ERH与膀胱癌具有很好的相关性,可用于制备膀胱癌辅助诊疗制剂,此外,通过构建RNA干扰载体进行细胞功能实验,研究ERH对膀胱癌细胞...
- 韩从辉吕茜庞昆郝琳刘颖
- 文献传递
- 一种包含MAP30蛋白的脂质体的制备及包载方法
- 本发明提供一种包含MAP30的脂质体的制备及包载方法,采用薄膜水化法制备,具体包括以下步骤:取10 mg二棕榈酰磷脂酰胆碱DPPC、1 mg胆固醇、1 mg二硬脂酰磷脂酰乙酰胺‑甲氧基聚乙二醇2000DSPE‑mPEG2...
- 张培影韩从辉吕茜郝林刘颖
- 文献传递
- 应用Ad Easy腺病毒载体系统构建人肌浆网钙离子ATP酶2a(SERCA2a)被引量:1
- 2010年
- 目的:利用Adeasy腺病毒表达系统构建含人肌浆网钙离子ATP酶2a(SERCA2a)基因重组腺病毒,并在HEK293细胞中扩增制备重组腺病毒。方法:将人SERCA2a基因全长cDNA(3700bp)插入到腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV,成功构建pAd-TrackCMVSERCA2a重组质粒,经PmeI酶切线性化,采用电击法转入到已含Adeasy质粒的电感受态菌BJ5183进行重组。挑选同源重组质粒,PacI酶切线性化转染HEK293细胞包装成重组腺病毒颗粒,荧光检测有绿色荧光蛋白表达。将重组病毒和SD大鼠心肌细胞共培养,western-blot检测SERCA2a可以在大鼠心肌细胞过表达且影响了胞内SERCA2a的活性。结果:成功包装含人SERCA2a基因的重组腺病毒,并可以有效感染SD大鼠心肌细胞。结论:利用新型腺病毒载体在短时间内成功构建了携带有人SERCA2a基因的腺病毒,为以后进一步研究人SERCA2a基因治疗提供了新途径。
- 吕茜魏翠张清林王洁宫海滨
- 关键词:转染
- 心力衰竭大鼠骨髓间充质干细胞形态及功能的改变被引量:1
- 2015年
- 目的研究心力衰竭大鼠的骨髓间充质干细胞(BMSC)在细胞形态、蛋白表达及细胞因子分泌能力的变化。方法本文采用部分缩窄腹主动脉法制备大鼠压力超负荷性慢性心力衰竭模型,分离和培养模型组和假手术组大鼠的BMSC,待细胞传代到第6代,观察细胞的形态和蛋白表达的变化情况。分别以1×108/L的细胞密度培养模型组和假手术组大鼠BMSC,72 h后收集上清。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)技术检测BMSC培养上清中的HGF、IGF-1、PDGF、SCF、FGF和VEGF的含量。组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析(ANOVA)。结果模型组BMSC的最小细胞直径、单个细胞的平均面积及单个细胞的蛋白表达量均显著低于假手术组,差异具有统计学意义(P<0.01)。模型组细胞培养上清中的SCF和PDGF的浓度分别为(6.06±1.18)ng/L和(1.25±0.32)mg/L,明显低于假手术组(12.56±1.15)ng/L和(3.52±0.23)mg/L,而模型组的VEGF浓度为(652.44±83.19)ng/L,明显高于假手术组(419.97±67.85)ng/L,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论心力衰竭大鼠的BMSC与健康大鼠相比,细胞形态发生显著改变,单个细胞的蛋白表达量及细胞因子SCF、PDGF的分泌能力均降低,但VEGF的分泌量上升。
- 王秀力刘颖吕茜王洁王雷宫海滨
- 关键词:腹部主动脉缩窄心力衰竭骨髓间充质干细胞
- β_2肾上腺素能受体过表达后大鼠心肌细胞收缩功能的改变及机制被引量:2
- 2009年
- 目的:探讨大鼠心肌细胞过表达2-AR后心肌细胞收缩功能的改变及其可能机制。方法:采用胶原酶消化法分离培养大鼠心肌细胞,转染携带β2-A目的基因的重组腺病毒,通过免疫印迹方法检测细胞β2-AR蛋白表达的变化,通过ELISA方法检测细胞中cAMP水平的改变,采用单个细胞动态边缘检测系统测定细胞收缩功能的变化。结果:与正常心肌细胞相比,β2-AR的转染增加了细胞上β2-AR蛋白的含量(P<0.05),并促进胞内cAMP水平的增加(14.763.15pmol/mlvs9.31.4pmol/ml,P<0.05);进而增强了心肌细胞的基础收缩(8.203±2.596%vs5.472±2.918%,P<0.01),但不改变最大收缩(9.128±2.852%vs9.366±2.646%)。结论:β2-AR的过表达能够增加细胞内cAMP水平并改善心肌细胞的收缩功能。
- 宫海滨吕茜王洁庞慧王雷
- 关键词:Β2-肾上腺素能受体基因转染心肌细胞
- 心肌样细胞移植对大鼠心肌梗死的疗效观察
- 2017年
- 目的观察心肌样细胞(CLC)移植对心肌梗死大鼠的疗效。方法制备大鼠心肌梗死动物模型,4周后超声检测大鼠血流动力学变化;体外分离、纯化大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC),15 ng/ml的胰岛素样生长因子1(IGF-1)诱导BMSC分化为CLC 3,7,14和21 d,采用Western blot技术检测心肌标志性蛋白α-SMA,Ttroponin-T和Troponin-I的表达。CLC移植治疗心肌梗死大鼠,实验共分4组:心肌梗死组,生理盐水对照组,BMSC组及CLC组。移植治疗4周,超声检测血流动力学变化后取材大鼠心肌,冰冻切片,HE染色后检测大鼠心肌梗死的面积。统计分析采用单因素方差分析,实验组之间比较采用t检验。结果心肌梗死模型制备4周,模型组大鼠的LVSP数值为(118.74±11.56)mm Hg,低于假手术组(130.42±12.58)mm Hg,模型组大鼠的LVEDP数值为(14.29±7.63)mm Hg,高于假手术组(2.44±1.11)mm Hg,+dp/dt数值为(2645.17±468.16)mm Hg/s低于假手术组(4087.29±525.17)mm Hg/s,-dp/dt数值为(2487.80±348.21)mm Hg/s低于假手术组(3865.81±614.37)mm Hg/s,差异均具有统计学意义(P<0.01)。IGF-1诱导BMSC 3,7,14和21d后均检测到α-SMA、Troponin-T和Troponin-I的表达,与第3天比较P<0.01。移植治疗4周后发现生理盐水对照组大鼠血流动力学没有任何改变,BMSC组及CLC组大鼠的LVEDP数值分别为(9.15±4.54)mm Hg和(4.67±3.46)mm Hg,低于心肌梗死组(14.29±7.63)mm Hg,+dp/dt数值分别为(3245.45±368.76)mm Hg/s和(3612.78±468.54)mm Hg/s,高于心肌梗死组(2645.17±468.16)mm Hg/s,-dp/dt数值分别为(3014.11±412.12)mm Hg/s和(3347.21±398.56)mm Hg/s,高于假手术组(2487.80±348.21)mm Hg/s,同时CLC组大鼠的LVEDP(4.67±3.46)mm Hg低于BMSC组(9.15±4.54)mm Hg,±dp/dt数值分别是(3612.78±468.54)mm Hg/s和(3347.21±398.56)mm Hg/s高于BMSC组(3245.45±368.76)mm Hg/s和(3014.11±412.12)mm Hg/s,差异均具有统计学意义(P<0.01)。BMSC组和CLC组的心梗面积与心肌梗死组比较明显减小,CLC组的梗死面积与BMSC组比较也明�
- 王秀力姜世强刘颖王洁吕茜王雷李春梅宫海滨
- 关键词:间质干细胞胰岛素样生长因子I心肌梗死细胞移植
- 心衰大鼠心肌细胞过表达β_2受体对SERCA2a/PLB的影响及分子机制研究被引量:1
- 2016年
- 目的:检测过表达β_2-AR蛋白的慢性心衰大鼠心肌细胞SERCA2a/PLB的改变及相关信号转导通路的改变,初步探讨过表达β_2-AR基因影响心衰大鼠心肌细胞收缩功能的分子机制。方法:通过腹主动脉缩窄术建立大鼠慢性心力衰竭模型并采用胶原酶消化法分离心衰大鼠心肌细胞,转染携带β_2-AR目的基因的重组腺病毒,通过免疫印迹方法检测β_2-AR的过表达对心衰时SERCA2a/PLB的影响,及其导致的心肌收缩功能的改变,探讨过表达β_2-AR保护心衰大鼠心肌细胞的分子信号机制。结果:心衰后β_2-AR的过表达改善了PLB与SERCA2a的结合与解离,从而调节了SERCA2a对Ca^(2+)的摄取(P<0.05)。结论:心衰大鼠心肌细胞过表达β_2-AR后,增加的β_2-AR通过PLB/SERCA2a调节了心肌细胞的收缩舒张功能。
- 吕茜刘颖王雷王洁宫海滨
- 关键词:Β2肾上腺素能受体受磷蛋白
- PRRT1基因在制备冠心病诊断产品中的应用
- 本发明公开了PRRT1基因可以作为诊断冠心病的分子标志物。本发明研究证明与正常人相比,冠心病患者血液中PRRT1基因的mRNA表达水平显著下降。根据PRRT1基因与冠心病之间的存在的相关性,可以制备诊断冠心病的试剂盒,该...
- 吕茜刘颖高志康陈碧
- 文献传递
- ICI118551对心力衰竭大鼠心功能的影响
- 2012年
- 目的本研究旨在观察选择性β2-肾上腺素受体拮抗剂ICI118551对心力衰竭大鼠心肌细胞收缩功能的影响。方法通过腹主动脉缩窄术制作大鼠慢性心力衰竭模型,并采用胶原酶消化法分离心肌细胞。随机分为假手术组、心力衰竭空白组、溶剂对照组、心力衰竭+ICI118551组,均培养48h。采用单个细胞动态边缘检测系统测定各组心肌细胞收缩功能的改变。结果与假手术组比较,心力衰竭组心肌细胞存活率明显下降(P<0.01)。与对照组比较,心力衰竭+ICI118551组心肌细胞基础收缩百分比下降(P<0.05)。结论在排除神经体液因素外,选择性β2-AR拮抗剂ICI118551可降低心力衰竭心肌细胞的收缩功能。
- 李燕飞宫海滨吕茜王洁刘颖
- 关键词:心肌细胞心力衰竭大鼠
- hs-CRP和Tn-I与冠心病严重程度的相关性研究被引量:10
- 2009年
- 目的探讨超敏C反应蛋白(hs-CRP)及肌钙蛋白I(Tn-I)与冠心病严重程度的相关性。方法选择2007年5月-2008年10月在心内科住院的疑似冠心病患者86例,其中男性47例,女性39例。所有患者均通过化学发光法检测hs-CRP及Tn-I值,并行冠脉造影计算Gensini积分对冠脉病变程度进行定量评分。根据临床诊断及冠脉病变程度进行分组。通过统计处理进一步明确hs-CRP及Tn-I与冠心病严重程度的相关性。结果hs-CRP及Tn-I与冠心病严重程度呈正相关(P<0.05);hs-CRP与冠脉病变程度无相关性,Tn-I在1~25分组与26~50分组、1~25分组与51~152分组间有统计学差异(P<0.05)。结论hs-CRP和Tn-I均可预测冠心病严重程度,但仅Tn-I与冠脉中重度病变密切相关。
- 曹秋玫宫海滨吕茜
- 关键词:HS-CRP冠心病GENSINI积分