刘武杰
- 作品数：27 被引量：109H指数：6
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- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- H9N2亚型禽流感病毒传播途径特性的比较和其表面基因序列的测定和分析
- 选择中国大陆最早分离的H9N2亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)A/Chicken/Guangdong/SS/94(H9N2)(缩写为SS株)和1998年大流行时期分离的H9N2亚型AI...
- 石火英陈素娟高崧刘武杰刘秀梵
- 关键词：H9N2亚型AIVF株HA和NA基因
- 文献传递
- 鸡痘病毒复制非必需区的选择对重组鸡痘病毒免疫效力的影响被引量：10
- 2005年
- 母源抗体的干扰是重组鸡痘病毒(FPV)活载体疫苗至今未能得到大规模推广应用的主要原因,而选择适当的FPV复制非必需区可能是解决这一问题的方法之一。根据已发表的美国致病株FPV的基因组设计两对引物,用PCR方法扩增FPV假定复制非必需区的两个侧翼区FPV1和FPV2 ,利用此假定复制非必需区构建FPV表达载体pP12LS及表达ZJ1株新城疫病毒(NDV)F基因的转移载体pP12LSF。pP12LSF与2 82E4株FPV共转染鸡胚成纤维细胞(CEF) ,经数轮蓝斑筛选得到纯化的重组病毒rFPV_FSC。重组FPV在CEF上连续传2 0代仍具有良好的遗传稳定性。对重组FPV进行免疫效力试验,在SPF鸡上,重组病毒rFPV_FSC和与之仅有复制非必需区差异的rFPV_FSB均能抵抗NDV强毒的攻击,提供10 0 %的保护。但在有母源抗体的商品鸡上,rFPV_FSC与rFPV_FSB的免疫效力却有显著差异,保护率分别为10 0 %和6 1 5 4 % ,rFPV_FSC的免疫效力与NDV常规油苗相当。试验结果表明,母源抗体对重组FPV的免疫效力有一定的影响。
- 孙蕾刘武杰陈素娟石火英刘秀梵吴艳涛张体银
- 关键词：鸡痘病毒免疫效力
- 六株H4N6亚型水禽禽流感病毒分离株NA基因的进化分析被引量：5
- 2009年
- 为了丰富禽流感病毒(AIV)神经氨酸酶(NA)的分子流行病学资料,通过对2002～2007年分离自华东地区家鸭的6株稀有H4N6亚型低致病性AIV的NA基因序列进行的分析,发现病毒NA基因全长约1464～1465bp,开放阅读框(ORF)都位于NA基因的19～1431位,长度均为1413bp。6株病毒NA基因之间的同源性为90.8%～99.8%,其中5株病毒NA基因的同源性非常高,达到96.0%～99.8%,但另外1株与其他病毒NA基因的同源性相对较低,介于90.8%～92.2%,进一步分析表明该病毒可能来源于其他地区禽类。对NA基因的推导氨基酸分析表明,ORF编码470个氨基酸,NA没有发生茎部缺失。研究结果表明,水禽内的H4N6亚型禽流感病毒进化相对比较缓慢。
- 仇保丰胡顺林刘武杰唐应华彭大新刘秀梵
- 关键词：禽流感病毒神经氨酸酶基因
- 荧光定量RT-PCR检测H5亚型禽流感病毒方法的建立与验证被引量：5
- 2011年
- 根据H5亚型禽流感病毒HA基因上的保守序列,设计合成引物,以H5亚型禽流感病毒HA基因重组质粒为标准品绘制标准曲线,建立了荧光定量逆转录聚合酶链反应检测方法。结果表明,本试验建立的标准曲线循环阈值(Ct值)与模板浓度具有良好的线性关系,相关系数为0.995,灵敏度约为8拷贝/μL,相当于8个AIV颗粒,对新城疫病毒和其他禽病病毒无交叉反应,特异性好、重复性佳,为H5亚型禽流感病毒检测提供了一种特异、敏感、快速、低成本、高通量、生物安全性好的定量检测方法。对178份临床泄殖腔棉拭子样品的检测,该方法结果与经典病毒分离方法符合率大于90.0%,在禽流感病毒临床样品快速筛检、流行病学监测等方面显示了良好的应用前景。
- 曹军平陆桂平徐向明顾敏徐全刚刘武杰彭大新刘秀梵
- 关键词：H5亚型禽流感病毒荧光定量RT-PCR
- H9N2亚型禽流感病毒传播途径特性的比较和其表面基因序列的测定和分析
- 选择中国大陆最早分离的H9N2业型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)A/Chicken/Guangdong/SS/94(H9N2)(缩写为SS株)和1998年大流行时期分离的H9N2亚型AI...
- 石火英陈素娟高崧刘武杰刘秀梵
- 关键词：H9N2亚型AIVF株HA和NA基因
- 华东地区家鸭中N1亚型禽流感病毒NA基因的遗传进化分析被引量：1
- 2009年
- 为了解华东地区家鸭内禽流感病毒的遗传进化情况,对2002-2006年分离自华东地区家鸭的3种主要N1亚型的禽流感病毒：2株H1N1、10株H3N1和14株H5N1,共26株病毒的NA基因进行了遗传进化分析。结果表明,华东地区家鸭中的N1亚型的禽流感病毒正处于不断进化状态中。14株H5N1禽流感病毒均在NA的茎部缺失20个氨基酸（49-68位）,而其他N1亚型的禽流感病毒的NA都未见发生此缺失。H3N1病毒可能与H1N1病毒发生了NA基因的重排,但是目前还没有直接证据表明华东地区家鸭中H5N1禽流感参与了基因重排。
- 仇保丰刘武杰唐应华彭大新刘秀梵
- 关键词：家鸭禽流感病毒NA基因遗传进化分析
- 两株表达H9亚型禽流感病毒HA基因的重组鸡痘病毒的构建及其免疫效力被引量：2
- 2008年
- 将H9亚型禽流感病毒(AIV)HA基因插入到具有新复制非必需区的通用型质粒载体pP12LS中构建转移载体pP12LSH9A,再分别转染预先感染不同毒力的2种鸡痘病毒(FPV)282E4株和LP株的鸡胚成纤维细胞,经系列蓝斑筛选纯化,获得了2种重组鸡痘病毒(rFPV),分别命名为rFPV282-12LSH9A和rFPVLP-12LSH9A。将这2株rFPV在SPF鸡和带有高水平抗H9亚型AIV母源抗体的商品鸡上分别进行免疫效力试验。结果:rF-PV282-12LSH9A和rFPVLP-12LSH9A在SPF鸡上的排毒保护率均为100%(10/10),在商品鸡上的排毒保护率分别为88%(23/26)和92%(24/26)。结果表明获得了2株在带有抗H9亚型AIV高水平母源抗体的商品鸡上免疫效力较好的rFPV。
- 刘武杰孙蕾陈素娟徐忠林刘金彪刘秀梵
- 关键词：H9亚型禽流感病毒重组鸡痘病毒母源抗体免疫效力
- 3株表达H5亚型AIV HA基因的重组鸡痘病毒的免疫效力比较
- 本文旨在探讨鸡痘病毒ORF073或ORF214基因缺失后，在母源抗体存在情况下对重组病毒免疫效力的影响。将构建好的在ORF073或ORF214基因插入H5亚型AIV HA基因的重组鸡痘病毒(rFPVLP-△73LRH5A...
- 王彦红陈素娟刘武杰仇旭升董丽彭大新刘秀梵
- 关键词：重组鸡痘病毒H5亚型AIV免疫效力
- 文献传递
- H9N2亚型禽流感病毒传播途径特性的比较及其表面基因序列分析被引量：15
- 2007年
- 选择中国大陆最早分离的H9N2亚型禽流感病毒（avian influenza virus，AIV）A／Chicken／Guangdong／SS／94（H9N2）（缩写为SS株）和1998年大流行时期分离的H9N2亚型AIV A／Chicken／Shanghai／F／98（H9N2）（缩写为F株）为研究对象，对其在SPF鸡体内的复制能力和传播途径特性比较后发现，F株在4周龄SPF鸡气管中的复制能力高于SS株，F株可以经气溶腔传播途径传播。SS株不能经气溶腔传播途径传播；利用反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法获取F株和SS株的HA和NA基因的cDNA，序列分析得知，F株和SS株的HA和NA基因的同源性分别是96．6％和98．1％；HA基因的裂解位点氨基酸序列都是PARSSR↓GL。但有5个氨基酸的盖异，即166位N（F）→D（SS）、198位A（F）→V（SS）、217位V（F）→I（SS）、335位G（F）→R（SS）、504位L（F）→S（SS）；2株病毒的NA基因在63～65住都存在氨基酸缺失，但在NA基因红细胞吸附位点的氨基酸序列不同，分别是IKKD—SRSG（F）和IKEDLRSG（SS）。F株和SS株的传播特性差异是否与其表面基因序列有关，有待进一步研究。
- 石火英陈素娟高崧刘武杰刘秀梵
- 关键词：H9N2亚型禽流感病毒F株HA和NA基因
- 表达鸡IL-2基因重组鸡痘病毒及共表达H5亚型AIV HA基因与鸡IL-2基因的重组鸡痘病毒的构建
- 1前言当前我国对禽流感的控制主要依赖常规疫苗的免疫接种,但常规疫苗灭活苗存在成本高及干扰临床检测等缺陷,开发新型疫苗势在必行。鸡痘病毒载体表达外源基因已发展到相当成熟的程度,但现有的重组鸡痘疫苗都存在着免疫保护效果不如灭...
- 云水丽刘武杰张小荣陈素娟彭大新刘秀梵
- 文献传递
