魏薇
- 作品数:14 被引量:35H指数:3
- 供职机构:安徽医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金安徽高校省级自然科学研究基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学一般工业技术自动化与计算机技术更多>>
- 抗呼吸道合胞病毒融合蛋白单链抗体的筛选及初步鉴定
- 2009年
- 目的:从大容量噬菌体抗体库中筛选人源性抗呼吸道合胞病毒F蛋白的单链抗体。方法:以RSV F蛋白为靶抗原,通过"吸附-洗涤-洗脱-扩增"过程从天然人源性噬菌体抗体库中筛选特异性抗F蛋白单链抗体。5轮筛选后,单克隆经ELISA检测,阳性克隆进行核酸序列分析,并将阳性克隆噬菌体感染E.coliHB2151,经IPTG诱导,制备抗RSV F蛋白的可溶性单链抗体,并进行Western blot及Dot blot分析。结果:经过筛选,获得了18株能与F蛋白特异性结合的阳性克隆,取OD值最高的克隆E4经测序并检索Kabat数据库分析,显示其基因与人免疫球蛋白可变区基因具有高度同源性,Western blot及Dot blot分析表明为单链抗体。结论:利用天然人源性噬菌体抗体库技术制备出高特异性的人源性抗RSV F蛋白单链抗体。
- 魏薇包福祥何金生付远辉王小波郑娴娴张莹
- 关键词:人呼吸道合胞病毒F蛋白噬菌体抗体库单链抗体
- 孤独症儿童尿液代谢组学筛查指标的初步建立
- 目的:通过检测和分析孤独症儿童与正常儿童尿液代谢成分,寻找孤独症儿童尿液特异性代谢产物,初步建立孤独症儿童尿液代谢组学筛查指标,为孤独症的早期筛查诊断提供实验依据。 方法:应用核磁共振光谱技术和模式识别方法,分析40例...
- 魏薇
- 关键词:孤独症儿童患者代谢组学筛查指标
- 文献传递
- 神经网络的可靠性设计与研究
- 魏薇
- 链脲佐菌素诱导小鼠B细胞可抑制MIN-6细胞分泌胰岛素并促进胰岛素自身抗体的产生被引量:1
- 2015年
- 目的探讨链脲佐菌素(STZ)诱导小鼠后B淋巴细胞对自身免疫性糖尿病发展的作用。方法以低剂量STZ诱导ICR小鼠,建立小鼠自身免疫性糖尿病模型,采用放射免疫法和ELISA分别检测胰岛素和胰岛素自身抗体,判断模型的诱导情况;以CD19磁珠分选STZ诱导的小鼠以及正常小鼠外周血B淋巴细胞,通过流式细胞术检测磁珠分选情况;以PBS处理的MIN-6细胞为空白对照组(A组),以正常小鼠B细胞和MIN-6细胞共培养为B组,以经20μg/m L脂多糖(LPS)预处理的正常小鼠B细胞和MIN-6细胞共培养为C组,以STZ诱导小鼠后的B细胞与MIN-6细胞共培养为D组,通过SYBRGreen染料实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、放射免疫法分别检测处理后的胰岛素mRNA及其蛋白表达情况,并通过ELISA检测胰岛素自身抗体水平以及转化生长因子β(TGF-β)水平。结果与A组相比,STZ诱导组小鼠体质量减少、血糖升高、血清中胰岛素含量降低、胰岛素自身抗体升高;通过免疫磁珠分选,以流式细胞仪检测的结果显示,CD19+B细胞所占比例达到98%;与A组及B相比,C组和D组中MIN-6细胞胰岛素mRNA水平以及共培养上清中胰岛素水平均降低,并且胰岛素自身抗体和TGF-β的表达均增加。结论 STZ诱导的自身免疫性糖尿病小鼠模型的B淋巴细胞可能通过增加胰岛素自身抗体的产生来抑制胰岛MIN-6细胞产生胰岛素。
- 秦嫚徐琴汪平唐倩孙静茹魏薇黄保军
- 关键词:链脲佐菌素B淋巴细胞胰岛素胰岛素自身抗体
- 免疫学课堂教学形式及方法初探被引量:5
- 2009年
- 李群魏薇张林杰
- 关键词:免疫学课堂教学形式
- 提高免疫学实验课教学效果探讨被引量:1
- 2008年
- 魏薇
- 关键词:教学效果理论课教学医学免疫学
- 人呼吸道合胞病毒M蛋白非复制型重组腺病毒的构建和鉴定被引量:2
- 2008年
- 人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,RSV)基质蛋白(matrix protein,M)在RSV形态发生上具有重要作用,因含有CTL及CD4+T细胞抗原表位,在疫苗研究上具有一定意义。为此,应用RT-PCR方法从感染RSV的HEp-2细胞中扩增获得M蛋白基因,构建了含M基因的非复制型重组腺病毒并进行表达和鉴定。基因序列分析显示RSV M基因仅有一处碱基发生错义突变。获得的非复制型重组腺病毒FGAd/RSVM感染293细胞,观察到细胞出现CPE,RT-PCR发现M基因有转录,Western blotting及间接免疫荧光分析检测到M蛋白。成功克隆A亚型RSV Long株M基因,并获得一株可表达A亚型RSV M蛋白的非复制型重组腺病毒FGAd/RSVM,可用于体内研究观察其免疫效果及免疫保护作用。
- 尚智何金生张梅虞结梅陆燕燕谢灿唐倩魏薇
- 关键词:人呼吸道合胞病毒M蛋白
- 呼吸道合胞病毒分泌型融合蛋白的真核表达和纯化
- 2009年
- 目的研究人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial viruse,RSV)分泌型融合蛋白(secreted fusion protein,sV)基因在杆状病毒中的表达及纯化。方法根据编码F蛋白的基因序列设计引物,以PCR方法将F蛋白基因的跨膜区和胞质区核酸序列替换为6×His核酸序列,获得COOH’端带有His标签的重组SF-His蛋白编码基因,利用Bac—to—Bac杆状病毒表达系统,构建可表达sF蛋白的重组杆状病毒,用脂质体Cellfeetine reagent转染sf9细胞,实现sF在sf9细胞中的表达,Ni柱亲和层析纯化sF蛋白。结果成功获得了sF-His编码基因,构建的重组杆状病毒可高效表达sF,Ni-柱纯化后sF的浓度为1.084mg/ml,纯度达90%以上。结论杆状病毒系统是制备sF的有效方法,纯化的sF蛋白为RSV新型疫苗及单克隆抗体和诊断试剂等研究奠定了基础。
- 付远辉魏薇何金生郑娴娴王小波唐倩张梅屈建国洪涛
- 关键词:糖蛋白类
- 呼吸道合胞病毒融合蛋白人源性单链抗体的构建及初步鉴定
- 目的:人呼吸道合胞病毒(Human Respiratory Syncytial Virus,RSV)广泛分布于世界各地,是导致婴幼儿严重下呼吸道感染最重要的病毒病原。病毒感染机体后的免疫保护机制尚未明确,也无特异性防治方...
- 魏薇
- 关键词:人呼吸道合胞病毒F蛋白噬菌体抗体库单链抗体
- 文献传递
- 我国优势基因型弓形虫虫株致密颗粒蛋白15诱导人绒毛膜细胞JEG-3凋亡的机制研究
- 背景:刚地弓形虫(Toxoplasma gondii,Tg)是一种机会致病性的专性有核细胞内寄生原虫,猫科动物为终宿主,且在全球广泛传播,可以感染几乎所有温血动物。弓形虫感染宿主引起的弓形虫病有不同的临床表现,主要由弓形...
- 魏薇
- 关键词:刚地弓形虫JEG-3细胞内质网应激
- 文献传递