[目的]探究shRNA靶向敲低Cx43基因表达对人多发性骨髓瘤细胞株MM.1S生存的影响及其机制。[方法]针对Cx43 mRNA不同位点构建sh/Cx43-1、sh/Cx43-2、sh/Con重组质粒,感染体外培养的MM.1S细胞,RT-PCR或Western Blotting检测Cx43 mRNA或蛋白表达,CCK-8、流式细胞术检测细胞增殖、凋亡情况,Western Blotting检测磷脂酸肌醇-3-激酶(PI3K)、丝苏氨酸蛋白激酶(AKT)通路蛋白表达。[结果]sh/Cx43-1组、sh/Cx43-2组Cx43 mRNA或蛋白均低于sh/Con组,且sh/Cx43-1组低于sh/Cx43-2组(0.18±0.05 vs 0.75±0.07,0.21±0.03 vs 0.81±0.06,P<0.05);培养24h时各组细胞增殖水平无明显差异(P>0.05),培养48 h、72 h时sh/Cx43-1组、sh/Cx43-2组细胞增殖水平均低于sh/Con组(0.42±0.05 vs 0.58±0.09,1.02±0.10 vs 1.08±0.13,P<0.05);sh/Cx43-1组、sh/Cx43-2组细胞总凋亡率高于sh/Con组,PI3K、AKT蛋白表达均低于sh/Con组,且sh/Cx43-1组变化较sh/Cx43-2组更明显(P<0.05)。[结论]通过shRNA靶向敲低Cx43基因表达能显著抑制MM.1S细胞增殖,促进其凋亡,这可能与敲低Cx43后PI3K/AKT通路受到抑制有关。
【目的】探讨免疫联合化疗对多发性骨髓瘤(MM)患者外周血T、B淋巴细胞及调节性T细胞(Tregs)水平的影响。【方法】本院收治的MM患者60例,采用数字随机对照表分为两组,每组各30例;对照组给予DC-CIK免疫治疗+化疗,对照组仅给予化疗,评估两组临床疗效,观察两组T淋巴细胞、Tregs水平、B细胞、浆细胞比例水平变化;随访1年,比较两组复发率。【结果】观察组治疗有效率为53.33%(i6/30)显著高于对照组26.67%(8/30),1年复发率为6.67%(2/30)显著低于对照组30.0%(9/30),且差异有显著性(P〈0.05)。观察组治疗后CD4+T淋巴细胞比例、CD4+/CD8+T淋巴比值显著高于对照组,CD8+T淋巴细胞比例显著低于对照组,且差异有显著性(P〈0.05)。观察组治疗后CD4+CD25+Tregs、CD4+CD25 high Tregs显著低于对照组,且差异有显著性(P〈0.05)。观察组治疗后B细胞比例高于对照组,浆细胞比例低于对照组,且差异有显著性(P〈0.05)。【结论】DCcIK免疫治疗+化疗能够改善MM患者免疫功能紊乱症状,降低浆细胞比例,提高临床疗效。