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微管在小鼠孤雌激活、体外受精和核移植早期胚胎发育过程中的动态变化: 目的：研究小鼠孤雌活化、体外受精(IVF)与核移植早期胚胎发育过程中，微管蛋白β-tubulin在减数分裂期间的动态变化。方法：本实验首先研究老化对卵母细胞孤雌激活发育率以及老化对减数分裂期间微管动态变化的影...; 冯秀清; 关键词：孤雌活化体外受精核移植微管; 文献传递

体外受精和孤雌活化过程中小鼠胚胎细胞骨架的动态变化: 目的：本实验以 ICR 小鼠为研究对象,研究体外受精(IVF)和孤雌活化早期胚胎发育过程中,微管蛋白在第一次卵裂时的动态变化和作用。方法：本实验首先比较了体外受精胚胎、氯化锶激活的孤雌胚胎和体内受精的原核期胚胎在体外发育...; 冯秀清陈雅隽钟淑琦闫晓飞董建将雷蕾; 文献传递

蛋白激酶C在卵母细胞成熟、受精和早期胚胎发育过程中的作用被引量：4: 2008年; 小鼠胚胎发育过程中,蛋白激酶C(PKC)家族在调节卵的活化、完成减数分裂和开始有丝分裂、胚胎的致密,以及囊胚形成过程中都有作用,但其多个亚型的功能还知之甚少。研究表明,已知的十种PKC亚型以及PKC锚定蛋白——活化的磷脂酶C受体(RACK)在小鼠胚胎2-细胞期至囊胚期都有表达。本文归纳了近年来对PKC亚型各自不同的动态分布模式和表达水平的研究,这些研究表明它们在早期胚胎发育的各个时期都至关重要,尤其在胚胎4-细胞期的早期,个别亚型在核内的浓度是瞬间升高的,提示我们这些PKC亚型也许控制着早期小鼠胚胎核的组建以及机能调节。本文对核移植胚胎中PKC的可能作用也进行了分析。; 陈雅隽钟淑琦冯秀清雷蕾; 关键词：蛋白激酶C 卵母细胞成熟受精胚胎发育小鼠

细胞骨架在卵母细胞成熟、受精及核移植胚胎的作用被引量：4: 2006年; 细胞骨架系统,不仅是活细胞的支撑结构,决定细胞的形状,赋予其强度,而且是对各细胞器乃至某些大分子进行空间的组织安排,并且参与细胞外信号向核的转导及核对整个细胞活动的调节。哺乳动物卵母细胞和早期胚胎细胞骨架具有其独特的分布和功能,使卵母细胞和胚胎呈现出精确的时空性变化特点。确保受精及胚胎发育按时有序地进行。本文综述了细胞骨架在卵母细胞成熟、受精、早期胚胎发育和核移植发育过程中的分布和作用。; 冯秀清陈雅隽钟淑琦雷蕾; 关键词：卵母细胞成熟早期胚胎发育细胞骨架核移植受精细胞外信号

激光共聚焦显微镜观察小鼠早期胚胎中蛋白激酶Cα的表达被引量：1: 2007年; 目的优化早期胚胎的免疫荧光染色方法并观察蛋白激酶C(PKCα)在小鼠着床前胚胎的表达和定位。方法用优化的免疫荧光化学法结合激光共聚焦显微术,观察小鼠早期胚胎2-细胞期到囊胚期PKCα的表达情况。结果小鼠早期胚胎自2-细胞期到囊胚期均有PKCα亚型的表达,且主要集中在早期胚胎卵裂球的核内。结论经优化后的免疫荧光染色可清晰地检测到胚胎内PKCα集中于细胞核内表达,且分裂间期的表达高于分裂期。; 陈雅隽冯秀清钟淑琦潘振伟雷蕾; 关键词：蛋白激酶C 胚胎发育免疫荧光

体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞的分化被引量：4: 2011年; 目的对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)进行分离培养与鉴定,并使其诱导分化为神经细胞。方法采用密度梯度离心和贴壁培养相结合的方法分离培养BMSCs,观察细胞形态变化及生长、增殖情况;对细胞进行表面标志物CD14、CD34、CD44、CD29免疫荧光染色及向骨、软骨和脂肪分化能力的鉴定;选用第3代细胞,经全反式维甲酸(retinoic acid,RA)和脑源性神经生长因子(brain-derived neurotrophy factor,BDNF)联合诱导后,免疫荧光染色检测神经前体细胞标记物Nestin及神经细胞标记物NSE的表达情况。结果体外培养的BMSCs呈成纤维细胞样,CD44和CD29的阳性率在90%以上,具有明显的向骨、软骨和脂肪分化的能力,经诱导后可分化为神经细胞。结论成功建立了体外分离扩增BMSCs的培养体系,所获得的细胞纯度高、生物学特征稳定,并可在体外诱导分化为神经细胞,从而为下一步细胞移植治疗脑缺血动物模型提供种子细胞。; 钟淑琦曹博申景岭郭筠秋张宝东冯秀清陈雅隽杨志文; 关键词：骨髓间充质干细胞神经细胞

PDGF-B基因转染骨髓间充质干细胞的实验研究被引量：4: 2005年; 目的:探讨血小板源性生长因子-B(PDGF-B)基因转染修饰大鼠骨髓间充质干细胞(bone m arrow m esenchym alstem cell,M SC)的可行性。方法:应用FAM标记重组真核表达载体系统(pcDNA3-PDGF-B),以脂质体法转染原代骨髓间充质干细胞,观察转染结果、表达情况及对靶细胞活力的影响。结果:经荧光显微镜下观察证实:成功地对骨髓间充质干细胞实现了基因转染,持续表达时间超过了8周,没有发现明显的细胞毒作用及对细胞活力的显著影响。结论:采用真核转染技术可以介导外源基因转染骨髓间充质干细胞,M SC是一种理想的基因载体细胞,可用于PDGF-B的基因治疗。; 赵力张雪松刘程伟雷蕾冯秀清陈雅隽; 关键词：血小板源性生长因子-B 骨髓间充质干细胞转染脂质体

蛋白激酶Cα在小鼠受精、孤雌及四倍体胚胎早期发育过程的分布和作用: 蛋白激酶 C(protein kinase C,PKC)作为哺乳动物信号转导途径的重要信号分子,对早期胚胎发育过程中核的组建、细胞分裂周期以及细胞偏极化的调节具有重要作用。本实验以昆明小白鼠为实验对象,将孤雌激活获得的孤...; 陈雅隽申景岭单智焱冯秀清阎晓飞董建将钟淑琦雷蕾; 文献传递

蛋白激酶Cα在小鼠孤雌及四倍体胚胎早期发育过程中的分布和作用被引量：2: 2008年; 为了观察蛋白激酶Cα(protein kinase Cα,PKCα)在昆明白小鼠受精卵、孤雌激活和四倍体胚胎早期发育阶段的亚细胞定位和致密化进程中的表达变化,本实验利用免疫荧光化学染色与激光共聚焦显微镜观察相结合的方法,对受精卵、孤雌激活和四倍体胚胎早期发育阶段PKCα的表达进行了定位观察,并利用Westernblot对三组胚胎致密化进程中PKCα的表达进行定量分析。结果显示,PKCα在上述三组胚胎发育的2-细胞期至囊胚期均有表达,虽然不同胚胎PKCα的分布在同一发育阶段存在差异,却表现出在各胚胎期主要分布于卵裂球核染色质内,以及在胚胎致密化开始,PKCα在卵裂球连接处发生重新分布的共同特点。此外,三组胚胎PKCα在致密化进程中的表达呈升高趋势,即致密化后的表达高于致密化前。结果表明,PKCα对胚胎致密化的调节具有重要作用,其在8-细胞/4-细胞期的重新分布是胚胎进入桑椹胚期的必然事件,是胚胎致密化的前提,同时伴随蛋白表达增多。此外,PKCα在囊胚期发生了植入前的第二次重新分布。PKCα在三组胚胎各发育阶段表达情况各不相同,它对小鼠胚胎发育的影响体现在整个早期发育阶段。PKCα在小鼠受精卵早期发育阶段的两次重新分布可能与在致密化开始时启动的细胞黏附事件存在某种必然联系。; 陈雅隽申景岭冯秀清单智焱阎晓飞董建将钟淑琦雷蕾; 关键词：蛋白激酶CΑ 孤雌胚胎四倍体胚胎致密化

体外受精和孤雌活化过程中小鼠胚胎细胞骨架的动态变化被引量：3: 2008年; 为研究微管在体外受精与孤雌活化过程中的动态变化，本实验比较了体外受精胚胎、SrCl2激活的孤雌胚胎和体内受精的原核期胚胎在体外发育的情况，采用免疫荧光化学与激光共聚焦显微术检测卵母细胞孤雌活化过程中及体外受精后微管及核的动态变化，以分析微管在减数分裂过程中的作用及其对早期发育的影响。结果显示，体内受精胚胎的发育率显著高于体外受精和孤雌激活胚胎体外发育率（P〈0．05），而体外受精与孤雌激活胚胎在各阶段发育率差异均不显著。在体外受精中，精子入卵，激活卵母细胞，减数分裂恢复，纺锤丝牵拉赤道板上致密排列的母源染色体向纺锤体两侧迁移：后期将染色体拉向两极；末期时，微管分布于两组已去凝集的母源染色体之间，卵母细胞排出第二极体（the second polarbody，Pb2），解聚的母源染色体形成雌原核。同时，在受精后5—8h精子染色质发生去浓缩与再浓缩，形成雄原核。在原核形成的同时，胞质星体在雌、雄原核的周围重组形成长的微管，负责雌、雄原核的迁移靠近。孤雌活化过程中，卵母细胞恢复减数分裂，姐妹染色单体分离，被拉向两极，经细胞松弛素B处理后，活化4—6h，卵周隙中未见Pb2，而在胞质中出现两个混合的单倍体原核，之间由微管相连接，负责两个单倍体原核的迁移靠近。与体外受精相比较，孤雌活化时卵母细胞更容易被激活，减数分裂期间微管的发育早且更完善。; 冯秀清林英巍陈雅隽钟淑琦闫晓飞董建将雷蕾; 关键词：体外受精孤雌活化激光共聚焦

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冯秀清

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