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丁林贤: 作品数：57 被引量：163H指数：8; 供职机构：浙江师范大学更多>>; 发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金浙江省科技计划项目更多>>; 相关领域：环境科学与工程生物学农业科学文化科学更多>>

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藤黄微球菌Rpf活性蛋白的制取及其对红球菌VBNC菌体的复苏作用被引量：17: 2012年; 【目的】克隆藤黄微球菌Micrococcus luteus IAM 14879(=NCIMB 13267)的复苏促进因子Rpf(resuscitation promoting factor)的基因,在大肠杆菌中表达获取基因重组蛋白,考察对近缘高GC革兰氏阳性菌红球菌Rhodococcus sp.DS471活的非可培养VBNC(viable but non-culturable)菌体的复苏促进生长能力。【方法】抽提制备藤黄微球菌的DNA,确定rpf基因引物进行PCR扩增,利用pET15b质粒载体并转化大肠杆菌DE3表达,以SDS-PAGE检验获取纯化重组蛋白;在培养基中添加Rpf,以MPN(most probable number)法计数、评价对VBNC状态菌体的复苏促进生长效果。【结果】基因测序证实获得藤黄微球菌的rpf基因并在大肠杆菌中表达;SDS-PAGE分析表明获得rpf基因的重组蛋白;该蛋白对处于VBNC状态的红球菌具有近100倍的复苏促进生长能力。【结论】成功克隆了藤黄微球菌的rpf基因,在大肠杆菌中获得了表达,表明了Rpf蛋白对处于VBNC状态的红球菌具有复苏促进生长效果。; 丁林贤张萍华洪华嫦林红军横田明; 关键词：藤黄微球菌 VBNC 红球菌

提高环境微生物学教学效果的途径探讨被引量：5: 2012年; 环境微生物学是环境科学相关专业重要的专业知识与技能课程。分析了环境微生物学常见问题与教学难点,设计教学小道具、科研简易小设备、利用多媒体介绍国内外最新科研动态等教学新亮点,以及调整学期专业课程安排时间等教改措施,营造课堂学习氛围,缩短理论学习与实际应用间的距离,增强学生课外科研积极性,引导学生成功考研等方面收到了良好的效果。; 丁林贤黄芳王方园洪华嫦; 关键词：环境微生物教学方法课程安排

基于VBNC状态复苏的荧光假单胞杆菌CHZYR63对毒死蜱的酶降解效果: 2015年; 利用复苏可培养化VBNC(Viable but non-culturable bacteria)资源菌筛选了对毒死蜱有降解性能的菌种及其酶.应用最大或然数计数(MPN)法,添加复苏促进因子Rpf蛋白分子,获取可培养化VBNC菌种,确定菌种的系统进化属性,并用常规培养法筛选了高效毒死蜱降解菌及其酶,探索了适宜的酶降解优化条件.从分离到的可培养化VBNC菌株中筛选出一株降解毒死蜱效果达70%的菌株CHZYR63,经16S r RNA基因序列分析,初步鉴定为荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens).继而,从该菌株提取出粗酶,其降解毒死蜱能力为50%.降解条件优化研究表明:降解酶促反应的最适温度为35℃,最适p H值为7;在最适条件下该降解酶在30 min内对毒死蜱(100 mg/L)的降解率可达60.26%.; 丁林贤吴咚咚付惠玲王强蔡慧慧施洁莹王新全周育; 关键词：毒死蜱酶促降解 PH 温度

广西蚕沙细菌组成多样性解析和VBNC菌群的发掘被引量：4: 2020年; 【目的】解析广西蚕沙中细菌群落组成与多样性,为蚕沙中菌种资源发掘和蚕沙的综合利用提供科学依据。【方法】通过高通量测序技术研究细菌群落组成特征,同时利用常规稀释涂布平板法和基于复苏促进因子(Rpf)的MPN培养系统解析并筛选蚕沙中可培养和活的非可培养(VBNC)状态的优势菌群,并经16SrRNA基因测序对筛选得到的菌株作初步分类鉴定。【结果】高通量测序表明,广西蚕沙样品中细菌归属于10个门、18个纲、27个目、57个科、96个属,其中4个属的丰度达1%以上,优势菌群为变形菌门(Proteobacteria)肠杆菌属(Enterobacter);通过稀释涂布平板法共获得14个属的33株可培养细菌,其中4个属(Citrobacter、Weissella、Chitinophaga、Pseudoclavibacter)在高通量测序中未被检测到;而在MPN培养系统中,基于复苏促进因子的处理组细菌总数最大检出丰度提高了100倍,并从中共检出21株对Rpf敏感的VBNC菌株,其中6个属(Paenibacillus、Caulobacter、Roseomonas、Pantoea、Erwinia、Acinetobacter)为传统分离法中未能获得的菌属,2个属(Paenibacillus和Caulobacter)在高通量测序中未被检测到。【结论】蚕沙细菌多样性丰富,不同方法解析蚕沙细菌组成多样性存在一定差异,而且通过添加Rpf首次发现了蚕沙中存在大量过去未被认知的VBNC状态细菌,其中从16S rRNA基因序列同源性推测有3个VBNC菌株为潜在新种。此研究结果为深入挖掘蚕沙中微生物资源提供了新的视角与途径,为蚕沙的综合处理提供了研究基础。; 张艳军陈宝婷张玉梅张逸飞朱宝琳苏盼丁林贤谢乃钧张萍华; 关键词：高通量测序蚕沙细菌多样性

荧光假单胞菌CHZYR6 3菌株及其酶制剂和对毒死蜱农药降解的应用: 本发明涉及利用Rpf复苏VBNC菌，尤其涉及一种荧光假单胞菌（Pseudomonassp.）CHZYR6 3菌株及其应用。荧光假单胞菌（Pseudomonassp.）CHZYR6 3菌株，该菌株保藏在位于中国典型物保藏中...; 吴咚咚王强蔡慧慧丁林贤王新全周育; 文献传递

活的但非可培养(VBNC)状态菌的研究进展被引量：20: 2011年; VBNC(viable but non-culturable)是指处于"活的但非可培养"状态的微生物,此微生物体的细胞仍有代谢活性,但用常规方法无法分离培养。本文阐述了VBNC状态菌的形成机理、转变与种类、复苏、研究意义及其应用展望。并报道了我们在十余年间针对生态环境中处于VBNC状态菌的复苏、可培养化、系统进化关系及潜在功能等方面的一些研究成果,拟为微生物资源的开发与应用提供新的科学依据。; 丁林贤苏晓梅横田明; 关键词：微生物资源

基于生物反应器制药废水中活的但非可培养状态细菌的分离（英文）: 2014年; [目的]探究制药废水中活的但非可培养(viable but non-culturable,VBNC)状态细菌的组成与系统关系。[方法]利用土质滤材构建生物反应器,基于复苏促进因子(resuscitation promoting factor,Rpf)对VBNC细菌的复苏刺激生长作用,采用MPN(most probable number)法,稀释平板法分离其中复苏可培养化的VBNC菌株并解析其16S rRNA基因系统关系。[结果]在MPN培养系中,Rpf对部分细菌有生长刺激作用。制药废水中存在对Rpf敏感、复苏可培养化的VBNC优势菌群;制药废水中对Rpf敏感的VBNC优势细菌主要有革兰氏阳性放线菌Microbacterium、Gordonia和Leucobacter属近缘菌,革兰氏阴性菌Candidimonas、Xanthobacter和Aminobacter属近缘菌,其中菌株ZYM1、ZYM3、ZYZR4和ZYXR1可能属于新种。[结论]研究结果揭示了制药废水中存在VBNC状态细菌,为研究其形成机理、复苏活性化机制以及制药废水的深度处理等提供重要的思路与方法。; 邹艳艳付惠玲陈雅红翟竟余韦彦斐梅荣武丁林贤; 关键词：制药废水生物反应器

纳米银-葛根纤维敷料的制备方法及应用: 本发明提供的纳米银‑葛根纤维敷料的制备方法，包括以下步骤：利用Ag<Sub>2</Sub>SO<Sub>4</Sub>溶液对葛根纤维进行脱胶处理，并生成银‑葛根纤维沉淀物；对银‑葛根纤维沉淀物表面进行中性化处理；用75％...; 宋娜陈建荣丁林贤杨利宁; 文献传递

一种藤黄球菌固定化小球的制备方法及其应用: 本发明公开了一种藤黄球菌固定化小球的制备方法，本方法是将藤黄球菌包埋在海藻酸钠‑多孔土质滤材混合液中，可稳定保持藤黄球菌活性，使其成为长期提供复苏促进因子Rpf蛋白的来源，Rpf蛋白可复苏促进有毒难降解有机污染环境中的潜...; 苏晓梅张硕张云鸽丁林贤林红军陈建荣

微酸性电解水的研究与应用展望被引量：11: 2012年; 微酸性电解水pH值在5.0～6.5之间,呈微酸性,对绝大多数细菌以及病毒都有显著杀菌效果,且对人体无害。该文结合笔者实验研究综述了微酸性电解水在食品加工及保鲜、医疗以及农业领域等方面的研究现状与应用前景。; 梁永娅余晓青Kurahashi Midori丁林贤; 关键词：消毒剂

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