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人角质细胞生长因子2的基因克隆、表达、纯化及活性检测: 目的角质细胞生长因子2(keratinocyte growth factor 2，KGF2)是成纤维细胞生长因子家族中的23个成员之一，又称为成纤维生长因子10(fibroblast growth facto...; 余德荣; 关键词：酪氨酸激酶受体 PBV220 可溶性表达上皮损伤; 文献传递

人角质细胞生长因子2基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：3: 2007年; 目的:构建人角质细胞生长因子2(hKGF2)基因的高效原核表达载体pET-30a(+)-hKGF2,并在大肠杆菌BL21(DE3)中获得表达。方法:从培养的人胚胎肺成纤维细胞中提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增出去除了信号肽部分的hKGF2基因,克隆到pMD18-T载体,经DNA序列分析后与pET-30a(+)表达载体连接,在大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达6×His-hKGF2,用SDS-PAGE及Western印迹鉴定表达蛋白。结果:构建了表达载体pET-30a(+)-hKGF2,经IPTG诱导后,表达的重组蛋白理论相对分子质量约为23000,约占菌体总蛋白的20%。结论:6×His-hKGF2蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中为可溶性高效表达,为获得高纯度、高活性的产物,以及进一步的大规模生产和应用研究奠定了基础。; 余德荣游力王郡甫许晓群高春义; 关键词：克隆可溶性表达

重组hKGF2原核表达载体的构建及其蛋白质的纯化被引量：3: 2007年; 角质细胞生长因子2(keratinocyte growth factor2,KGF2)是新近发现的成纤维细胞生长因子家族中的一员,又称FGF10,是上皮细胞特异性的促有丝分裂剂,具有广泛的应用前景。为构建其高效原核表达体系,用RT-PCR法从培养的人胚胎肺成纤维细胞中提取成熟hKGF2cDNA,进行T-A克隆;经测序后,构建pET-30a(+)-hKGF2重组表达载体,将其转入大肠杆菌BL21(DE3)菌株。IPTG诱导表达后,重组蛋白经SDS-PAGE及Western blot鉴定为高效可溶性表达。镍亲和层析(Ni+-NTA)一步法纯化后获得纯度达95%以上的目的蛋白,生物活性研究表明,重组hKGF2能有效促进人胚胎肾上皮细胞的增殖。; 余德荣游力王郡甫许晓群赵跃然高春义; 关键词：克隆原核表达

角质细胞生长因子对放化疗引起的口腔黏膜炎的防治作用被引量：1: 2006年; 角质细胞生长因子(KGF)属于成纤维细胞生长因子(FGF)家族,又称FGF-7,是由间充质来源的细胞所产生,可与FGF受体(FGFR)的亚型FGFR2-b特异性结合,通过旁分泌方式作用于上皮细胞,是上皮细胞强有力的有丝分裂原。KGF可通过间质-上皮相互作用的方式促进不同来源组织上皮细胞的增殖、移行、分化。研究显示,KGF对放化疗引起的口腔黏膜溃疡及炎症有防治作用,因而在改善肿瘤放化疗并发症、提高肿瘤治疗效果方面有重要意义。; 余德荣游力; 关键词：角质细胞生长因子口腔黏膜炎

重组人白细胞介素21表达条件的探讨被引量：1: 2007年; 目的探讨重组人白细胞介素21工程菌诱导表达的最佳条件。方法用摇瓶发酵的方法探索不同诱导条件(诱导温度、诱导时间、接种量I、PTG浓度等)对目的蛋白质表达的影响。结果该工程菌表达目的蛋白质的最佳温度是42℃;高密度接种更有利于目的蛋白质的表达。结论建立了BL21/pET-30a(+)-IL21工程菌最佳诱导表达条件,为重组人白细胞介素21的制备奠定了基础。; 郑瑞许晓群张彩刘金生张建华余德荣牛家峰王义平王郡甫; 关键词：基因工程菌发酵

hKGF2在不同原核载体中的构建、表达和纯化分析被引量：2: 2008年; 目的比较人角质细胞生长因子2(hKGF2)在不同原核表达载体和宿主菌中的表达及相应蛋白纯化及生物学活性。方法RT-PCR法从培养的人胚胎肺成纤维细胞提取成熟hKGF2 cDNA,克隆测序后,分别与pBV220和pET-30a(+)表达载体连接,转化不同宿主菌进行诱导表达,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及Western blot进行蛋白鉴定。针对不同原核表达载体分别用阳离子交换层析和镍亲和层析(Ni-NTA)纯化目的蛋白,电泳分析蛋白纯化结果,并分别检测其生物学活性。结果目的基因片段克隆入pBV220载体后在E.coliJM109中表达量最高,约占菌体总蛋白的15%;克隆入pET-30a(+)载体在E.coliBL21(DE3)中表达量约占菌体总蛋白的25%;均为可溶性表达,不同方法纯化后蛋白纯度达95%以上,均能有效促进人胚胎肾上皮细胞增殖。结论hKGF2基因在不同的宿主菌中蛋白表达不同,以融合蛋白表达纯化效果更好。; 游力余德荣许晓群王郡甫高春义赵跃然; 关键词：基因表达蛋白纯化

FGF-10与肺的形态发生和损伤修复研究进展被引量：2: 2006年; 间充质-上皮之间的交互作用贯穿着胚胎器官发育与成熟的整个过程,成纤维细胞生长因子(FGF)在此过程中起着重要的调控作用,尤其是FGF-10,众多研究表明,它是整个胚胎器官发育过程中必不可少的一员。近年来,FGF-10在胚胎支气管-肺的形态发生和分支作用以及在支气管-肺上皮损伤修复过程中的作用尤其引人注目,本文针对其在这方面的调控作用作一综述。; 余德荣游力; 关键词：成纤维细胞生长因子

BRMS1 mRNA和CD44V6 mRNA在子宫内膜癌组织中的表达及意义被引量：16: 2007年; 目的:探讨乳腺癌转移抑制基因(breast cancer metastasis suppressor 1,BRMS1)mRNA和CD44V6mRNA的异常表达与子宫内膜癌侵袭及转移的关系。方法:采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法,检测42例子宫内膜癌、12例子宫内膜不典型增生和15例正常子宫内膜组织中BRMS1mRNA和CD44V6mRNA的表达情况,分析其与各种临床参数的关系。结果:1)子宫内膜癌患者的BRMS1基因表达率为37·5%,明显低于不典型增生的75·0%和正常内膜的86·7%;与临床分期(χ2=4·978)、肌层浸润深度(χ2=5·999)及淋巴结转移(χ2=4·200)均密切相关,P值均<0·05;2)子宫内膜癌患者的CD44V6基因表达率为69·0%,显著高于不典型增生的16·7%和正常内膜的0,P<0·01;与临床分期(χ2=5·802)及淋巴结转移(χ2=5·570)均密切相关,P值均<0·05;3)BRMS1与CD44V6mRNA的阳性表达率之间无相关关系,肯德尔相关系数为0·069,P>0·05。结论:BRMS1和CD44V6mRNA的异常表达是子宫内膜癌发生发展、浸润转移的重要分子学改变,同时检测两者可作为临床预测和评估其侵袭及转移的重要参考指标。; 余德荣游力许晓群李会庆王郡甫高春义; 关键词：肿瘤蛋白质类

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余德荣