刘玲玲
- 作品数：18 被引量：38H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属同济医院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Th17细胞在小鼠巨细胞病毒感染急性期的作用研究
- 2012年
- 目的整体水平观察Th17细胞在小鼠巨细胞病毒（MCMV）播散性感染急性期的作用。方法建立MCMV播散性感染模型，病毒接种后第3、7、14和28天各处死3只小鼠；同时设模拟感染鼠作为对照。应用real—timePCR法检测MCMV感染鼠脏器MCMVDNA载量；HE染色观察MCMV感染后脾组织病理损伤变化；流式细胞术检测脾细胞中CD4＋IL-17A＋T细胞比率；ELISA法检测脾细胞培养上清中IL-17A蛋白浓度。结果感染急性期唾液腺组织中MCMVDNA于感染后14d最高；脾组织病理损伤也于感染后14d最严重；与模拟感染对照鼠相比，MCMV感染鼠脾细胞中CD4＋IL-17A＋T细胞比率呈升高趋势（均P〈0．01），且于感染后14d达峰值[（1．14±0．09）％VS（0．19±0．04）％，t=17．551，P=0．000]；病毒特异性IL-17A浓度也于感染后14d达峰值[（81．98±12．37）pg／mlVS（44．96±8．44）pg／ml，t=4．281，P=0．006]；脾细胞培养上清中病毒特异性IL-17A水平与唾液腺组织中MCMVDNA载量呈正相关（r=0．54，P〈0．05）；脾组织病理损伤越重，脾细胞培养上清中IL-17A浓度越高。结论Th17细胞主要通过IL-17A参与MCMV播散性感染急性期免疫应答，直接或间接的促进病毒复制或脾组织局部病理损伤，可能是MCMV持续性感染的重要原因之一。
- 李旭芳刘玲玲刘兴楼舒赛男李革方峰
- 关键词：小鼠巨细胞病毒TH17细胞
- IL-17参与巨细胞病毒肝炎致病机制的研究被引量：8
- 2018年
- 目的:在整体水平研究促炎细胞因子IL-17在巨细胞病毒肝炎发病机制中的作用。方法:首先建立MCMV全身播散性感染模型,设立正常对照组、MCMV感染对照组、IL-17阻断组和同型抗体对照组。在实验第7天处死小鼠,Western blot检测各组肝脏组织中IL-17蛋白表达水平,病理评估各组肝组织损伤程度;罗氏生化分析仪检测小鼠血清ALT水平;双抗体夹心ELISA法检测血清中IL-17水平;RT-PCR检测肝脏组织内IL-17R、IFN-γ和IL-10 mRNA的表达。结果:与MCMV感染对照组及同型抗体对照组相比较,IL-17抗体阻断肝脏组织IL-17表达明显下降(P<0.05),病理损伤程度明显减轻,ALT水平显著降低[(146±15)vs(102±11)vs(37±12),P<0.05];血清中IL-17水平降低[(719.76±6.06)vs(722.1±4.62)vs(707.53±8.58),P<0.05];IFN-γ[(0.56±0.06)vs(0.55±0.13)vs(0.96±0.2),P<0.05]与IL-10 mRNA[(0.55±0.073)vs(0.51±0.07)vs(0.903±0.18),P<0.05]的表达明显增加,而IL-17R mRNA表达差异无显著统计学意义[(0.81±0.16)vs(0.89±0.38)vs(0.87±0.23),P>0.05]。结论:促炎因子IL-17高表达参与了巨细胞病毒肝炎的免疫损伤过程,阻断IL-17有助于改善肝功能,减轻肝组织病理损伤。
- 刘玲玲黄媛马迪廖毅刘兴楼李革舒赛男方峰
- 关键词：IL-17巨细胞病毒肝炎
- 黄芩苷对MCMV感染小鼠Th1/Th2细胞特异性转录因子TBX21/GATA-3表达的影响被引量：6
- 2014年
- 目的检测黄芩苷治疗后鼠巨细胞病毒(MCMV)感染模型鼠脾细胞中TBX21、GATA-3蛋白的表达强度,进一步研究黄芩苷在调节Th1/Th2平衡中的作用。方法建立MCMV播散性感染模型,在MCMV接种后24h给予黄芩苷腹腔注射60mg/kg,1次/d,共14d,并设立安慰剂对照组和正常对照组。分别于治疗后3、7和14d取小鼠脾脏,提取脾组织蛋白,用Western blot法分别检测Th1和Th2细胞特异性转录因子TBX21和GATA-3表达强度。结果治疗后3d,黄芩苷治疗组TBX21蛋白表达水平明显高于正常对照组和安慰剂对照组(P<0.01)。治疗后7d和14d,黄芩苷治疗组TBX21蛋白表达水平明显高于正常对照组(P<0.01,P<0.05);而黄芩苷治疗组与安慰剂对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后3d,黄芩苷治疗组GATA-3蛋白表达水平明显低于正常对照组(P<0.01);而与安慰剂对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后7d和14d,GATA-3蛋白表达水平3组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论黄芩苷在MCMV急性感染早期可明显上调TBX21蛋白表达,进而促进Th1细胞免疫应答,有利于机体清除病毒,并对MCMV诱导的Th1/Th2细胞网络改变有一定调节作用。
- 黄永建刘兴楼王慧郭珊刘玲玲李革舒赛男方峰
- 关键词：鼠巨细胞病毒黄芩苷
- 巨细胞病毒的模式识别受体研究进展被引量：3
- 2012年
- 人类巨细胞病毒（HCMV）属疱疹病毒B亚科，为线状双链DNA病毒，在世界范围内普遍感染。在免疫正常的个体，CMV感染大多表现为无症状或亚临床型感染，但在一些免疫低下或免疫抑制人群如胎儿、婴儿、免疫功能不全或缺陷个体则可引起严重疾病。病毒入侵机体，天然免疫应答在第一时间做出反应。天然免疫应答之所以能如此迅速的做出反应，主要依赖细胞表面的模式识别受体。模式识别受体通过识别病毒的病原相关分子模式（如病毒蛋白、核酸），从而引起细胞内信号通路的激活，最终引起转录因子的活化，进而使I型干扰素和炎性因子表达增加，产生免疫和炎性反应。天然免疫是机体抵抗病原微生物入侵的第一道防线，病毒有效的复制首先要躲过天然免疫应答的清除，而病毒感染的最终结局取决于宿主与病毒之间的“力量”角逐。机体多种天然模式识别受体能够识别巨细胞病毒，从而启动机体的天然免疫应答，发挥抗病毒的效应。
- 刘玲玲方峰
- 关键词：巨细胞病毒天然免疫应答模式识别受体
- IL-17参与巨细胞病毒性肝炎的机制研究
- 秦文卿方峰刘玲玲黄媛张菊廖毅刘扬刘兴楼李革舒赛男
- 黄芩苷对HCMV感染的人胚肺成纤维细胞凋亡的影响
- 刘杨廖毅张菊刘玲玲秦文卿黄媛方峰
- 神经干细胞Ankrd17蛋白和MCMW嗜神经蛋白M122相互作用与胎脑发育异常机制
- 目的：构建能表达小鼠Ankrd 17基因的小发卡RNAs(shRNAs)慢病毒载体,为选择性沉默Ankrd17基因在神经干细胞(NSCs)中的表达奠定基础;研究NSCs Ankrd17基因沉默后MCMV感染对其增殖、分化...
- 张菊王慧刘兴楼舒赛男刘玲玲廖毅刘杨李革方峰
- 关键词：胎脑发育异常神经干细胞
- AIM2炎性体识别胞浆鼠巨细胞病毒DNA的实验研究被引量：3
- 2012年
- 目的观察AIM2（absent in melanoma2）在感染早期识别胞浆小鼠巨细胞病毒（MCMV）DNA的变化状况。方法建立MCMV全身播散型感染模型，接种MCMVSmith株后第1、3、5和7天各处死3只小鼠；同时设模拟感染小鼠作为正常对照。Western blot检测脾脏巨噬细胞中AIM2、衔接子凋亡相关点样蛋白（ASC）和caspase-1蛋白的表达状况；同时应用ELISA法检测血清中IL-1β和IL-18的水平；空斑法测定感染小鼠唾液腺感染性病毒滴度。结果MCMV感染后第3、5、7天，小鼠唾液腺组织中感染性病毒滴度逐渐增加；MCMV感染鼠脾脏巨噬细胞中AIM2、ASC和caspase-1蛋白的表达呈现一致的变化，与模拟感染对照鼠比较，AIM2、ASC和caspase-1蛋白相对吸光值在感染后第1天开始升高（P〉0．05），第3天明显升高并达峰值[分别为（1．121±0．243）vs（0．240±0．046），（1．318±0．333）VS（0．248±0．090），（1．085±0．243）VS（0．247±0．064）；P〈0．01]，其后接近正常；MCMV感染鼠血清IL-1β和IL-18水平在感染后第3天也明显高于模拟感染对照鼠[分别为（112．72±5．20）pg／ml VS（47．86±4．35）pg／ml，（42．74±4．23）pg／ml VS（22．60±2．82）pg／ml；P〈0．01]，其后均逐渐下降接近正常。结论MCMC感染早期巨噬细胞通过AIM2炎性体识别胞浆MCMVDNA，可能成为CMV感染及感染后所引起的疾病的治疗靶点。
- 李旭芳刘玲玲舒赛男刘兴楼李革方峰
- 关键词：鼠巨细胞病毒IL-1ΒIL-18
- 体外应用MCMV与PMA/Ionomycin联合诱导Th17细胞的研究被引量：3
- 2011年
- 探讨体外联合应用小鼠巨细胞病毒(MCMV)和佛波酯(PMA)/离子霉素(Ionomycin)诱导Th17细胞产生。分别使用MCMV、PMA/Ionomycin或联合MCMV、PMA/Ionomycin体外刺激BALB/c小鼠脾细胞,利用流式细胞仪检测脾细胞中CD4+IL-17+细胞的比例及平均荧光强度,同时应用ELISA技术检测培养液上清中IL-17蛋白浓度。结果显示:单独使用MCMV或PMA/Ionomycin均不能有效刺激Th17细胞增殖,CD4+IL-17+细胞比例较低;而联合应用MCMV和PMA/Ionomycin可以有效诱导脾细胞向Th17细胞分化,CD4+IL-17+细胞比例达到2.6%,且应用联合诱导方案后可见CD4+IL-17+细胞平均荧光强度(MFI)明显升高。此外,联合应用MCMV和PMA/Ionomycin刺激脾细胞后明显增加培养液上清中IL-17蛋白浓度。我们的研究结果可以为进一步探讨Th17细胞在CMV感染免疫中的作用奠定实验基础。
- 李旭芳舒赛男刘兴楼刘玲玲郭珊王慧李革方峰
- 关键词：CMVIL-17平均荧光强度
- 人巨细胞病毒感染THP-1源性巨噬细胞对IL-1β表达的影响被引量：2
- 2017年
- 【摘要】目的观察HCMV感染THP-1源性巨噬细胞后，促炎细胞因子IL-1β表达的时序性变化。方法构建HCMV感染THP-1源性巨噬细胞模型，设立HCMVAD169标准毒株感染组、模拟感染对照组、LPS＋ATP对照组和poly（dA：dT）对照组。用ELISA法测定THP-1源性巨噬细胞培养上清IL-1β水平在病毒感染细胞后1h、3h、6h、12h、24h和48h的时序性变化。分别用real-timePCR和westernblot检测感染后6hIL-1β基因和蛋白的表达水平。结果HCMV感染THP-1源性巨噬细胞6h后，促炎细胞因子IL-1β基因的相对表达量是模拟感染组的7．77倍。HCMV感染THP-1源性巨噬细胞1h后，细胞上清IL-1β表达量逐渐显著增高，感染后3h和6h继续升高，感染后12h达到高峰，一直持续到48h。HCMV感染THP-1源性巨噬细胞6hHCMV感染组IL-1β蛋白表达明显高于模拟感染对照组和poly（dA：dT）对照组，而与LPS＋ATP对照组比较无统计学差异。结论HCMV感染THP-1源性巨噬细胞可诱导IL-1β高表达，且呈时序性增高趋势。
- 刘兴楼马迪舒赛男刘玲玲方峰
- 关键词：人巨细胞病毒THP-1源性巨噬细胞IL-1Β
