目的探讨细胞外基质(extracellular matrix,ECM)纤维粘连蛋白(fibronectin,FN)在哮喘气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cell,ASMC)免疫功能调控机制中的作用,同时建立一种优化培养ASMC的方法。方法利用组织贴块法和消化酶法原代培养大鼠ASMC,并用细胞形态学和免疫组化SABC染色方法鉴定;将正常和哮喘大鼠ASMC种植在涂覆有FN的和空白(无FN涂覆)的玻片上,免疫组化方法检测爬片中粘着斑蛋白的表达;ELISA方法检测各组培养上清中调节激活正常T细胞表达和分泌细胞因子(regulated on activated normal T expressed and secreted,RANTES)蛋白水平。结果①原代培养的细胞呈典型的"谷峰状"生长,胞质内特异性的平滑肌肌动蛋白阳性表达,符合平滑肌细胞的形态学特征和生物学特性。②FN作用的哮喘大鼠ASMC粘着斑蛋白的表达明显增加,但未经FN作用的哮喘大鼠ASMC及经(或未经)FN作用的正常大鼠ASMC粘着斑蛋白表达均呈阴性表现。③FN处理组细胞培养上清中的RANTES蛋白水平较未经FN处理组显著增加(P<0.05),哮喘组培养上清中的RANTES蛋白水平较正常组明显增加(P<0.05)。结论 FN可能通过上调哮喘大鼠ASMC粘着斑蛋白的表达、促进RANTES的分泌而参与ASMC的免疫功能调控机制。
