刘文兴
- 作品数：32 被引量：1,240H指数：11
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：中华农业科教基金国家杰出青年科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 猪生殖-呼吸道综合征国内分离毒株的病毒纯化及其结构蛋白分析被引量：9
- 1999年
- 本研究主要对猪生殖呼吸道综合征（ Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ） 国内分离毒株（ Ｃ Ｈ Ｉａ） 进行了病毒纯化及其结构蛋白的分析。选用聚乙二醇（ Ｐ Ｅ Ｇ６０００） 沉淀和差速离心法粗提了经 Ｍａｒｃ１４５ 细胞系增殖的猪生殖呼吸道综合征病毒（ Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ Ｖ） 。并采用非线性蔗糖密度梯度离心法纯化了 Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ Ｖ， 经免疫电镜观察纯化病毒， 发现有较多的胶体金颗粒吸附在直径为４２ ～７８ｎｍ 的病毒粒子周围。经 Ｄｏｔ Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 测定纯化病毒的滴度可达１ １６００ 以上， 并利用 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ 和 Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ 两种方法对国内分离毒株（ Ｃ Ｈ Ｉａ） 与欧洲型（ Ｌｅｌｙｓｔａｄ） 、美洲型（ Ｖ Ｒ２３３２） 等参考毒株的病毒结构蛋白组成和部分抗原特性进行了初步的研究。测得国内分离毒株主要结构蛋白的分子量为１４５ Ｋ Ｄ，１９２ Ｋ Ｄ 和２６３ Ｋ Ｄ， 并均能被 Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ Ｖ 的高免血清识别， 这与国外的同类报道很相似。
- 蔡雪晖刘文兴郭宝清李成谷守林柴文君徐哮
- 关键词：PRRS生殖呼吸综合征病毒纯化
- 猪繁殖与呼吸综合征防制技术及应用
- 2010年
- 被俗称为“蓝耳病”的猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）至今仍然是危害世界养猪业的主要疫病之一。2006年在我国流行高致病性“蓝耳病”，给我国养猪业造成重大损失。因此，开展PRRS防制技术的研究具有重要意义。
- 蔡雪辉童光志郭宝清刘永刚田志军王洪峰柴文君周艳君仇华吉刘文兴
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征防制技术高致病性PRRS蓝耳病
- 马耳他布氏杆菌毒力相关基因
- 本发明涉及一种来源于羊种布鲁氏菌弱毒疫苗株M5-90的延伸因子tuf基因，及其在区分马耳他布氏杆菌疫苗株M5-90和它的亲本株M28中的应用。本发明还提供一种将马耳他布氏杆菌强毒株M28毒力致弱的方法，该方法包括将马耳他...
- 步志高乔祖健胡森刘文兴
- 文献传递
- 猪生殖-呼吸道综合征病毒(PRRSV)分离鉴定及其与欧、美PRRSV抗原的比较被引量：48
- 1998年
- 在我国吉林省某地猪生殖－呼吸道综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）抗体阳性猪群的４头２日龄弱仔猪实质脏器中分离到２株ＰＲＲＳＶ。间接荧光抗体试验（ＩＦＡ）结果表明，ＰＲＲＳＶ（ＬＶ．ＶＲ－２３３２）抗血清与２个分离株呈阳性反应；分离到病毒的弱仔猪血清与参考株（ＬＶ．ＶＲ－２３３２）也呈阳性反应；而分离株与ＨＣＶ、ＰｒＶ、ＰＰＶ、ＴＧＥＶ、ＰＥＤＶ和ＨＥＶ无交叉抗原。以上试验证明，我们已成功地分离到２株地方性ＰＲＲＳＶ。进一步用六种ＰＲＲＳＶ单抗（Ａ～Ｆ）进行ＩＦＡ试验，结果２个分离株与ＶＲ－２３３２的荧光反应谱相同。说明它们之间在抗原结构上具有同源性。
- 刘文兴蔡雪晖郭宝清
- 关键词：病毒PRRSV综合征IFA
- 从疑似PRRS流产胎儿分离PRRSV的研究被引量：1026
- 1996年
- 采用猪肺巨噬细胞和Marc-145细胞培养对国内暴发流行PRRS的某地猪场进行了病毒分离,从流产胎儿分离出特征性致细胞病变因子。用PRRSV SDOW-17单克隆抗体进行间接免疫荧光染色,证明从4头流产胎儿分离出4株PRRSV(CH-la,CH-lb,CH-lc,CH-ld)。这4株毒均可在猪肺巨噬细胞和Marc-145细胞上生长,并产生特征性CPE变化。用PRRSV美国分离毒株VR-2332和NVSL抗血清分别对4株CH-1、VR-2332和NVSL毒株感染细胞进行间接免疫荧光试验,结果表明4个CH-l毒株近似于美洲型PRRSV。间接免疫荧光试验证明,4个CH-l分离株与HCV、PrV、PPV、TGEV、PEDV和HEV无交叉抗原。本文首次报道在国内暴发生殖和呼吸道综合征猪群分离到PRRS病毒。
- 郭宝清陈章水刘文兴崔益洙
- 关键词：猪病生殖呼吸综合征PRRS
- 布鲁氏菌M28强毒株O抗原聚合酶基因缺失株的构建及其毒力评价被引量：3
- 2013年
- 为构建布鲁氏菌O抗原聚合酶缺失突变株,本研究以布鲁氏菌M28株为亲本株,利用同源重组方法,以编码O抗原聚合酶靶基因M28_B0107基因ORF外侧序列作为同源臂构建重组质粒pSP-B0107-K,将其电转化至M28感受态细胞中,以卡那霉素抗性基因(Kanr)作为标记,筛选缺失突变株(M28-ΔB0107)。M28-ΔB0107经过20余代传代培养,Kanr表达稳定。将M28-ΔB0107与M28以106cfu剂量腹腔接种小鼠,进行体内致病性试验。结果显示,M28-ΔB0107感染组小鼠脾脏荷菌量显著低于亲本M28株感染组,感染6周时,前者低于后者近10倍(p<0.05);而且M28-ΔB0107感染组脾脏重量也显著低于M28强毒株组(p<0.05);小鼠腹腔巨噬细胞系(RAW264.7)感染能力试验结果表明,突变株与亲本株无明显差异(p>0.05)。
- 赵云胡森乔祖建刘文兴覃晓琳步志高
- 关键词：布鲁氏菌
- 禽类呼肠孤病毒的分子生物学被引量：4
- 2004年
- 1病毒特性
禽类呼肠孤病毒(ARV)为呼肠孤病毒科正呼肠孤病毒属的成员,与哺乳类呼肠孤病毒相比较,一方面具有共同的理化特性和形态特征:病毒粒子呈二十面体、无囊膜、直径约为60～80 nm.病毒基因组由10个基因节段组成的dsRNA,其核酸由双层蛋白质衣壳所包裹;另一方面自身还具有独特的生物学特性:(1)无血凝活性,能诱导细胞融合和多数毒株对自然宿主具有致病性.(2)血清学方法证实禽类呼肠孤病毒各毒株之间具有共同的群特异性抗原(与哺乳类RoeV无交叉抗原),但由于存在大量的交叉反应,有些群不能作为独立的血清型,故禽类呼肠孤病毒只能以抗原亚型存在.(3)通过对禽类呼肠孤病毒各代表株进行SDS-PAGE核酸电泳分析,禽类呼肠孤病毒的核酸电泳图谱明显有别于哺乳类呼肠孤病毒株,即使在禽类呼肠孤病毒株之间也存在明显的多态性,但目前尚未发现这种差异与血清型及致病性相关.
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- 刘文兴王劭吴宝成
- 关键词：呼肠孤病毒哺乳类衣壳ARV呼吸道肠道孤儿病毒禽类
- 禽类呼肠孤病毒(Avian reoviruses)感染被引量：2
- 2004年
- 1病原学
1.1病毒特征禽类呼肠孤病毒为无囊膜,呈球形,双层衣壳和二十面对称的dsRNA病毒.粒子直径约60～80 nm,外层衣壳上有92颗中空的颗粒.在CsCl梯度离心中,感染病毒子的密度为1.29～1.30g/ml,无感染性空衣壳为1.29～1.30g/ml,病毒芯髓为1.44 g/ml.纯化病毒只含有RNA和蛋白质,平均含量分别为18.7%和81.3%.病毒在胞浆内复制,有时呈晶格排列.对热、pH 3和DNA代谢抑制物有抵抗力.MgCl2能增强病毒对热的稳定性,但当浓度太大时反而促其灭活.70%乙醇和0.5%有机碘可灭活病毒.一般无血凝活性.
……
- 吴异健刘文兴吴宝成
- 关键词：呼肠孤病毒呼吸道肠道孤儿病毒RNA病毒禽类病毒毒力
- 检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体ELISA方法的建立被引量：36
- 2000年
- 本试验通过差速离心法和非线性蔗糖密度梯度离心法纯化猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV)。经三氯_三氟乙烷处理后 ,作为ELISA试验的标准抗原 ,并建立了检测PRRSV抗体ELISA方法。该方法与IFA、IPMA和国外同类商品化试剂盒进行了对比试验 ,表明该方法具有敏感性高、特异性好的特点 ,是一种快速准确检测PRRSV抗体的方法。间接ELISA方法在敏感性上要优于IFA和IPMA。
- 蔡雪晖郭宝清柴文君刘文兴翁长江刘光清
- 关键词：间接ELISAPRRSV抗体检测
- 番鸭呼肠孤病毒的分离和鉴定
- 吴宝成姚金水陈化兰陈枝华陈家祥吴异健刘文兴邓国华王劭王全溪孙军杰
- 番鸭呼肠孤病毒病（俗称番鸭肝白点病，花肝病）在我国是一种高死亡率的新发疫病，在国内呈暴发流行，临床发病率20%～90%，应激或混合感染时死亡率高达90%以上，耐过番鸭生长发育迟缓，2000年仅福建省莆田县因该病死亡番鸭即...
- 关键词：
- 关键词：番鸭呼肠孤病毒
