于伟英
- 作品数：4 被引量：5H指数：2
- 供职机构：上海医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 尿激酶型纤溶酶原激活剂及其受体在肺癌组织中的表达被引量：2
- 1999年
- 目的 检测尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)及其受体(uPAR)在肺癌组织中的表达,并比较两者在侵袭转移性和非侵袭转移性肺癌组织中表达的差异。方法 采用ABC法检测uPA和uPAR在39例肺癌组织中的表达,用McCarthy方法进行半定量分析。结果 uPA和uPAR主要在肺癌组织中表达,且uPA和uPAR在侵袭转移性肺癌组织中的表达显著高于非侵袭转移性肺癌组织(P<0.05)。
- 于伟英廖劲晖徐韶华张宇清朱运松
- 关键词：尿激酶型纤溶酶原激活剂肺肿瘤UPAR
- 重组尿激酶型纤溶酶原激活物受体在酵母系统中的表达及鉴定被引量：1
- 1998年
- 构建截断型可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体（ｕ－ＰＡＲ）的原核及酵母表达质粒并分别在大肠杆菌和Ｐｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓ酵母中高效表达．利用ＰＣＲ扩增截断型可溶性ｕ－ＰＡＲｃＤＮＡ片段，并分别连入酵母及原核表达载体中，构建成表达质粒．后者经诱导表达的蛋白被用于免疫家兔，获得抗ｕ－ＰＡＲ的抗血清，用于对酵母表达产物的鉴定．前者在甲醇的诱导下表达，产物分泌至培养液中．结果表明，原核表达的ｕ－ＰＡＲ蛋白免疫家兔后获得高效价的抗血清，利用此抗血清所作Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ证实酵母表达蛋白具有ｕ－ＰＡＲ的免疫原性，表观分子量４０ｋＤ左右．Ｍｕｔ－表型在第５ｄ为最高（２．５μｇ／ｍｌ），Ｍｕｔ＋表型在第４ｄ为最高（７．５μｇ／ｍｌ）．因此，构建的可溶性ｕ－ＰＡＲ表达质粒在Ｐｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓ酵母细胞获得表达，为进一步竞争拮抗受体功能的研究奠定了基础．
- 唐辉滨何诚彭鲁英于伟英应其龙朱运松
- 关键词：肿瘤酵母
- 尿激酶型纤溶系统在乳腺癌细胞侵袭中的作用被引量：2
- 2000年
- 目的 研究尿激酶型纤溶系统组分uPA、uPAR、tPA及PAI 1在人乳腺癌细胞侵袭中的作用。方法 以 3株具有不同侵袭转移能力的乳腺癌细胞株作为研究对象 ,应用RT PCR方法比较纤溶组分在此 3株细胞中的表达 ,牛奶板法检测细胞培养上清中的纤溶活性 ,用Boyden小室模型测定细胞侵袭能力。结果 发现MDA MB 2 31细胞表达较高水平的uPA、uPAR、PAI 1和中等水平的tPA ,无血清培养上清中总纤溶活性和uPA纤溶活性最高 ;MDA MB 435细胞表达较低水平的uPA和较高水平的tPA ,但未测出uPAR和PAI 1的表达 ,无血清培养上清中总纤溶活性较高 ,主要是tPA活性 ;MCF 7细胞表达较低水平的uPAR和较高水平的PAI 1,但未测出uPA和tPA的表达 ,无血清培养上清中几乎没有纤溶活性。与纤溶活性相一致的是 ,Boyden小室模型实验结果发现MDA MB 2 31在 3株细胞中体外侵袭能力最强 ,MDA MB 435次之 ,MCF 7则几乎无体外侵袭能力。经抗uPA和抗uPAR抗体预处理MDA MB 2 31细胞 ,分别使侵袭能力下降 83 .1%和 43.9% (P <0 .0 5 )。
- 徐韶华廖劲晖于伟英朱运松
- 关键词：乳腺癌肿瘤侵袭
- 尿激酶受体在大肠杆菌中的表达及其多克隆抗体的制备
- 1998年
- 目的构建尿激酶受体（ｕｒｏｋｉｎａｓｅ－ｔｙｐｅｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎａｃｔｉｖａｔｏｒｒｅｃｅｐｔｏｒ，ｕＰＡＲ）表达质粒并在大肠杆菌中表达，用纯化的表达产物ｕＰＡＲ蛋白制备多克隆抗体并初步应用于肿瘤标本的检测。方法用基因工程的方法构建ｕＰＡＲｃＤＮＡ表达质粒ｐＬＹ４－ｕＰＡＲ，转化重组大肠杆菌在４２℃条件下诱导表达；利用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ进行纯化并用纯化后的抗原免疫新西兰兔制备多克隆抗体，应用制备的抗体对乳腺癌和肝癌中ｕＰＡＲ的分布进行检测。结果ｕＰＡＲ表达质粒在大肠杆菌中高效表达，表观Ｍｒ为３０×１０３左右。表达的ｕＰＡＲ占全菌蛋白的２０％左右；获得了效价为１∶３２的ｕＰＡＲ多克隆抗体；发现ｕＰＡＲ主要分布在癌细胞的表面及胞质内，而在癌旁组织中则较弱。结论ｕＰＡＲ在大肠杆菌获得高效表达，并制备得到多克隆抗体。ｕＰＡＲ在癌组织（乳腺癌及肝癌）与癌旁组织间的表达差异提示可将其应用到临床肿瘤的诊断与肿瘤转移的实验性研究中。
- 唐辉滨于伟英何诚廖劲辉田昱田昱朱运松
- 关键词：尿激酶受体多克隆抗体大肠杆菌肿瘤血管
