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丁秀云: 作品数：21 被引量：74H指数：6; 供职机构：中国人民解放军总医院更多>>; 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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牛主动脉平滑肌细胞体外钙化模型的制备被引量：4: 2006年; 目的利用β-甘油磷酸盐处理牛主动脉平滑肌细胞(BASMC)制备体外血管钙化模型。方法移植块法原代培养牛主动脉中膜平滑肌细胞,8代内的传代细胞添加10 mmol/Lβ-甘油磷酸盐培养10 d,Von Kossa染色、茜素红S染色和电镜检查鉴定钙化,同时测量细胞层钙沉积、碱性磷酸酶活性及培养上清的骨钙素含量。结果10 d后细胞层出现大量钙盐沉积,并且β-甘油磷酸盐时间依赖性增加钙沉积,碱性磷酸酶活性及骨钙素含量各时间点均较正常培养细胞显著增加(P<0.01)。结论甘油磷酸盐能在短期内诱导出BASMC广泛钙化,用此方法制备的BASMC是一种良好的研究血管钙化的体外模型。; 刘立新王士雯丁秀云王宇玫赵玉生; 关键词：钙化主动脉平滑肌细胞体外模型

SARS合并MODS病人的治疗方案: 本文将我们多年从事老年多器官功能不全救治工作的成功经验和研究成果总结成一整套治疗方案用于SARS合有MODS病人的治疗希望能降低SARS合有MODS病人的死亡率,提高SARS终末期病人的救治成功率,由此降低SARS总病死...; 王士雯赵玉生卢才义薛桥高伟李泱邱苹李彦华朱庆磊程芮丁秀云尹彤; 关键词：SARS 老年多器官功能不全合并症病死率; 文献传递

肿瘤坏死因子α对心肌细胞线粒体和膜电位、胞内钙离子浓度的影响被引量：4: 2005年; 目的:通过研究肿瘤坏死因子对培养的衰老心肌细胞的线粒体膜电位、胞内钙离子浓度[Ca2+]i的变化,探讨其在心肌细胞损伤中的作用机制。方法:实验于2001-09/2002-09在解放军总医院老年心血管病研究所分子生物学实验室及军事医学科学院电镜中心进行。常规培养心肌细胞。用噻唑兰检测不同浓度肿瘤坏死因子α(1000,3000,5000U/L)对心肌细胞活力的影响。以3000U/L肿瘤坏死因子α刺激心肌细胞,Rhodam ine123和Fluo-3/AM负载后通过共聚焦激光扫描显微镜测量线粒体膜电位和细胞内钙浓度([Ca2+]i)的变化。结果:①噻唑兰法显示3种浓度的肿瘤坏死因子α作用24h后,A值百分率最高,48h后A值百分率下降。②3000U/L肿瘤坏死因子α刺激心肌细胞后,共聚焦扫描图像显示心肌细胞[Ca2+]i升高,作用0,2,12h平均荧光强度分别为29.64±16.33,96.45±29.42,104.52±22.17,有显著性差异(P<0.05)。③3000U/L肿瘤坏死因子α刺激后,激光共聚焦显微镜显示线粒体膜电位在75s内可见荧光强度先稍有降低后升高,未用肿瘤坏死因子α处理组及肿瘤坏死因子α处理后5,10,15,20m in、2及12h的M M P荧光强度分别为134±57,115±43,114±40,112±38,97±28,77±55,34±16,12h后线粒体膜势能下降一半,统计学分析无显著意义。结论:肿瘤坏死因子α能增加[Ca2+]i、降低线粒体膜电位,可能是肿瘤坏死因子α介导心肌细胞损伤的重要机制之一。; 王琳丁秀云刘谟焓王士雯; 关键词：肿瘤坏死因子Α 膜电位

SARS合并多器官功能不全患者的治疗建议方案被引量：1: 2003年; 王士雯赵玉生卢才义谭端军薛桥高伟李泱刘玲玲高玉玲李帼英邱苹李彦华朱庆磊程芮丁秀云尹彤; 关键词：SARS 多器官功能不全合并症非典型肺炎

同型半胱氨酸对血管钙化的促进作用被引量：12: 2003年; 目的　在体外血管钙化模型基础上探讨同型半胱氨酸 (HCY)对血管钙化的影响。方法建立牛主动脉平滑肌细胞体外钙化模型 (钙化BASMCs) ,检测HCY对细胞层钙含量、培养上清骨钙素浓度及碱性磷酸酶活性的影响 ,并检测骨钙素、骨桥蛋白及Ⅰ型胶原 (ColⅠ )mRNA表达的变化及抗氧化剂N 乙酰半胱氨酸对HCY促钙化作用的影响。结果　HCY剂量依赖性促钙化BASMCs钙沉积 ,但不促进非钙化的BASMCs钙沉积 ;N 乙酰半胱氨酸抑制HCY对钙化BASMCs钙沉积的促进作用 ,但在钙化BASMCs中单纯加入等剂量的N 乙酰半胱氨酸对钙沉积无影响 ;HCY促钙化BASMCs培养上清骨钙素含量增加 ,且使骨桥蛋白、骨钙素、ColⅠmRNA表达分别增加 56 33 %、86 48%及 1 1 0 64 % ,但对正常培养的BASMCs培养上清骨钙素含量及骨桥蛋白、骨钙素mRNA表达无影响 ,仅使ColⅠmRNA表达增加 1 0 8 33 % ;HCY不影响正常及钙化BASMCs碱性磷酸酶活性。结论　 (1 )HCY是钙化的促进因子 ,而非启动因子 ;(2 )HCY的促钙化作用可能部分是通过细胞外基质途径实现的 ;(3)N 乙酰半胱氨酸阻断HCY的促钙化作用 ,间接提示氧化反应参与此过程 ;(4); 陈宇王士雯王宇枚冯斌丁秀云; 关键词：心血管疾病同型半胱氨酸血管钙化

基质金属蛋白酶抑制剂-4在大肠杆菌中的克隆与表达: 2003年; 基质金属蛋白酶抑制剂 4(tissueinhibitorofmetalloproteinase 4,TIMP 4)为心脏特异性表达 ,在心脏代谢和肿瘤转移、侵袭过程中具有重要作用。为进一步研究其功能和作用机理 ,以PCR方法扩增人基质金属蛋白酶抑制剂 4不含信号肽的表达序列 ,测序鉴定正确后 ,构建原核重组表达质粒pMAL c2 TIMP 4,转化大肠杆菌 ,IPTG诱导阳性克隆 ,大量表达重组蛋白。细菌经超声破碎后 ,其上清中的重组蛋白经SDS PAGE初步鉴定分子量大小与理论值一致 ,为以后基质金属蛋白酶抑制剂; 丁秀云王士雯刘谟焓; 关键词：大肠杆菌基质金属蛋白酶基因克隆

胰岛素样生长因子-1对血管异位钙化作用的研究被引量：11: 2002年; 目的 :胰岛素样生长因子 (IGF 1)对动脉粥样硬化的形成和发展及骨骼组织的矿化均起重要作用 ,鉴于动脉钙化广泛存在于动脉粥样硬化病变中而且与骨骼矿化过程的相似性 ,本研究试图研究IGF 1在动脉钙化中的作用。方法 :体外培养牛主动脉平滑肌细胞 ,建立血管钙化模型 ,在培养液中加入不同浓度的IGF 1,观察细胞钙沉积变化 ,以及与之密切相关的细胞碱性磷酸酶活性和骨钙素分泌情况。结果 :10 - 9mol L的IGF 1培养 10d后 ,普通对照培养细胞的钙沉积无明显变化 ,钙化培养细胞的钙沉积增加了 11 82 % (P >0 0 5 ) ,在此过程中细胞内碱性磷酸酶活性增加了 16 8 7% ,骨钙素分泌增加了 5 8 3% ;增加IGF 1的浓度至 10 - 8mol L和 10 - 7mol L ,细胞的钙盐沉积进一步增加 ,分别提高了 2 2 74 % (P <0 0 5 )和 4 0 7% (P <0 0 1)。结论 :IGF 1可呈剂量依赖性的促进钙化血管细胞的钙质沉积。; 王宇玫王士雯佟欣丁秀云; 关键词：胰岛素样生长因子-1 动脉硬化血管平滑肌

心肌缺血过程中磷酸肌醇4-激酶变化的研究: 2001年; 目的　观察大鼠心肌缺血后心肌细胞和红细胞膜上磷酸肌醇 4 激酶活性的变化 ,探讨其在心肌缺血过程中的调控机理。方法　建立大鼠体内心肌缺血模型 ,在蛋白水平上分别检测心肌细胞和红细胞膜上磷酸肌醇 4 激酶活性在缺血后不同时间 (缺血后 1、8、2 5及 48h)的变化 ,用免疫组织化学方法检测磷酸肌醇 4 激酶蛋白表达水平的变化。结果　 (1)心肌细胞膜上磷酸肌醇 4 激酶活性在心肌缺血后 1h达到最高 ,为对照组的 6 .1倍 ,随着时间的延长 ,其活性逐渐下降 ,48h接近于正常水平 ;免疫组织化学结果显示 :与正常组相比 ,缺血组磷酸肌醇 4 激酶蛋白表达水平明显升高。 (2 )红细胞膜上磷酸肌醇 4 激酶活性在缺血后 1h和 2 5h达到最高 ,随后酶活性开始下降 ,缺血后 48h酶活性水平低于正常水平。结论　心肌缺血早期 (1h)心肌细胞和红细胞膜上磷酸肌醇 4 激酶活性显著提高 ,提示磷酸肌醇 4 激酶参与了心肌缺血后的调节过程 ,其活性升高可能与心肌受损伤程度相关。; 丁秀云乐加昌王士雯高雪李先锋; 关键词：心肌缺血红细胞膜免疫组织化学动物实验

TGF-β对动脉钙化的影响被引量：17: 2001年; 目的 :探讨转化生长因子 - β(TGF- β)在动脉钙化中的作用。方法 :建立体外动脉钙化的模型 ,培养钙化血管平滑肌细胞 ,在培养液中加入 TGF- β,观察钙沉积及细胞碱性磷酸酶的变化 ,同时观察钙化过程中骨间质蛋白骨钙素分泌情况。结果 :1μg/ L 的 TGF- β作用 10 d后 ,钙化细胞的钙沉积为 1.95± 0 .5 6 μm ol/ L,较钙化对照组 (1.71±0 .0 5 μm ol/ L)增加了 14.4% ,细胞碱性磷酸酶的活性为 5 46± 118IU/ L,比钙化对照组 (16 5± 6 3IU/ L)增加了2 95 % ,这种作用在第 8天达到高峰 ,以后略有下降。在钙化加重的同时 ,骨钙素分泌亦明显增加 ,达 0 .37± 0 .0 4ng/ L;而 TGF- β对非钙化的细胞无上述作用。结论 :1μg/ L 的 TGF- β可以促进钙化血管平滑肌细胞的钙化过程。; 王宇玫王士雯佟万仁丁秀云陈宇; 关键词：钙化动脉转化生长因子-Β 骨钙素

D-半乳糖对幼鼠心肌细胞拟衰老作用的实验被引量：9: 2005年; 目的:观察可诱导成纤维细胞、神经元细胞衰老的D-半乳糖对心肌细胞拟衰老的诱导作用。方法:实验于2001-09/2002-09在解放军总医院老年心血管病研究所分子生物学实验室进行,常规培养心肌细胞。分别用4,8,10,12,16g/L的D-葡萄糖和D-半乳糖作用于幼鼠心肌细胞,倒置显微镜观察心肌细胞跳动的频率、形态,用噻唑兰检测不同浓度D-半乳糖对心肌细胞活力的影响。苏木素-伊红染色观察心肌细胞形态,鉴定细胞衰老的生物学标志β-半乳糖苷酶观察细胞衰老情况。结果:①倒置显微镜下观察到D-半乳糖诱导的心肌细胞体积增大、扁平,跳动频率减缓,后期细胞代谢也减缓。②苏木素伊红染色结果显示,年轻心肌细胞胞浆红染,着色均匀,D-半乳糖诱导的心肌细胞胞体增大,形状扁平,胞浆区域增大,可见颗粒增多,着色不均。③D-半乳糖诱导心肌细胞90%出现β-半乳糖苷酶染色阳性,比例大大高于对照组心肌细胞。结论:D-半乳糖诱导幼鼠心肌细胞后,细胞出现老化形态及特点,提示D-半乳糖可诱导体外培养的心肌细胞老化,从而复制细胞衰老。; 王琳丁秀云刘谟焓王士雯; 关键词：半乳糖细胞衰老

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