余盈娟
- 作品数：7 被引量：7H指数：2
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- 胰岛素对结肠平滑肌细胞增殖及其表达干细胞因子的影响被引量：2
- 2011年
- 目的:探讨胰岛素(Ins)对大鼠结肠平滑肌细胞(SMCs)增殖及其表达干细胞因子(SCF)的影响.方法:酶解法结合机械刮除法分离培养SD大鼠结肠SMCs,α-actin免疫荧光鉴定.将SMC随机分为Ins剂量组(0、2.5、5、20、40、80mg/L)与时间组(0、8、16、24h),观察Ins作用下SMCs的增殖及其合成SCF的情况.MTT法检测SMCs的增殖,Westernblot及RT-PCR法检测SCF的表达.结果:(1)5mg/L时Ins即有显著的促SMCs增殖效应(0.052±0.006vs0.018±0.006,P<0.05);(2)低、中剂量Ins(2.5、5、20mg/L)能促进结肠SMCs表达SCF(蛋白:0.735±0.035,0.754±0.057,0.741±0.051vs0.658±0.024;mRNA:0.688±0.077,0.690±0.080,0.698±0.074vs0.528±0.053,均P<0.05);高剂量Ins(40mg/L)使SCF的表达达到最高峰(蛋白:0.899±0.048vs0.658±0.024;mRNA:0.938±0.117vs0.528±0.053;均P<0.05);(3)SMC表达SCF在Ins作用16h后达到峰值(蛋白:0.899±0.011vs0.628±0.015;mRNA:1.038±0.053vs0.709±0.042;均P<0.05).结论:Ins能促进结肠SMCs增殖,并在一定范围内呈剂量与时间依赖性促进结肠SMCs表达SCF.
- 余盈娟袁玉丰林琳
- 关键词：胰岛素平滑肌细胞干细胞因子
- 酶消化法分离培养糖尿病大鼠结肠平滑肌细胞被引量：1
- 2011年
- 目的探讨糖尿病(DM)大鼠结肠平滑肌细胞(SMC)的培养方法。方法建立DM大鼠模型,分离结肠,用酶消化法体外培养正常及DM大鼠结肠SMC,α-肌动蛋白免疫荧光鉴定。结果造模后大鼠体重(165±16.8)g,较正常组(286±14.5)g明显减轻(P<0.01);血糖(25.4±3.4)mmol/L,明显高于正常组(4.3±0.8)mmol/L(P<0.01)。正常结肠SMC培养7 d左右即可融合成片、相互交叉成多层,进行传代;DM大鼠结肠SMC需12～14 d融合成片,进行传代;传代后正常结肠SMC需3～4 d即可进行下一次传代,而糖尿病结肠SMC则需5 d。α-肌动蛋白免疫组化染色鉴定均为SMC。结论 DM大鼠结肠SMC增殖速度比正常SMC慢,培养条件也较正常SMC更严格,形态学上与正常SMC相似。
- 袁玉丰余盈娟林琳
- 关键词：糖尿病酶消化结肠平滑肌细胞
- 胰岛素促进结肠平滑肌细胞合成干细胞因子的信号转导途径被引量：1
- 2011年
- 目的探讨胰岛素（Ins）促进结肠平滑肌细胞（SMC）表达干细胞因子（SCF）的细胞内信号传导途径。方法分离培养SD大鼠结肠SMC，采用a-actin免疫荧光鉴定。分3大组进行实验。①Ins浓度梯度组：SMC添加不同浓度Ins（0、2．5、5、20、40和80mg／L），培养16h。②Ins时间梯度组：SMC＋Ins（40mg／L），分别培养0、8、16和24h。③信号通路阻断组：SMC加LY-294002或PD-98059预处理后，再予以40mg／L的Ins诱导16h。四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测结肠SMC增殖情况，Western印迹和反转录PCR检测SCF的变化。结果①Ins在5mg／L浓度即能显著促进SMC增殖，其效应与20、40和80mg／L时差异无统计学意义（P值均d0．05）。②与未添加Ins组（即空白对照组）比较，低中剂量Ins（2．5、5和20mg／L）即有促进结肠SMC表达SCFmRNA和SCF蛋白的作用（P〈0．05），这种作用在Ins40mg／L时达到最大（P〈0．05），80mg／L时与40mg／L时差异无统计学意义（P〉0．05）。③与0h时相比，40mg／L的Ins作用于SMC8h后SCF表达增加（P〈0．05），16h后达峰值（P〈0．05），24h与16h差异无统计学意义（P〉0．05）。④与空白对照组和溶剂对照组相比，LY-294002、PD-98059处理16h，均能减少Ins诱导的SCF的表达（P值均〈0．05）。结论Ins能促进SMC增殖；在一定范围内呈剂量与时间依赖性诱导结肠SMC合成SCF，该效应可能与PI3K与MAPK两条信号通路有关。
- 余盈娟袁玉丰林琳
- 关键词：胰岛素结肠干细胞因子1-磷脂酰肌醇3-激酶
- 胰岛素样生长因子-1对糖尿病大鼠结肠平滑肌细胞表达干细胞因子的影响被引量：2
- 2011年
- 背景:糖尿病胃肠动力障碍与Cajal间质细胞(ICC)数量和超微结构异常有关。前期实验发现胰岛素样生长因子-1(IGF-1)可诱导正常大鼠胃肠平滑肌细胞(SMC)表达十细胞因子(SCF),从而有利于ICC的生存。目的:探讨IGF-1对糖尿病大鼠结肠SMD表达SCF的影响及其信号转导通路方法:以链脲霉素建立糖尿病大鼠模型分离、培养正常和糖尿病大鼠结肠SMD设不同浓度(0、50、100、150μg/L)、不同时间(0、8、16、24、48 h)IGF-1干预组和MEK抑制剂PD98059+IGF-1、PI3K抑制剂LY294002+IGF-1干预组.以RT-PCR和蛋白质印迹法检测SMC中的SCF表达。结果:糖尿病大鼠结肠SMC的生长速度较正常大鼠减慢。无血清培养条件下.正常和糖尿病结肠SMC中SCFmRNA和蛋白表达较低.IGF-1可诱导SCF表达增加,最大有效浓度为100μg/L,诱导高峰时间正常对照组为16 h,糖尿病组为24 h.经PD98059预处理的SMd.IGF-1诱导的SCF表达部分受抑.LY294002预处理对IGF-1的作用无明显影响结论:0～100μg/LIGF-1在24 h内能以剂量和时间依赖负性方式诱导糖尿病大鼠结肠SMC表达SCF,但效应弱于其对正常大鼠结肠SMC的作用.
- 袁玉丰余盈娟林琳
- 关键词：结肠干细胞因子
- 胰岛素与葡萄糖对大鼠结肠平滑肌细胞增殖及合成干细胞因子的影响
- Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal, ICC)、平滑肌细胞(smooth muscle cell, SMC)和肠神经系统(enteric nervous system, ENS)组...
- 余盈娟
- 关键词：胰岛素干细胞因子葡萄糖PI3KMAPK
- 文献传递
- ERK1/2 siRNA干扰质粒对IGF-1诱导结肠平滑肌细胞产生干细胞因子的影响被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨IGF-1诱导的大鼠结肠平滑肌细胞(SMC)产生干细胞因子(SCF)的信号途径.方法:以不同时间(0,5,15,30,45,60min)、不同浓度(0,50,100,150μg/L)的IGF-1诱导结肠SMC;以ERK1/2siRNA干扰质粒转染大鼠结肠SMC,RT-PCR及Westernblot检测IGF-1诱导下结肠SMC产生ERK1/2及SCF的变化.结果:在15min时IGF-1诱导结肠SMC表达磷酸化ERK1/2最强(0.417±0.036vs0.101±0.015,P<0.05).在100μg/L作用15min时磷酸化ERK1/2和SCF表达最强(0.790±0.051vs0.336±0.013;0.765±0.061vs0.289±0.021,均P<0.05).在IGF-1诱导下,转染入ERK1/2siRNA的结肠SMC产生的p-ERK1/2、t-ERK1/2及SCF较对照组明显降低(0.284±0.021vs0.732±0.005;0.256±0.015vs0.712±0.023;0.219±0.020vs0.673±0.013;0.621±0.027vs1.725±0.012;0.821±0.019vs1.751±0.043;0.275±0.061vs0.531±0.047;均P<0.05).结论:IGF-1可以使结肠SMC表达磷酸化ERK1/2和SCF增加.ERK1/2siRNA可使ERK1/2和结肠SMC产生的SCF明显降低,从而证实IGF-1促进大鼠结肠SMC产生SCF是通过ERKMAPK通路.
- 袁玉丰余盈娟林琳
- 关键词：ERK1/2结肠平滑肌细胞干细胞因子
- 生物学制剂和干细胞移植治疗炎症性肠病的进展被引量：2
- 2011年
- 炎症性肠病(IBD)是一种病因复杂的肠道慢性炎症性疾病。治疗IBD的传统药物虽能控制症状,但多数患者反复发作迁延不愈。新近研究的生物学制剂、干细胞移植等疗法已逐渐用于临床,较传统药物凸显出一定的优势,成为近年来IBD治疗学的研究热点,该文就此两种新疗法进行概述。
- 余盈娟袁玉丰林琳
- 关键词：炎症性肠病干细胞移植
