余晓杰
- 作品数:6 被引量:10H指数:3
- 供职机构:南京医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系更多>>
- 发文基金:江苏省自然科学基金国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- HCV-F蛋白的原核表达以及对Th1/Th2型细胞因子的影响被引量:5
- 2013年
- 目的探讨丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)1b型F蛋白对Th1/Th2型细胞因子的影响。方法收集慢性HCV患者(chronic hepatitis patient,CHP)和HCV肝癌患者(hepatocellular carcinoma patient,HCCP)的血样,检测F抗体(F antibody,F-Ab)的阳性率并且分成4组,F-Ab(+)CHP、F-Ab(-)CHP、F-Ab(+)HCCP、F-Ab(-)HCCP;分离患者外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),用F蛋白刺激,72 h后用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测细胞上清干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)和白介素5(in-terluekin-5,IL-5)水平。结果 F-Ab(-)CHP组IFN-γ高于F-Ab(+)CHP组(P=0.020);F-Ab(-)HCCP组IFN-γ高于F-Ab(+)HCCP组(P=0.019),F-Ab(+)HCCP组IL-5的水平高于F-Ab(-)HCCP组(P=0.032);F-Ab(+)CHP组IL-5的水平高于F-Ab(-)CHP组(P=0.041)。结论在体外培养的PBMC中,F蛋白有上调IL-5水平和下调IFN-γ水平的作用,提示可能与肝炎慢性化和肝癌的发生机制有关。
- 余晓杰邓小昭岳明徐孝东刘运熙周镇先丁伟良张锦海韦娟孔晶许可张云储春丽
- 关键词:肝炎病毒
- HCV-F蛋白的原核表达以及对Th1/Th2型细胞因子的影响
- 本文通过检测Th1类细胞因子IFN-γ和Th2类细胞因子IL-5,旨在探讨HCV1b型转框蛋白—F蛋白(Ahemative Reading Frame Protein,ARFP/Core+1/F Protein)对Th1...
- 余晓杰孔晶张云储春丽岳明邓小昭徐孝东刘运熙周镇先丁伟良张锦海韦娟
- 关键词:丙型肝炎病毒细胞因子蛋白表达
- 文献传递
- 丙型肝炎病毒感染者F基因区变异临床意义的初步研究被引量:4
- 2014年
- 目的探讨丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)F基因区变异的临床意义。方法以78例未治疗慢性丙型肝炎患者为研究对象,采用单链构象多态性分析对HCV-F基因区进行准种分析,实时荧光定量聚合酶链反应对HCV RNA进行定量检测,利用酶联免疫吸附试验分别对患者血清中的抗F蛋白抗体、Th1(IL-12,IFN-γ)和Th2(IL-5,IL-10)细胞因子水平进行检测分析。结果 78例慢性丙型肝炎患者中有46例为抗HCV-F抗体阳性,阳性率为59%。HCV1b亚型患者F基因区准种数目高于非HCV1b亚型(P=0.002)。F基因区SSCP条带数与HCV RNA载量及ALT/AST水平呈正相关(均有P<0.05)。另外,与F基因准种数量≤2的患者相比,F基因准种数量>2的患者血清中,Th1细胞因子IL-12、IFN-γ水平降低(P=0.023,P=0.010),Th2细胞因子IL-5、IL-10水平显著升高(P=0.024,P=0.012)。结论 HCV-F基因区准种多样性与病毒复制、肝损伤和机体Th2优势应答有关,具有一定的临床意义。
- 徐孝东鲁卫东岳明邓小昭朱丹燕余晓杰周镇先丁伟良张锦海孔晶许可张云储春丽
- 关键词:流行病学
- 一种基因工程改造的NADH高亲和力木糖还原酶突变基因可促进酿酒酵母发酵木糖生成乙醇被引量:1
- 2011年
- 在导入表达毕赤酵母(Pichia stipitis)木糖还原酶(xylose reductase,XR)和木糖醇脱氢酶(xylitol dehydrogenase,XDH)基因的重组酿酒酵母中,木糖还原酶活性主要依赖辅酶NADPH,木糖醇脱氢酶活性依赖辅酶NAD+,两者的辅助因子不同导致细胞内电子氧化还原的不平衡,是造成木糖醇积累,影响木糖代谢和乙醇产量的主要原因之一.将经过基因工程改造获得的NADH高亲和力的木糖还原酶突变基因m1,与毕赤酵母木糖醇脱氢酶(PsXDH)基因xyl2共转染酿酒酵母AH109,以转染毕赤酵母木糖还原酶(PsXR)基因xyl1和xyl2重组质粒的酵母细胞为对照菌株,在SC/-Leu/-Trp营养缺陷型培养基中进行筛选,获得的阳性转化子分别命名为AH-M-XDH和AH-XR-XDH.重组酵母在限制氧通气条件下对木糖和葡萄糖进行共发酵摇瓶培养,HPLC检测发酵底物的消耗和代谢产物的产出情况.结果显示,与对照菌株AH-XR-XDH相比,AH-M-XDH的木糖利用率明显提高,乙醇得率增加了16%,木糖醇产生下降了41.4%.结果证实,通过基因工程改造的木糖代谢关键酶,可用于酿酒酵母发酵木糖生产乙醇,其能通过改善酿酒酵母细胞内氧化还原失衡的问题,提高木糖利用率和乙醇产率.
- 李春雷邓小昭董莉莉韦娟余晓杰
- 关键词:乙醇木糖还原酶木糖醇脱氢酶酿酒酵母
- HCV-F蛋白的原核表达以及对Th1/Th2型细胞因子的影响
- 为了研究丙型肝炎病毒(hepatitis C virus, HCV)F蛋白(alternate readingframeshifting protein, ARFP)在HCV慢性感染以及HCV相关肝癌发生过程中的作用及意...
- 余晓杰
- 关键词:丙肝病毒F蛋白慢性化白介素5干扰素Γ
- 文献传递
- 丙型肝炎病毒F蛋白上调肝癌细胞HepG_2中Bcl-2和Bax表达被引量:4
- 2012年
- 目的研究丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)基因1b型F蛋白对HepG2细胞中Bcl-2、Bax表达的影响。方法应用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术扩增HCV 1b型的F基因,构建pEGFP-C3-F、pEGFP-C3-C真核表达载体,分别将pEGFP-C3-F、pEGFP-C3-C、pEGFP-C3(阴性对照)瞬时转染HepG2细胞,48h后抽细胞总蛋白质,蛋白质印迹法(Western blot)检测Bcl-2、Bax表达的变化。结果转染F基因的HepG2中Bcl-2表达水平略高于未转染的细胞,但Bax表达水平显著高于未转染的细胞。结论 HCV F蛋白具有调节原癌基因Bcl-2和抑癌基因Bax的特性,可能与肝癌的形成有关。
- 韦娟孔晶邓小昭储春丽余晓杰岳明张云徐孝东
- 关键词:肝炎病毒属F蛋白BCL-2BAX