公共文化服务平台

共 5 条记录，以下是 1-5

全选清除导出

排序方式：

重组鼠疫耶尔森菌LcrV抗原原液性质研究: 2012年; 目的进行重组鼠疫耶尔森菌LcrV抗原原液二聚体含量及性质研究,确定LcrV原液的相关质控标准。方法在不同缓冲体系(0.85%NaCl(NS)、20 mmol/L PBS),不同蛋白浓度(2.0、1.5、1.0、0.5、0.1 mg/mL)及不同保存温度(4℃、-20℃、-70℃)条件下保存LcrV抗原,采用SDS-PAGE和HPSEC方法定期检测LcrV二聚体含量及纯度。将连续三批检定合格的LcrV抗原原液进行质谱相对分子质量测定、等电点测定、N末端氨基酸序列测定、圆二色(CD)谱、HPLC肽谱及氨基酸组成分析,研究LcrV抗原的相关性质。结果随着保存时间的延长LcrV抗原二聚体含量增加,低温保存时二聚体不易大量形成。在-20℃和-70℃条件下,NS保存的LcrV抗原比PBS体系保存稳定,而在4℃条件下NS保存的LcrV抗原容易降解。LcrV抗原高浓度保存容易发生聚合。LcrV抗原在低质量浓度(0.1 mg/mL)保存时免疫学活性明显下降。质谱检测到LcrV单体和二聚体共同存在,且与理论相对分子质量一致。LcrV原液检测等电点范围为4.6～6.3。N末端测序、CD谱、HPLC肽谱图及氨基酸组成分析与理论结果一致。结论 LcrV抗原原液保存条件确定为:NS体系,蛋白质量浓度1.0～2.0 mg/mL,-20℃以下冻存。制备的LcrV抗原各项检测结果与理论结果一致,抗原性质稳定。; 胡丽娜常娅莉万艳张轶吴智远卜培英王秉翔

鼠疫菌V抗原的单抗系统建立和免疫学定量检测: 目的：制造鼠疫菌V抗原的鼠单克隆抗体，经抗体表位分析建立单抗系统，并通过此单抗系统建立免疫学检测鼠疫菌V抗原含量的方法，进行鼠疫疫苗研制中V抗原的质量控制。方法：用鼠疫菌V抗原免疫雌性BALB/c小鼠，取小鼠...; 常娅莉惠一明王秉翔焦磊胡丽娜傅林锋王革卜培英裴明玉万艳韩少波; 关键词：鼠疫耶尔森菌双抗体夹心免疫学检测; 文献传递

重组鼠疫耶尔森菌LcrV抗原制备工艺的建立被引量：2: 2011年; 目的建立稳定、高效的重组鼠疫耶尔森菌LcrV抗原工程菌的发酵与纯化工艺。方法研究LcrV工程菌pET-V/BL21(DE3)在试管和三角摇瓶中的生长和表达规律,对种子培养基、IPTG诱导时机、诱导时间及诱导浓度进行优化,并放大至30 L发酵罐培养,建立稳定的发酵工艺。收获菌体,经冻融、离心收集蛋白溶液,高压匀浆处理后,分别采用Q.Sepharose HP阴离子交换层析、Phenyl Sepharose 6 FF(hs)疏水层析及Superdex 75 pg凝胶过滤层析三步柱层析纯化,建立稳定的纯化工艺,连续纯化3批,并按《中国药典》三部(2010版)的相关要求进行全面检定。结果经优化的条件培养及诱导表达,工程菌的收菌密度(A600值)可达34,LcrV抗原的表达量达36%,含量为1.6 g/L。发酵产物经柱层析纯化,LcrV产量高于140 mg,纯度大于95%,蛋白总回收率达8.5%以上。各项检定指标均符合《中国药典》三部(2010版)的相关要求。结论已建立了稳定的、适合规模化生产的LcrV制备工艺,为新型鼠疫组分疫苗的研制奠定了基础。; 胡丽娜常娅莉魏东万艳马维民傅林锋王革吴智远韩少波王秉翔; 关键词：大肠杆菌发酵纯化

重组鼠疫菌V抗原的纯化及其豚鼠免疫保护力初探被引量：3: 2004年; 采用Ni2 +亲和层析方法 ,对用工程化大肠杆菌BL2 1(DE3)表达的重组鼠疫菌V抗原进行纯化 ,目标蛋白纯度达到 90 %以上。以氢氧化铝凝胶配制吸附疫苗 ,经二针次肌内注射免疫实验豚鼠后 ,对皮下注射 4 0 0个致死剂量 (MLD)强毒鼠疫菌攻击有一定保护效力 ,存活率为 2 0 %。结果表明。; 傅林锋戴瑞霞应莲芳谢榛杨晓艳马雅茹万艳薛晓红王秉翔; 关键词：鼠疫耶尔森氏菌纯化

重组鼠疫菌F1抗原的纯化及其在ELISA检测鼠疫免疫中的应用: 2006年; 从表达rF1抗原的大肠杆菌中以Superdex-200凝胶过滤层析纯化rF1抗原,电泳扫描显示纯化率>90%。SDS-PAGE及琼脂免疫双扩散结果显示纯化的rF1抗原具天然F1抗原的活性。将此纯化的rF1抗原用于间接ELISA分析免疫动物血清中抗F1抗体的水平,并与天然F1抗原相比较,证明rF1抗原优于天然F1抗原分析结果,可用于鼠疫的血清学检测。; 王革常娅莉万艳马超王秉翔; 关键词：纯化血清学检测

全选清除导出

共1页<1>

万艳