何金娜
- 作品数：8 被引量：9H指数：2
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- 小鼠胚胎DNA氧化损伤模型的建立被引量：2
- 2015年
- 为了研究胚胎DNA损伤修复机制,试验以H2O2为DNA损伤诱导剂,建立小鼠胚胎DNA氧化损伤模型,采用不同浓度H2O2培养小鼠受精卵,观察其对小鼠胚胎发育能力的影响;再通过免疫荧光方法检测γH2AX和ρATM蛋白的表达状况,以判断H2O2处理所导致的胚胎DNA损伤情况及较适宜的诱导条件。结果表明：1.5~2.4μmol/L H2O2处理对小鼠胚胎发育能力具有影响,与KOSM（-）对照组相比,H2O2处理组小鼠胚胎的分裂率、囊胚率呈下降趋势,其中1.8~2.4μmol/L H2O2处理组的胚胎分裂率、囊胚率呈显著下降趋势（P〈0.05）。免疫荧光法检测发现KOSM（-）对照组中,2-细胞期胚胎的γH2AX焦点数多于1-细胞期胚胎,ρATM在两个时期的胚胎中未检测到。γH2AX和ρATM在1.5,1.8μmol/L H2O2处理组的1-细胞期胚胎中均未检测到;2-细胞期胚胎表达γH2AX,未检测到ρATM。2.1,2.4μmol/L H2O2处理组的1-细胞和2-细胞期胚胎均有γH2AX和ρATM表达,其中2.4μmol/L H2O2处理组两个时期胚胎的γH2AX焦点数多于2.1μmol/L H2O2处理组。说明1.5~2.4μmol/L H2O2处理会影响小鼠胚胎体外发育能力,2.1,2.4μmol/L H2O2处理可诱导小鼠胚胎发生DNA双链断裂现象。
- 何金娜李胜沈开元王萍石德顺李湘萍
- 关键词：小鼠胚胎DNA氧化损伤H2O2
- 水牛AQP8基因克隆及其表达分析
- 水通道蛋白广泛参与动物生殖细胞发生与发育等许多重要过程.为了进一步研究水通道蛋白在水牛卵泡发育过程中的功能作用,本研究对水牛AQP8基因进行了克隆,构建了其真核表达载体,对AQP8基因在水牛睾丸及卵巢组织中的表达进行了研...
- 李胜屈春凤李润何金娜石德顺李湘萍
- 关键词：水牛水通道蛋白基因克隆真核表达
- 文献传递
- RAD18基因在小鼠早期胚胎DNA损伤修复中作用的初步研究
- RAD18是一种与单链DNA结合的RING结构蛋白,具有泛素E3连接酶作用。RAD18基因在DNA损伤修复中具有多方面的功能[1],同时在蛋白降解[2]、基因转录调控中也起作用[3]。目前有关RAD18基因的DNA损伤修...
- 何金娜
- 关键词：动物胚胎DNA损伤
- 文献传递
- 水通道蛋白在哺乳动物卵泡发育过程中作用的研究进展
- 2015年
- 水通道蛋白(AQPs)是一类分布广泛的能促进水转运的小分子跨膜蛋白家族。作为细胞膜表面通道分子,水通道蛋白不仅对小分子类物质及水等有运输作用,还广泛参与哺乳动物生殖细胞发生及生殖调控等重要过程。研究发现,在哺乳动物卵泡发育过程中,卵泡形成和成熟、卵泡液的转运、窦腔形成、卵泡闭锁等均与水通道蛋白基因的表达及调节密切相关。文章对水通道蛋白基因及其在哺乳动物卵泡发育中的作用进行综述,并就其在卵泡发育及闭锁机制方面提出设想。
- 李胜屈春凤何金娜石德顺李湘萍
- 关键词：卵泡发育颗粒细胞雌激素
- 水牛水通道蛋白8基因克隆及表达分析被引量：4
- 2014年
- 本研究对水牛水通道蛋白8(aquaporin 8,AQP8)基因进行了克隆,并构建了真核表达载体,同时对AQP8基因在水牛卵巢组织中的表达进行了分析。结果发现,水牛AQP8基因编码区长度为732bp,与黄牛及小鼠AQP8基因的氨基酸序列同源性为100%。AQP8蛋白在不同发育阶段水牛卵泡中均有表达,在次级卵泡中的表达显著高于原始卵泡和初级卵泡(P<0.05),且集中表达于卵泡颗粒细胞。构建的pEGFP-N1-AQP8真核蛋白融合表达载体经脂质体法转染HEK293T细胞后,可观察到清晰的EGFP绿色荧光蛋白表达。该试验结果为深入研究AQP8基因在水牛卵泡发育及颗粒细胞凋亡中的功能奠定了基础。
- 李胜屈春凤李润何金娜石德顺李湘萍
- 关键词：水牛水通道蛋白8卵泡颗粒细胞
- 兔卵母细胞成熟过程中组蛋白H3Ser10磷酸化表达分析被引量：2
- 2013年
- 为研究卵母细胞成熟过程中组蛋白H3第10位丝氨酸(H3Ser10)磷酸化变化规律及其表达水平,本研究以体外成熟兔卵母细胞为材料,采用免疫荧光标记方法检测兔卵母细胞成熟各时期组蛋白H3Ser10磷酸化的动态分布,同时探讨不同浓度组蛋白磷酸化激酶抑制剂(ZM447439)处理卵母细胞对组蛋白H3Ser10磷酸化表达的影响。结果显示:(1)兔卵母细胞组蛋白H3Ser10磷酸化始于生发泡破裂期(GVBD),且表达水平最高;第1次减数分裂中期(MⅠ期)磷酸化水平降低,第1次减数分裂后期(AⅠ期)及第2次减数分裂中期(MⅡ期)磷酸化水平呈上升趋势,但均比GVBD期低。(2)低浓度ZM447439对兔卵母细胞核成熟进程影响不大,当其浓度增加到30μmol/L时,93.5%的卵母细胞停留在GVBD期。(3)ZM447439浓度为5μmol/L时,20.7%卵母细胞H3Ser10去磷酸化,其他卵母细胞H3Ser10磷酸化信号与未处理组相似;当ZM447439浓度增加到30μmol/L时,大多数卵母细胞中的H3Ser10磷酸化消失。以上结果表明:兔卵母细胞组蛋白H3Ser10磷酸化始于GVBD期,且一直持续到MⅡ期,GVBD期磷酸化水平最高。ZM447439可有效抑制兔卵母细胞减数分裂的恢复,且随其浓度的增加,组蛋白H3Ser10磷酸化水平降低;当浓度达30μmol/L时,卵母细胞组蛋白H3Ser10终止磷酸化。
- 田明明孙洪亮王萍何金娜李润李胜李湘萍石德顺
- 关键词：卵母细胞
- 水牛AQP8基因克隆及其在水牛卵巢中的表达分析
- 目的 水通道蛋白(Aquaporins,AQPs)是一类跨膜蛋白家族,在水跨细胞膜转运过程中起着重要作用.至今已发现与雄性和雌性生殖系统发育相关的AQPs有11种(Huang,He et al.2006),它们参与了哺乳...
- 李胜屈春凤李润何金娜石德顺李湘萍
- RAD18基因在小鼠胚胎中的表达分析被引量：1
- 2015年
- 为了研究RAD18基因在小鼠胚胎发育过程中的表达模式,试验以体外培养的FVB小鼠胚胎为材料,采用定量RT-PCR及免疫荧光技术分析RAD18基因在小鼠胚胎中的表达水平。qRT-PCR结果表明,RAD18基因在小鼠植入前各时期胚胎中均有表达,其中与1-细胞期胚胎相比,其在2-细胞、8-细胞期胚胎中表达水平较高(P<0.01),在桑葚期和囊胚期胚胎中表达量显著下降(P<0.01)。免疫荧光方法检测结果表明RAD18蛋白在在小鼠植入前各时期胚胎中均有表达。说明RAD18基因在小鼠植入前胚胎中均有表达,推测其与小鼠胚胎的早期发育密切相关。
- 何金娜李胜雷薇石德顺李湘萍
- 关键词：胚胎发育基因表达
