丁传林
- 作品数：36 被引量：110H指数：6
- 供职机构：南京医科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- EB病毒LMP2A特异性CTL的体外诱导及分析被引量：2
- 2004年
- 用EBV LMP2A重组痘苗病毒 (rVV LMP2A )转染人树突状细胞 (DC ) ,转染后的DC分别在第 1、 7、 14天刺激相同MHC背景的T细胞 ,在IL 2作用下诱导LMP2A特异性CTL。用LDH释放法检测CTL杀伤活性 ;流式细胞术 (FACS )检测CTL诱导分化过程中CD3+ 、CD4 + 、CD8+ 、CD5 6 + 等细胞的分群变化 ;RT PCR检测细胞分化过程中FasLmRNA表达 ;生物活性法检测功能性细胞因子IFN γ的分泌。结果显示本法诱导的CTL对靶细胞有特异性杀伤活性 ,第 2次和第 3次DC刺激后杀伤活性有所上升 ;在CTL诱导分化的第 7、 14、 2 1天细胞分群以CD4 + 、CD8+ 细胞为主 ;RT PCR证实所诱导的细胞内有FasLmRNA的表达 ;随细胞培养天数的增加IFN γ分泌增加 ,在第 14天达到较高水平。研究表明重组痘苗病毒载体rVV LMP2A转染的DC刺激T细胞可诱导出EBV LMP2A特异性CTL。
- 姚堃许继军丁传林周锋谢芳艺
- 关键词：痘苗病毒载体EB病毒细胞毒性T细胞
- β-胡萝卜素立体异构体对环磷酰胺处理小鼠免疫功能的比较研究被引量：19
- 1997年
- 就β-胡萝卜素立体异构体对环磷酰胺处理小鼠的免疫功能影响进行了比较研究。结果显示β-胡萝卜素立体异构体对外磷酰胺造成的免疫功能低下具有不同程度的改善作用，提高胸腺和脾脏指数，增强脾脏细胞对刀豆素A（ConA）的反应性和NK活性，血清溶菌酶含量也有所增加。综合各项指标，9-顺式和全反式混合物的作用最明显，提示一定浓度的9-顺式对于提高β-胡萝卜素对机体的总体作用是有一定意义的。
- 丁传林吴旭东金安娜丁邦裕袁生秦怀兰
- 关键词：Β-胡萝卜素脾细胞增殖NK活性溶菌酶
- 老年人单核/巨噬细胞吞噬功能及一氧化氮产生能力的改变被引量：10
- 2003年
- 目的 探讨老年人单核巨噬细胞免疫功能的变化。方法 比较老年组与对照组外周血单核巨噬细胞吞噬功能及一氧化氮 ( NO)产生能力的变化。结果 老年组与对照组单核巨噬细胞吞噬百分率分别为 ( 37.2± 3.2 ) %、( 59.1± 4 .7) % ,吞噬指数分别为 0 .6 0± 0 .0 8和 1 .0 7± 0 .0 9;细菌脂多糖 ( L PS)刺激前后细胞培养上清中 NO的浓度老年组为 9.7± 1 .0μmol/L与 2 5.1± 6 .1μmol/L ;对照组为 1 6 .9± 1 .1μmol/L与 4 8.5±6 .7μmol/L。老年组均低于对照组。结论 老年人单核巨噬细胞免疫功能减退 ,提高老年人单核巨噬细胞吞噬功能及
- 吴剑卿程蕴琳季晓辉丁传林
- 关键词：老年人单核巨噬细胞一氧化氮N0
- EB病毒潜伏膜蛋白2A诱导细胞毒性T细胞抗鼻咽癌的体内外实验被引量：4
- 2006年
- 目的观察EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)-潜伏膜蛋白2A(latent membrane protein2A,LMP2A)转染人树突状细胞(dendritic cell,DC)诱导特异性细胞毒性T细胞(cytotoxicity Tlymphocyte,CTL)的体外生物学特性;建立表达EBV-LMP2A的裸鼠鼻咽癌动物模型,探讨LMP2A特异性CTL在荷瘤鼠体内的抗肿瘤效应。方法分离人外周血单核细胞(pripheral blood mononuclearcell,PBMC),以粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-monocyte colony stimulating factor,GM-CSF)、白细胞介素4(interleukin-4,IL-4)及肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)诱导培养获得DC,荧光激活细胞分选仪(fluorescence activated cell sorter,FACS)检测成熟DC的表面分子表达。用LMP2A重组腺病毒转染成熟DC,将转染DC与自体PBMC混合培养,在白细胞介素2(interleukin-2,IL-2)作用下诱导针对LMP2A的特异性CTL,FACS检测CTL群体中阳性细胞的组成。将鼻咽癌CNE细胞接种BALB/c裸鼠,建立鼻咽癌动物模型;在裸鼠肿瘤局部注射LMP2A特异性CTL,观察治疗后移植瘤生长情况及病理变化。结果人外周血PBMC体外在GM-CSF、IL-4、TNF-α诱导下获得典型形态及表型特征的成熟DC。FACS检测表明,以LMP2A重组腺病毒转染DC诱导的CTL细胞群体以CD4、CD8阳性细胞组成为主。在接种CNE细胞3周后建立表达EBV-LMP2A的裸鼠鼻咽癌动物模型;动物体内实验表明注射CTL的裸鼠肿瘤生长缓慢,体积明显小于对照组(P<0.01);病理检查显示肿瘤局部发生液化性坏死并有淋巴细胞浸润。结论人外周血单核细胞体外经细胞因子诱导,可生成具典型特征的成熟DC。利用LMP2A重组腺病毒将LMP2A基因转入DC,可在同一个体体外诱导出针对LMP2A的特异性CTL。CNE细胞接种裸鼠,可成功构建鼻咽癌动物模型;LMP2A特异性CTL在动物体内可明显抑制鼻咽癌肿瘤的生长,发挥有效的抗肿瘤作用。
- 徐洁洁姚堃俞晨杰陈曦陆美萍丁传林孙华李百周
- 关键词：鼻咽肿瘤膜蛋白树突细胞
- 树突状细胞的发育、亚群及其对T细胞应答类型的调控被引量：14
- 2002年
- 树突状细胞 (DC )的发育可分为未成熟和成熟两个阶段 ,未成熟DC在捕捉抗原后向外周淋巴组织的T细胞区迁移并成熟 ,成熟DC能表达丰富的MHC分子和协同刺激分子。未成熟DC通过诱导无能的和调节性T细胞导致免疫耐受 ,而成熟DC具有超强的激活初始T细胞能力。DC至少可分为三个亚群 ,不同亚群的DC在激活Th1/Th2、CTL应答方面存在差异 ,但最近的研究显示DC对T细胞应答类型的调控受多种因素的综合影响 :包括微生物的产物或佐剂、DC表面的信号受体、DC亚群、局部的微环境和附近T细胞及其他细胞产生的细胞因子。因此 。
- 丁传林姚堃
- 关键词：发育树突状细胞亚群T细胞应答免疫应答
- 人CD4分子cDNA的克隆及序列分析被引量：2
- 2004年
- 目的:克隆人的CD4基因,为进一步研究病毒感染CD4+细胞的分子机制奠定基础。方法:用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增出SupT1细胞株的编码CD4蛋白分子全长的基因,克隆至质粒pAS2-1中,并转入大肠杆菌DH5α。通过Amp抗性筛选、PCR及限制性内切酶EcoR I,BamH I双酶切等鉴定重组质粒并测定其中编码CD4片段的核苷酸序列。结果:克隆出编码CD4蛋白分子全长的CDNA,测序结果与文献报道进行同源比较,序列基本一致。结论:本实验成功克隆了编码人CD4蛋白全长的cDNA片段。
- 窦洁姚堃彭光勇陈云周锋丁传林
- 关键词：CD4逆转录-聚合酶链式反应克隆
- 含EB病毒LMP2A毕氏酵母表达载体的构建与表达LMP2A蛋白的检测被引量：2
- 2004年
- 目的:构建EB病毒潜伏膜蛋白2A的表达载体,并在真核生物毕氏酵母细胞中表达。方法:用EcoR I和Not I将含LMP2A全长编码基因的质粒PCIcc双酶切后,克隆到毕氏酵母载体PICZαA中,构建重组表达质粒pPICZαA-LMP2A。pICZαA-LMP2A经Sac I酶切线性化,采用氯化锂的方法转化毕氏酵母GS115,经YPD平板Zeocine抗性筛选获得LMP2A阳性克隆的菌株,用PCR鉴定阳性酵母转化子,并分别将阳性的酵母转化子在BMGY和BMMY培养基中进行诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE电泳和western-blotting分析。结果:重组质粒pPICZαA-LMP2A经PCR和酶切鉴定为阳性。SDS-PAGE电泳和western-blotting结果显示表达蛋白的相对分子量为54 Kda,与预计值相同。结论:构建了LMP2A毕氏酵母表达载体,并在酵母细胞中成功表达。
- 陈云姚堃孙华彭光勇丁传林谢芳艺周峰
- 关键词：EB病毒毕氏酵母肿瘤免疫疗法
- IL-4对DC产生IL-12影响的研究被引量：7
- 2003年
- 为了研究白细胞介素 4 (IL 4 )对树突状细胞 (dendriticcell,DC )产生白细胞介素 1 2 (IL 1 2 )p70的调节作用及其机制 ,将小鼠骨髓细胞在含GM CSF和IL 4的培养液中培养 6d ,加入成熟诱导剂脂多糖 (LPS )或TNF α、CpG ODN继续培养 2d以获得成熟DC。流式细胞仪检测DC表面CD80和MHCII类分子 ,混合淋巴细胞反应检测DC促进同种异体T细胞增殖的能力 ,ELISA法检测不同诱导剂诱导DC产生IL 1 2p70的能力 ,RT PCR和荧光定量PCR检测IL 1 2p35和p4 0mRNA的表达及其变化。结果显示小鼠骨髓细胞在含GM CSF、IL 4和成熟诱导剂的培养液中培养后可以获得成熟的DC ,成熟DC高表达CD80和MHCII类分子 ,具有较强的刺激同种异体T细胞增殖的能力 ,LPS、CpG ODN、TNF α、PolyI:C在促进DC成熟的同时能诱导DC产生有活性的IL 1 2 ,IL 4对IL 1 2的产生具有明显的促进作用 ,RT PCR和荧光定量PCR结果显示LPS诱导IL 1 2产生以及IL 4对其的促进作用与IL 1
- 丁传林姚堃张天泰周锋
- 关键词：树突状细胞白细胞介素4白细胞介素12脂多糖
- rhIL－3对人骨髓粒单祖细胞集落的影响被引量：1
- 1996年
- 应用骨髓细胞体外培养技术，观察了国产重组人白细胞介素３（ｒｈＩＬ－３）对人骨髓粒单祖细胞集落的影响。结果显示，ｒｈＩＬ－３能刺激正常骨髓细胞形成由粒细胞或（和）单核细胞构成的细胞集落，这种效应在一定范围内与ｒｈＩＬ－３剂量呈依赖关系。
- 丁传林姚揣李焕娣季晓辉
- 关键词：白细胞介素3细胞培养粒单祖细胞集落
- 乙型肝炎病毒C基因转染树突状细胞治疗慢性乙型肝炎的实验研究
- 本课题拟应用DC作为慢性乙型肝炎免疫治疗的APC,选择HBV的核心抗原(HBcAg)为治疗的靶抗原,以重组逆转录病毒作为基因转移的载体,将重组逆转录病毒感染过的DC作为慢性乙型肝炎的治疗性疫苗,诱导HBcAg特异性的CT...
- 丁传林
- 关键词：乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒核心抗原慢性乙型肝炎细胞毒性T细胞白细胞介素12
- 文献传递
