黄达娜 作品数:272 被引量:609 H指数:11 供职机构: 深圳市疾病预防控制中心 更多>> 发文基金: 深圳市科技计划项目 广东省自然科学基金 教育部留学回国人员科研启动基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 轻工技术与工程 农业科学 更多>>
不同检材微量血间日疟原虫PCR检测模板制备方法的研究 2012年 目的探寻不同检材微量血间日疟原虫PRC检测模板制备的方法。方法全血标本采用酚/氯仿抽提法、洗涤沉淀法、Chelex煮沸法和洗涤水煮法;滤纸干血滴及厚血膜标本以Chelex煮沸法和洗涤沉淀法制备模板。以间日疟原虫特异性引物作PCR扩增检测模板制备的效果。结果采用上述4种不同的方法制备的全血间日疟原虫DNA模板与采用Chelex法和洗涤沉淀法制备的滤纸干血滴以及厚血膜疟原虫DNA模板均可被扩增出1条341bp的间日疟原虫特异性DNA条带,与预期的扩增片断大小一致;不同方法制备的10份间日疟患者血样DNA模板用于PCR扩增检测,结果无明显差异。其中,Chelex煮沸法和洗涤沉淀法对不同检材的疟原虫感染血样DNA模板均能有效制备,且可在同一离心管中进行,减少了交叉污染的机会。结论Chelex法和洗涤沉淀法简便、实用,适用于不同检材微量血疟原虫PRC模板的制备。 高世同 张仁利 李晓恒 黄达娜 耿艺介 吴少庭关键词:间日疟原虫 DNA提取 聚合酶链反应 重组SARS病毒M蛋白的免疫效应研究 被引量:1 2006年 目的检测SARS冠状病毒重组M蛋白疫苗诱导小鼠的免疫应答能力。方法PCR扩增M蛋白基因,构建至原核表达质粒pET-23a,pET-23a-M重组质粒转化BL21(DE3)宿主菌,诱导表达蛋白经SDS-PAGE、免疫印迹分析和纯化后免疫BALB/c小鼠,3次免疫后测定免疫功能,进行免疫效果评价。结果成功构建pET-23a-M重组质粒,转化宿主菌后诱导表达27 ku M蛋白。检测M蛋白免疫鼠体内有特异性抗体产生,抗体效价达1∶104;脾脏CD8+比例升高,CD4+/CD8+比值下降;免疫鼠血清IFN-γ和IL-4水平无显著变化。结论SARS病毒重组M蛋白疫苗能诱导BALB/c小鼠产生特异性体液免疫和细胞免疫应答。 甘燕 吴少庭 秦莉 雷明军 戴五星 袁仕善 黄达娜关键词:SARS冠状病毒 M蛋白 免疫效应 疟疾高度流行区回国人员的疟疾防制对策研究 被引量:7 2009年 目的探讨深圳市赴疟疾高度流行区回国人员的疟疾综合防制对策,为进一步加强我市的疟疾防制工作提供科学依据。方法对我市某高新企业赴疟疾高度流行区外派人员进行出国前健康教育、出国间药物预防和回国后健康排查并对该防制对策的效果进行分析研究。结果在疟疾相关知识健康教育前后,涉外员工的教育依从性和疟疾相关知识水平有显著提高,其中问卷回收率(χ2=21.024,ν=1,P<0.001)、疫区知识正确性(χ2=21.213,ν=1,P<0.001)和态度行为正确性(χ2=15.142,ν=1,P<0.001)增高明显。被干预人员的预防药物使用率逐年上升,疟疾发病率维持在较低水平。疟疾快速筛查方法与病原学检查结果符合率高,有助于病例的早期诊断和治疗。结论深圳市针对从疟疾高度流行区回国人员的疟疾防制对策为我市和其他涉外交流频繁地区的疟疾防制提供了重要的工作经验。 耿艺介 高世同 黄达娜 李晓恒 张仁利关键词:疟疾 高度流行区 弓形虫致密颗粒蛋白GRA8截短型片段在原核中的表达 被引量:1 2005年 目的构建弓形虫GRA8原核重组表达质粒,分析其表达状况。方法采用PCR技术扩增GRA8及其截短型片段的基因序列,经克隆后,亚克隆至原核表达载体中,构建GRA8及其截短型片段的重组表达质粒,分析GRA8的表达;将各重组菌进行诱导,将裂解上清用谷胱甘肽-琼脂糖亲合层析法和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)纯化目的蛋白,免疫印迹法(Westernblotting)分析纯化蛋白的活性。结果GRA8基因被正确插入原核表达质粒中,原核重组表达质粒在大肠埃希菌JM109中表达GRA8的水平低,几乎无完整GRA8的表达,截短型GRA8经谷胱甘肽-琼脂糖亲合层析法和SDS-PAGE获得纯化。纯化的截短型GRA8能被弓形虫感染兔血清识别。结论GRA8的原核重组表达质粒表达GRA8的水平低,纯化的截短型GRA8具一定的抗原反应性。 袁仕善 吴少庭 张仁利 高世同 黄达娜 余新炳关键词:弓形虫 致密颗粒蛋白 CYP4G19基因表达水平对德国小蠊耐药性的影响 2010年 目的通过对细胞色素P450家族CYP4G19基因在德国小蠊耐药株和敏感株中表达水平的研究,初步探讨CYP4G19基因与德国小蠊耐药性的关系。方法用广口瓶内采用药膜接触法测定野生株和敏感株德国小蠊的耐药指数,RT-PCR比较野生株和敏感株德国小蠊CYP4G19基因表达,RNAi沉默德国小蠊CYP4G19基因,免疫组织化学法测定CYP4G19蛋白表达。结果深圳市现场采集野生性德国小蠊,用广口瓶药膜法测得其抗性指数为3.88,其抗药性显著高于敏感株(P<0.01);野生株CYP4G19 mRNA表达水平比敏感株显著上调(P<0.01);野生株CYP4G19基因沉默后CYP4G19蛋白表达明显下降,但仍然具有一定的抗药性。结论深圳市德国小蠊野生株对"家虫清"产生了一定的抗药性,对菊酯类杀虫剂产生抗药性的德国小蠊CYP4G19基因的转录、翻译表达水平均有上调。 张起文 赵霞 黄达娜 耿艺介 高世同 李晓恒 张仁利关键词:德国小蠊 细胞色素P450 RNA干扰 深圳市2014年登革热流行病学和病原学特征研究 目的研究深圳市2014年登革热疫情的流行病学特征,分析流行毒株的分子进化特征,为今后登革热的防控提供科学指导。方法采用描述性流行病学方法分析2014年深圳市登革热疫情,分别采用胶体金免疫层析法和荧光PCR检测疑似登革热患... 阳帆 王敬忠 吴春利 黄达娜 李玥 满云翔 李瑞敏 唐屹君 张仁利关键词:登革病毒 E基因 进化分析 文献传递 重组弓形虫GRA8的表达及其诱导的免疫应答 目的表达利纯化弓形虫 RH 株 GRA8的截短型片段,分析其诱导的免疫应答。方法从重组克隆 pMD18-GRA8中切取 GRA8的插入片段,亚克隆至原核表达质粒 pET-23a(+)中,转化大肠杆菌 BL21,PCR 和... 袁仕善 吴少庭 张仁利 高世同 黄达娜 余新炳关键词:弓形虫 致密颗粒蛋白 纯化 免疫应答 文献传递 深圳市楼村华支睾吸虫综合干预措施效果评估 被引量:1 2010年 目的评价实施预防肝吸虫感染健康教育、鱼塘上厕所改造和淡水鱼感染肝吸虫囊蚴的监测等措施对阻断和控制华支睾吸虫病在深圳市楼村传播和流行的影响。方法项目实施前对全村6~65岁村民用血清ELISA方法筛查肝吸虫感染,对血清学检查阳性者,进行粪便病原学检查;被检者同时进行问卷调查与华支睾吸虫感染相关的行为方式,收集基本资料;项目实施中对同一目标人群实施了预防肝吸虫感染的健康教育,对生食淡水鱼生的人群进行干预,主要淡水鱼市场每年进行两次肝吸虫囊蚴感染的检测,同时对鱼塘上的厕所进行改建。结果通过两年的综合干预项目实施,楼村肝吸虫的感染率从4.75%(70/1473)下降到3.2%(47/1468);淡水鱼肝吸虫囊蚴的感染率从21.9%(38/173)下降到11%(22/200);沼螺肝吸虫尾蚴的感染率从1.6%(6/358)下降到0.9%(5/530);村民对预防肝吸虫感染的知晓率从54%提高到95%。结论预防肝吸虫感染的综合措施能够显著降低肝吸虫的感染,提高居民预防肝吸虫感染知识,对控制深圳市楼村肝吸虫病流行起到了决定性的作用。 彭朝琼 耿艺介 黄达娜 高世同 李晓恒 张仁利关键词:华枝睾吸虫 流行病学调查 深圳市2007~2010年疟疾流行特征分析 被引量:4 2012年 目的分析深圳市近4年疟疾流行的特点,为科学制订防制策略提供依据。方法收集全市血检监测及疟疾发病资料,用描述流行病学方法分析疟疾病例在时间、地区和人群中的分布特点。结果 2007~2010年疟疾发病数为134例,平均年发病率为0.037/万;输入性疟疾病例为82例,占总病例数的61.2%;按地区分,报告病例数前三位依次是罗湖、宝安和龙岗区,分别为49、33和28例,南山、福田和盐田区分别为15、7和2例;病例主要集中在20~40岁年龄组,占总病例数的59.7%(80/134);发病时间动态分布显示每年的6~8月为发病的高峰期;往来非洲、东南亚等疟疾高发地区的商务人员和从事野外作业的低收入群体为高危人群。结论深圳市本地疟疾疫情基本稳定,输入性疟疾的增加对深圳市的疟疾发病水平产生一定影响,应作为今后疟疾防治工作的重点。 高世同 谢旭 李晓恒 耿艺介 黄达娜 张仁利关键词:疟疾 深圳市境外输入性疟疾病例特征分析 被引量:7 2009年 目的分析深圳市境外输入性疟疾病例特征,为其科学防治提供参考依据。方法收集2007~2008年输入性疟疾病例资料,以描述流行病学的方法分析其特点;采用镜检法、Opti^MAL免疫层析法和PCR三种检测方法核实诊断并进行虫株鉴定。结果24例输入性病例,年龄介于21~55岁,男性23例,女性1例;其中3例为外国籍,其余为深圳外出从事商务回国人员;按输入来源地区:非洲21例,东南亚3例;输入病例主要集中在12月、1月和2月,合计13例,占总病例数的54%;镜检结果显示:16例为恶性疟,间日疟4例,未分型4例;以OptiMAL免疫层析法和PCR法核实鉴定,4例未分型者均为恶性疟,1例间日疟为恶性疟,1例间日疟为间日疟和恶性疟混合感染。结论深圳境外输入性疟疾病例以深圳外出疟疾高发地区回国人员为主,且多为恶性疟;OptiMAL免疫层析法和PCR法对于疟疾病例的核实鉴定具有积极的辅助作用。 喻东海 高世同 张仁利 耿艺介 黄达娜 李晓恒 刘国栋关键词:病例分析