高钰
- 作品数：54 被引量：65H指数：6
- 供职机构：解放军第309医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项中国博士后科学基金更多>>
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- 人类白细胞抗原-G阳性的脐带间充质干细胞体外诱导调节性T细胞的实验研究
- 2018年
- 目的探讨人类白细胞抗原(HLA)-G阳性的脐带间充质干细胞在体外诱导调节性T细胞(Treg)产生的效果。方法从新生儿脐带中分离脐带间充质干细胞,采用脂质体转染的方式将PEGFP-N1-HLA-G质粒转染到脐带间充质干细胞中,设为PEGFP-N1-HLA-G组;转染空载体PEGFP-N1质粒的脐带间充质干细胞设为PEGFP-N1组;相同条件下,未加入空载体的脐带间充质干细胞设为空白对照组。采用流式细胞仪检测脐带间充质干细胞标志物;采用蛋白质免疫印迹法鉴定各组细胞HLA-G蛋白的表达;各组细胞与健康人外周血中CD4+T细胞混合培养24 h和48 h后,采用流式细胞仪检测CD4+CD25+Foxp3+Treg占全部T细胞的比例。结果脐带间充质干细胞CD45、CD34和HLA-DR呈阴性表达,CD29、CD44和CD105呈阳性表达;PEGFP-N1-HLA-G组可以表达HLA-G蛋白,与空白对照组和PEGFP-N1组比较差异均有统计学意义(均为P<0.01)。PEGFP-N1-HLA-G组细胞在与CD4+T细胞混合培养24 h后,CD4+CD25+Foxp3+Treg占全部T细胞的(15.3±1.9)%,在培养48 h后,CD4+CD25+Foxp3+Treg占全部T细胞的(14.3±2.1)%,与空白对照组和PEGFP-N1组比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论 HLA-G基因修饰后脐带间充质干细胞能够有效地在体外诱导CD4+CD25+Foxp3+Treg的产生。
- 白剑白剑肖漓林大勇苗兰英林大勇刘鸿高钰陈文毕丽丽孔祥瑞
- 关键词：脐带间充质干细胞免疫排斥CD4+T细胞
- 流式微球分析技术联合检测Cys C、NGAL方法的建立及其在肾移植术后CMV感染患者中的应用被引量：2
- 2016年
- 目的建立流式微球分析技术联合检测胱抑素(Cys)C和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)的方法,并初步研究两者在肾移植术后巨细胞病毒(CMV)感染患者血清中的含量变化。方法实验方法的建立包括检测微球包被的效果和稳定性,优化Cys C和NGAL的检测含量范围,确定生物素化抗体浓度,确定PE-链霉亲和素浓度,绘制标准曲线图确定相关系数。采用该法检测对照组(10名健康人)、CMV阴性组(10例肾移植术后CMV-pp65阴性患者)和CMV阳性组(20例肾移植术后CMV-pp65阳性患者)的血清Cys C和NGAL含量。结果成功建立流式微球分析技术联合检测Cys C和NGAL的方法。对照组、CMV阴性组和CMV阳性组的血清NGAL含量分别为8 759(1 465)pg/ml、10 472(856)pg/ml、12 817(4 533)pg/ml,依次升高且差异有统计学意义(P<0.001)。3组间Cys C比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论本实验建立流式微球分析技术联合检测Cys C和NGAL标准曲线的方法相关性和重复性良好,并初步验证NGAL含量在肾移植术后CMV感染中明显升高,提示肾移植术后CMV活动性感染可能对肾小管造成急性损伤。
- 马锡慧黄海燕高钰毕丽丽孔祥瑞刘一松肖漓石炳毅
- 关键词：肾移植中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白巨细胞病毒
- 流式细胞术在肾移植术后感染中的诊断价值被引量：6
- 2018年
- 目的探讨流式细胞术在肾移植术后感染中的诊断价值。方法根据术后影像学和实验室检查结果,将51例首次肾移植受体分为细菌组33例、真菌组9例、BK病毒组9例;另选择肾移植术后稳定的受体28例作为稳定组。采用流式细胞术分析各组受体外周血淋巴细胞亚群比例和绝对计数。比较各组肾移植受体的肾功能、外周血淋巴细胞亚群的比例及绝对计数;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析淋巴细胞亚群比例和绝对计数在肾移植术后感染性疾病中的诊断价值。结果与稳定组相比,细菌组、真菌组和BK病毒组血清肌酐(Scr)水平和血尿素氮(BUN)水平均有不同程度升高,差异均有统计学意义(P=0.035、0.007、0.024;0.037、0.006、0.032)。与稳定组比较,细菌组和真菌组CD16+CD56+自然杀伤(NK)细胞比例均下降(P=0.036、0.015);真菌组CD4+/CD8+T细胞比例明显下降(P=0.004)。与细菌组相比,真菌组和BK病毒组的CD3+CD8+T细胞比例均升高(P=0.013、0.008),CD3+CD4+T细胞比例均降低(P=0.003、0.010),CD4+/CD8+T细胞比例均明显下降(P=0.003、0.005)。与稳定组比较,细菌组、真菌组、BK病毒组CD3+T细胞数量、CD3+CD8+T细胞数量、CD16+CD56+NK细胞数量均明显降低(P=0.025、0.002、0.003;0.015、0.005、0.006;0.001、0.001、0.031);真菌组和BK病毒组CD3+CD4+T细胞数量降低(P=0.001、0.003);BK病毒组CD19+B细胞数量明显降低(P=0.019)。与细菌组比较,真菌组CD3+CD4+T细胞数量明显降低(P=0.023)。ROC曲线分析显示,CD3+CD4+T细胞和CD16+CD56+NK细胞数量诊断真菌感染的准确度较高,ROC曲线下面积分别为0.8492和0.8889;CD3+T细胞、CD3+CD4+T细胞和CD19+B细胞数量诊断BK病毒感染的准确度较高,ROC曲线下面积分别为0.8472、0.8452和0.8115。结论采用流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群可以评估患者机体免疫功能状态,绝对计数能够直观地判断免疫程度,两者结合对于肾移植受者感染性疾病的
- 马锡慧高钰韩永孙玉洁杜若刘培霞张文慧肖漓
- 关键词：肾移植BK病毒感染流式细胞术淋巴细胞亚群自然杀伤(NK)细胞
- 结核分枝杆菌Rv2190c DNA疫苗的构建及免疫原性研究
- 目的：构建结核分枝杆菌Rv2190c DNA疫苗,并评价其免疫原性.
方法：以基因H37Rv基因组为模板,PCR扩增Rv2190c基因,插入pGEM-T载体中,经酶切鉴定与序列测定证实后,再与真核表达载体pVA...
- 梁艳吴雪琼张晓燕白雪娟肖漓高钰张俊仙阳幼荣王兰史迎昌
- 关键词：结核分枝杆菌免疫原性
- 文献传递
- 西罗莫司对肝移植术后外周血Breg和Treg的影响
- 宋继勇杜国盛朱志东高钰封立魁石炳毅
- 白细胞介素-35对肝癌细胞株HepG2增殖和迁移能力的影响被引量：2
- 2017年
- 目的探讨白细胞介素-35（IL-35）对肝癌细胞株HepG2增殖活性、迁移和侵袭能力的影响。方法采用酶联免疫吸附法（ELISA）法检测肝细胞癌（HCC）患者和正常体检者外周血IL-35含量；CCK-8法检测外源性IL-35在体外对肝癌细胞增殖活性的影响；Transwell侵袭和划痕实验检测外源性IL-35对肝癌细胞侵袭和迁移能力的影响。结果IL-35在HCC患者外周血的IL-35含量[（i18．45±28．66）ng／L]显著高于健康体检者外周血[（39．56±11．15）ng/L，P〈0．05]；加入外源性人重组IL-35可以显著促进HepG2细胞的增殖活性、侵袭和迁移能力（P〈0．05）。结论IL-35具有促进肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的生物学特性。
- 王海明刘浩润肖漓赵洪强高钰崔洪涛李为民
- 关键词：肝细胞癌增殖活性迁移
- 巨细胞病毒感染肾移植受者红细胞表面分子CD35、CD58、CD59表达的变化
- 2016年
- 目的探讨巨细胞病毒(CMV)感染肾移植受者红细胞膜表面分子CD35、CD58、CD59表达的变化规律及其意义。方法选择同种异体肾移植术的受者82例,根据外周血CMV-pp65抗原检测定性结果将其分为CMV阴性组(21例)和CMV阳性组(61例),再根据CMV-pp65(+)白细胞计数结果将活动性CMV阳性组分为低活动性感染亚组(55例)和高活动性感染亚组(6例);另外选取健康成人志愿者作为健康对照组(30名)。采用流式细胞术检测CMV-pp65抗原和红细胞膜表面分子CD35、CD58、CD59的表达情况。结果与健康对照组比较,CMV阳性组的肾移植受者红细胞表面分子CD35、CD58、CD59表达水平降低,CMV阴性组的CD35和CD59表达水平降低(均为P<0.05);与CMV阴性组比较,CMV阳性组的红细胞表面分子CD58和CD59表达水平明显降低(均为P<0.05)。高活动性感染亚组的红细胞表面分子CD35和CD59表达水平均低于低活动性感染亚组(均为P<0.05)。结论肾移植术后CMV活动性感染的程度越严重,患者红细胞表面免疫分子CD35、CD58、CD59的表达越低,提示红细胞免疫功能紊乱可能参与了CMV活动性感染。
- 孔祥瑞肖漓陈文樊文梅白剑高钰马锡慧毕丽丽石炳毅
- 关键词：活动性感染红细胞CD35CD58CD59
- 地奥司明对肾缺血/再灌注大鼠肾组织PECAM-1表达的影响被引量：1
- 2013年
- 目的观察地奥司明(diosmin,DOSM)对肾缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)大鼠肾组织PECAM-1表达水平的影响,并探讨其对肾脏的保护机制。方法 150只SD大鼠随机分成3组:假手术(sham operation,SO)组、肾缺血/再灌注模型组(I/R)和地奥司明+肾缺血/再灌注模型组(DOSM+I/R)。在再灌注不同时间点分别采用免疫组化及Western免疫印迹方法测定肾脏组织中PECAM-1的表达水平。结果在1 h、6 h、12 h、24 h和48 h不同时间点的肾组织中,I/R和DOSM+I/R两组PECAM-1的表达水平均随时间逐渐上调,并于48 h达最高。而在DOSM组显著低于I/R组(P<0.05或P<0.01)。Western免疫印迹与免疫组织化学检测结果基本一致。结论 DOSM可显著降低肾I/R病理过程中PECAM-1的表达,有助于减轻I/R时炎性细胞的浸润,从而减轻缺血再灌注损伤,保护肾功能。
- 袁铭韩勇肖漓许晓光高钰钱叶勇石炳毅
- 关键词：地奥司明肾缺血再灌注血小板内皮细胞黏附分子-1
- γ-氨基丁酸及其受体调控CD8^+T细胞活化
- 2017年
- 目的探讨γ-氨基丁酸(GABA)及受体对CD8^+T细胞增殖能力的影响。方法采用CD8^+T细胞磁珠分选试剂盒分选Balb/c小鼠脾脏的CD8^+T细胞;在CD3/CD28活化磁珠的作用下,以不同浓度的GABA刺激CD8^+T细胞,通过5-溴脱氧尿苷(Brd U)标记和流式细胞术检测CD8^+T细胞的增殖情况;通过实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)比较CD8^+T细胞活化前后GABA-A、GABA-B受体的表达。结果流式检测结果显示,GABA可抑制已活化的CD8^+T细胞的增殖,表现为CD152^+CD8^+T细胞明显减少;实时荧光定量PCR结果显示,仅在CD8^+T细胞活化时表达的GABA-A受体亚型为α2、α6和GABA-B受体亚型为1a;CD8^+T细胞活化后有明显增加的GABA-A受体亚型有α3、α5、β2、β3、γ1、γ2和θ,而GABA-B2R和GABA-B1b则在活化前和活化后均无表达。结论GABA可抑制已活化的CD8^+T细胞的增殖,其活化受GABA相关受体所调节,但其具体机制还有待于进一步探讨。
- 樊文梅高钰孙玉洁马锡慧何秀云肖漓石炳毅
- 关键词：Γ-氨基丁酸移植免疫T细胞活化CD152
- γ-氨基丁酸及其受体调控CD8+T细胞活化
- 目的:γ-氨基丁酸(GABA)是中枢神经系统最重要的抑制性神经递质之一。近年来的研究显示,GABA在细胞增殖、免疫调节等方面均具有重要功能影响。本研究旨在了解GABA对CD8~+T细胞增殖能力的影响。方法:通过美天旎CD...
- 樊文梅肖漓高钰孙玉洁马锡慧何秀云石炳毅
- 关键词：Γ-氨基丁酸受体
- 文献传递
