- 人载脂蛋白A5单抗制备及临床应用的研究
- 2010年
- 目的制备抗人载脂蛋白A5(ApoA5)单克隆抗体(McAb),建立ELISA双抗体夹心法,并进行初步的临床应用。方法利用合成的人ApoA5抗原免疫BALB/c小鼠,制备McAb,并对抗体的效价、特异性、亚类及位点进行了测定,建立了ELISA双抗体夹心法,测定了正常对照组(145例)和冠心病组(68例)血清中ApoA5的含量。结果获得了5个稳定分泌抗体的阳性杂交瘤细胞株,且均为IgG2a型。腹水效价达到1.6×105。冠心病组胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和ApoB水平明显高于对照组(P<0.05),而高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)、ApoA1和ApoA5水平明显低于对照组(P<0.05)。ApoA5与HDL-C、ApoA1水平呈正相关(r值分别为0.53和0.63,P<0.05),与TC、TG、LDL-C、ApoB呈负相关(r分别为-0.69、-0.63、和-0.59,P<0.05)。结论ApoA5参与脂质代谢,对于心血管疾病的预防和治疗具有一定的临床意义。
- 焦娟赵满仓魏文青刘晶张艳付瑶
- 关键词：载脂蛋白A类血脂冠心病
- 抗β-淀粉样蛋白单抗杂交瘤的建立及免疫学特性的分析
- 2009年
- 目的制备抗β1-42淀粉样蛋白(Aβ1-42)单克隆抗体,并对其免疫学特性进行了分析,为进一步探讨阿尔茨海默病(AD)的发病机制打下基础。方法用合成的Aβ1-42偶联血蓝蛋白(KLH)制成抗原,免疫BALB/c小鼠制备抗Aβ1-42单克隆抗体,并对抗体的免疫学特性进行分析。结果从24个阳性孔中筛选出6株特异性好效价高的细胞株,命名B1～6,其中B2、B3、B4、B6属于IgG2a亚型,而B1、B5属于IgG2b亚型。测得相对亲和力B
- 赵满仓魏文青张艳焦娟刘晶付瑶
- 关键词：阿尔茨海默病免疫学特性
- 某部男性官兵生殖健康调查与心理疏导的研究被引量：4
- 2009年
- 目的:了解某部官兵对生殖健康相关知识的知晓度,排除部分官兵因心理压力而造成的假性生殖系统疾病。方法:采用自行设计的问卷,对2 263名现役男性官兵进行生殖和心理健康知识的调查。对受调查官兵进行生殖健康专业知识的培训。对疑似有生殖系统疾病的官兵进行筛查。结果:进行生殖健康知识的宣教和心理健康疏导调试后有效率100%。疑似有生殖系统疾病的115人经过筛查证实确患有生殖系统疾42人(1.86%)。结论:通过健康教育及心理调适可使提高基层官兵对生殖健康相关知识的认知水平,排除其心理压力,对提高部队的战斗力有重要意义。
- 赵满仓魏文清张艳刘晶王海涛安萍付瑶郭岩杰张国辉
- 关键词：军事人员生殖健康服务
- 自制细胞冻存液对树突状细胞存活率及活性的影响被引量：7
- 2009年
- 目的:用自制的改良细胞冻存液冻存树突状细胞(dendritic cells,DCs),观察冻存复苏后DCs的细胞存活率及体外诱导CIK(cytokine induced killer cell)对肿瘤细胞的杀伤作用。方法:从外周血分离、培养获得DCs,分别用3种冻存液冻存:(1)含10%二甲基亚砜(DMSO)、20%牛血清的RPMI1640培养液;(2)日本ZENOAQ公司的Cellbanker细胞冻存液;(3)自制细胞冻存液(含DMSO、羟乙基淀粉及细胞稳定剂)。每组DCs分6管,于-80℃和-196℃各冻存3管,分别于冻存后第30、60和180d复苏,用锥虫蓝染色法测定细胞存活率,用MTT法检测冻存复苏后DCs活化的CIK对K562细胞的杀伤活性。结果:每组3种冻存液冻存的DCs随着冻存时间的延长,冻存复苏DCs的存活率和活性均有轻度下降,但经统计学分析3种冻存液的冻存效果无明显差别。结论:自制的改良细胞冻存液能够替代传统冻存液和进口冻存液用于DCs的冻存,有良好的推广前景。
- 赵满仓魏文青刘晶张艳付瑶安萍
- 关键词：树突状细胞存活率杀伤活性
- MTT肿瘤药物敏感试验的方法学研究被引量：21
- 2008年
- 目的:对MTT法肿瘤药物敏感试验的方法进行选择,旨在建立一种MTT肿瘤药敏试验的规范化操作流程。方法:MTT法测定K562细胞对抗癌药卡铂与紫杉醇的敏感性实验及其影响因素。结果:在每孔K562细胞数为5×103(浓度为5×104个/ml)、药物作用时间48h、MTT20μl作用6h、单波长570nm处测OD值时,药物对肿瘤细胞的抑制率较高,实验效果较好。结论:规范化的MTT肿瘤药敏试验可以为临床医师开展和实现化疗个体化提供较为可靠的实验依据。
- 魏文青赵满仓刘晶焦娟张艳付瑶
- 关键词：肿瘤化学治疗K562细胞株MTT法
- 应用MTT法进行体外抗肿瘤药敏试验影响因素研究被引量：15
- 2008年
- 目的:探讨应用MTT法进行体外抗肿瘤药敏试验的影响因素,旨在建立一种MTT法抗肿瘤药敏试验的规范化流程。方法:MTT法测定不同浓度人外周血单个核细胞(PBMC)对不同浓度的奥沙利铂与紫杉醇的敏感性,同时优化选择培养时间与MTT孵育时间。结果:在每孔PBMC为4.0×104(浓度为4.0×105/mL)、药物作用时间48 h、MTT 20μL作用6 h、单波长570 nm处测OD值时,药物对细胞的抑制率较高,试验效果较好。结论:规范化的MTT法体外抗肿瘤药敏试验为临床医生开展和实现个性化化疗提供了可靠的依据。
- 魏文青赵满仓刘晶焦娟张艳付瑶安平
- 关键词：药物筛选试验抗肿瘤体外MTT法
- 脂联素对人脐静脉内皮细胞保护作用的实验研究
- 2010年
- 目的体外培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC),加入低密度脂蛋白(LDL)建立细胞损伤模型,观察脂联素(APN)对模型细胞结构和功能的影响。方法观察对照组、LDL损伤组、APN预处理组和APN干预组内皮细胞(EC)的形态改变,测定细胞活性,测定细胞培养上清中一氧化氮(NO)、乳酸脱氢酶(LDH)和6-酮前列腺(6-keto-PGF1)的含量变化,测定细胞中一氧化氮合酶(NOS)的含量。结果与正常细胞对照组比较,LDL损伤组的细胞形态明显改变,细胞存活率明显降低,LDH释放明显增高,NO、NOS和6-keto-PGF1合成明显降低(P<0.01);而APN预处理组和干预组能明显降低LDH释放,促进NO、NOS和6-keto-PGF1合成(P<0.01)。结论 APN对EC有一定的保护作用,能拮抗LDL对EC的损伤。
- 魏文青刘晶张艳焦娟付瑶赵满仓
- 关键词：脂联素脐静脉血管内皮细胞乳酸脱氢酶6-酮前列腺素
- MTT法抗肿瘤药敏试验影响因素的探讨被引量：13
- 2009年
- 目的:对于采用MTT法进行抗肿瘤药物敏感试验过程中的多种影响因素进行分析,观察抗肿瘤药物包被板的稳定性。方法:分离人外周血单个核细胞(PBMC),用MTT法测定抗肿瘤药物敏感性,观察红细胞、血小板、3种DMSO及不同浓度MTT对实验结果的影响;监测肿瘤药物包被板的稳定性。结果:一定浓度范围的红细胞和血小板均可影响实验结果;进口和国产分析纯的DMSO与MTT的呈色反应是一致的,吸光度(A值)与MTT呈浓度依赖性;冷冻干燥的抗肿瘤药物包被板的稳定性优于未经冷冻干燥的药物包被板。结论:明确实验过程中多种影响因素,有助于规范MTT法体外抗肿瘤药敏试验。
- 赵满仓魏文青刘晶张艳焦娟付瑶安平
- 关键词：肿瘤化疗敏感影响因素MTT法
- 脂联素单链抗体基因的克隆及表达
- 2009年
- 目的克隆人脂联素单链抗体基因并进行表达。方法提取分泌抗脂联素单克隆抗体杂交瘤细胞株的总RNA,通过RT-PCR技术,扩增VH和VL,与质粒pUC19载体连接,形成克隆,并对其进行鉴定分析。结果抗体重、轻链可变区扩增拼接后的重、轻链各约为340bp、350bp,基因全长约710bp,将拼接产物插入pUC19质粒中转化大肠杆菌JM109,得到数个克隆,经酶切分析约含710bp片段,与拼接结果基本相同,经测定特异性较好,与其他杂蛋白及载脂蛋白没有交叉反应。结论抗人脂联素单链抗体基因的克隆和表达较为成功。
- 赵满仓张艳刘晶焦娟付瑶魏文青
- 关键词：脂联素单链抗体
- α-硫辛酸对β-淀粉样蛋白诱导的PC12细胞损伤的保护作用被引量：3
- 2009年
- 目的:应用Aβ1-42孵育PC12细胞株制作细胞损伤模型,探讨α-硫辛酸体外抗β-淀粉样蛋白(Aβ)损伤的作用。方法:用Aβ1-42和α-硫辛酸对PC12细胞进行处理,MTT法检测细胞活性,测定细胞培养上清液中LDH的活性检测细胞膜的损伤,测定细胞Caspase-3活性检测各组细胞的凋亡。结果:经Aβ1-42处理的PC12细胞,活性降低。用α-硫辛酸保护处理可提高细胞的存活率,降低LDH释放及Caspase-3活性,具有显著性差异(P<0.01)。结论:α-硫辛酸可拮抗Aβ1-42诱导的细胞损伤,对神经细胞具有一定的保护作用。
- 魏文青刘晶张艳付瑶焦娟赵满仓
- 关键词：Α-硫辛酸Β-淀粉样蛋白PC12细胞
