黄银君
- 作品数：32 被引量：70H指数：5
- 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金：甘肃省科技计划项目甘肃省科技重大专项计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 小反刍兽疫N5蛋白的原核表达及间接ELISA检测方法的建立被引量：4
- 2017年
- 【目的】建立一种适用于PPRVN蛋白抗体的间接ELISA检测方法,应用于PPR防疫.【方法】根据GenBank中登录小反刍兽疫病毒(PPRV)Nigeria 75/1株N基因序列进行人工合成,设计1对特异引物对N5基因扩增,经测序分析后将N5基因片段和原核表达载体pET-32a(+)相连接,成功构建pET-32a-N5质粒.将pET-32a-N5转化于TransB(DE3)原核表达感受态细胞后用IPTG诱导表达获得重组蛋白,经SDS-PAGE分析和Western-blot鉴定,重组蛋白分析具有良好的反应原性.【结果】利用原核表达纯化的PPRV N重组蛋白作为包被抗原,初步建立了一种能够检测针对PPRV N蛋白抗体的间接ELISA方法.用建立的方法对112山羊份血清进行了抗体检测,该方法与竞争ELISA试剂盒对比,临床符合率94.8%.【结论】该方法具有较好的敏感性、重复性和特异性.
- 刘斌陈晓宇牟筱黄银君牟克斌祁光宇许涛胡永浩
- 关键词：小反刍兽疫间接酶联免疫吸附试验
- 口蹄疫检测技术研究进展被引量：7
- 1995年
- 本文综述了发展到目前为止的口蹄疫(FMD)检测技术,包括了病毒分离、抗原抗体检测、亚型鉴定、单克隆抗体技术、疫苗检测技术和分子生物学技术等内容,并展望了未来的发展方向。
- 黄银君戈银生张文智赵允中
- 关键词：口蹄疫口蹄疫病毒抗体家畜
- 伪狂犬病病毒的分子生物学研究进展被引量：8
- 1995年
- 伪狂犬病病毒的分子生物学研究进展黄银君，周育彪（中国农业科学院兰州兽医研究所，兰州７３００４６）伪狂犬病病毒（ＰＲＶ）是伪狂犬病（又叫Ａｕ－ｊｅｓｚｋｙ′ｓ病）的病原，为ａ疱疹病毒，分类名叫猪疱疹病毒—１型。伪狂犬病最早是在牛上发现的，现在则成为猪的...
- 黄银君周育彪
- 关键词：伪狂犬病病毒分子生物学犬病
- 疣状毛癣菌免疫原性的研究
- 1992年
- 本研究以疣状毛癣菌LTV菌株制成活菌湿苗、活菌冻干苗、灭活冻干苗及其代谢产物冻干菌,给犊牛进行肌肉注射免疫接种。活菌湿苗免疫4头牛,结果4/4保护,而湿苗对照组2/17保护;活菌冻干苗免疫7头牛,结果5/7保护;灭活冻干苗免疫7头牛,6/7保护;代谢产物冻干苗免疫5头,0/5保护;冻干苗对照组0/7保护。其结果证明,疣状毛癣茵(Trichophytonverrucosum)菌体对牛具有良好的免疫原性。
- 戴瑞良张云德黄银君王晓兰周志锋魏兰秀张富强成克文
- 关键词：黄牛奶牛
- 稳定表达T_7RNA聚合酶的猪睾丸细胞系的建立被引量：2
- 2012年
- 根据GenBank中登录的T7RNA聚合酶基因参考序列,设计合成了1对特异性引物扩增对T7RNA聚合酶基因进行扩增,将测序正确的T7RNA聚合酶基因和真核表达载体pIRES2-EGFP双酶切后进行连接构建pIRES2-EGFP-T7RNA RNA质粒。再将构建正确的pIRES2-EGFP-T7RNA质粒经用脂质体法转染猪睾丸细胞,通过G418筛选和单细胞克隆化,同时构建pET-32a-RED原核表达质粒载体,用其检测T7启动子控制下的红色荧光蛋白的表达。结果表明,建立的ST/T7RNA细胞系经20次传代仍然能稳定表达T7RNA聚合酶。结果显示,成功建立能稳定表达T7RNA聚合酶的猪睾丸细胞系,为猪瘟病毒反向遗传操作平台奠定了基础。
- 祁光宇刘萍刘斌王凡武发菊杜平董金杰黄银君牟克斌刘学荣
- 一种利用植物油佐剂制备动物病毒性、细菌性疫苗的方法
- 一种利用植物油佐剂制备动物病毒性、细菌性疫苗的方法，其特征在于它包括以下步骤：(1)制作抗原剂，将制苗毒(菌)株用敏感细胞或培养基复制，灭活后，获得抗原；并将所述的抗原制成抗原剂；(2)制作植物油佐剂；(3)混匀，将所述...
- 柳纪省殷相平黄银君白银梅牟克斌李宝玉杨联李志勇王辉兰喜张兴旺
- 文献传递
- F-2毒素检测方法研究——柱色谱洗脱剂的筛选
- 1990年
- F-2毒素除直接用薄层色谱法检测外,还可经柱色谱法分离,除掉样品中大量杂质,然后再通过薄层色谱法定性、定量或提纯。柱色谱法是大剂量提纯真菌毒素必要程序之一,因此筛选分离物组份集中的洗脱剂,将是试验的主要目的。
- 赵从中张云德逯忠新黄银君蔡巍
- 关键词：F-2毒素
- 一种利用植物油佐剂制备动物病毒性、细菌性疫苗的方法
- 一种利用植物油佐剂制备动物病毒性、细菌性疫苗的方法，其特征在于它包括以下步骤：(1)制作抗原剂，将制苗毒(菌)株用敏感细胞或培养基复制，灭活后，获得抗原；并将所述的抗原制成抗原剂；(2)制作植物油佐剂；(3)混匀，将所述...
- 柳纪省殷相平黄银君白银梅牟克斌李宝玉杨联李志勇王辉兰喜张兴旺
- 文献传递
- pPIC9K-IL-2重组质粒的构建及其在毕赤酵母中的表达被引量：1
- 2014年
- 根据Ovis aries interleukin(IL-2)序列设计1对引物,用PCR法扩增的目的基因进行克隆,将测序正确的IL-2基因片段和表达载体pPIC9K同时双酶切后相连,构建pPIC9K-IL-2重组表达载体.将线性化的载体pPIC9K-IL-2电转化毕赤酵母GS115,对重组酵母转化子经MD平板筛选和PCR分析鉴定后,用G418(4g/L)筛选到多拷贝菌株,进行不同条件下甲醇诱导表达.结果表明:经PCR鉴定IL-2基因已整合到酵母基因组中,表达产物经SDS-PAGE电泳分析发现相对分子质量约为18ku目的蛋白表达条带,本研究成功构建了高效表达重组羊IL-2毕赤酵母菌株,为新型细胞因子佐剂的研发奠定了基础.
- 刘斌祁光宇陈晓宇王宇牟克斌黄银君刘学荣
- 关键词：毕氏酵母SDS-PAGE
- 小反刍兽疫病毒N基因部分片段克隆表达及鉴定被引量：2
- 2013年
- 根据GenBank中登录小反刍兽疫病毒(PPRV)Nigeria 75/1株N基因序列进行人工合成,在此基础上设计2对特异引物分别对N1、N5基因扩增和对N1和N5基因进行搭桥PCR连接,经测序分析后将N1-N5基因片段和原核表达载体pET-32a(+)相连接,构建pET-32a-N1-N5质粒。将pET-32a-N1-N5转化于TransB(DE3)原核表达感受态细胞后用IPTG诱导表达,将纯化重组蛋白进行SDS-PAGE分析和Western-blot鉴定。结果表明,所表达蛋白以可溶性形式表达并具有能与PPRV阳性标准血清发生特异性反应,为建立快速检测小反当兽疫病毒抗体水平诊断方法奠定基础。
- 祁光宇刘斌陈晓宇王赛错苟慧天黄银君穆克斌刘学荣
- 关键词：小反刍兽疫病毒SDS-PAGEWESTERN-BLOT
