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人永生化表皮细胞HaCaT电转染条件的优化被引量：4: 2014年; 目的比较不同电转染条件下,人永生化表皮细胞HaCaT的转染效率,探讨影响HaCaT电转染率和存活率的主要因素,筛选出HaCaT细胞最佳的电转染条件。方法应用电穿孔仪,设定不同的电压(180、360、540、720V)、脉冲时间(40、60、80、100、120μs)、脉冲周期(1、2、3、4、5次)和温度(室温和4℃)等条件,将质粒(pGPU6/GFP/nev)电转染至HaCaT细胞。电转染24h后,荧光镜下和光镜下分别计算绿色荧光阳性细胞数和总细胞数,并随机取3个视野算平均值,计算电转染率;MTT法检测电转染后细胞的存活率。结果当HaCaT细胞浓度为1.5×106/mL,pGPU6/GFP/nev质粒浓度为2.0μg/mL,HaCaT细胞的最佳电转染条件为540V/60μs/Pulse1/RT,此时细胞生长状态最佳,电转染率可达到33.23%,细胞存活率为61.22%。结论本实验优化了HaCaT细胞电转染的最佳条件,提高了HaCaT细胞电转染效率,为后续基因功能的研究奠定了基础。; 徐珊杜冲马艳民谢宏俊高杨石琦王新阳贺大林郭鹏; 关键词：HACAT 电转染

Nature:膀胱肿瘤的全面分子鉴定: 2014年; 膀胱尿路上皮肿瘤是常见的恶性肿瘤,每年在全世界导致大约15万例死亡;但目前尚没有治疗这种肿瘤的靶向药物被批准.近日,癌症基因组图谱（TCGA）研究团队在Nature杂志公布了他们对131例高级别肌层浸润性膀胱肿瘤的各种分子变化进行的整合研究,希望能为膀胱肿瘤的治疗提供潜在的靶向位点（The Cancer Genome Atlas Research Network,Nature,2014,507：315-322）.; 高杨郭鹏; 关键词：浸润性膀胱肿瘤分子鉴定膀胱尿路上皮肿瘤基因组图谱 ATLAS 分子变化

尿液中多基因启动子甲基化联合检测诊断膀胱癌的研究被引量：1: 2014年; 目的探索一种更加有效的通过尿液细胞中多基因甲基化分析诊断膀胱癌的方法。方法应用甲基化特异性PCR(MSP)技术检测37例膀胱癌患者和31例非膀胱癌对照患者尿液中P14、RASSF1A、SLIT2、RASAL1基因启动子区的甲基化状态。结果尿液细胞中通过P14、RASSF1A、SLIT2、RASAL1基因启动子区的甲基化状态检测膀胱癌的敏感性分别为75.7%、75.7%、62.2%、37.8%,与此相对它们的特异性为77.4%、90.3%、90.3%、93.5%。当4个基因中只有一个出现甲基化就诊断为膀胱癌时的敏感性为89.2%。结论膀胱癌患者尿液中多基因甲基化联合分析可能是一种高效的诊断膀胱癌的方法。; 王晨青高杨寇博石琦杜冲徐珊王新阳贺大林郭鹏; 关键词：膀胱肿瘤 DNA甲基化

FGFR2IIIc在膀胱癌化疗耐药细胞株中的表达及意义被引量：1: 2014年; 目的探讨成纤维细胞生长因子受体2(FGFR2)的剪切突变体FGFR2Ⅲc对多柔比星耐药的膀胱癌细胞间质-上皮转化的调节作用。方法通过浓度递增法建立人膀胱癌253J细胞系的多柔比星耐药253J/DOX细胞株。分别用MTT实验、Western blot法和实时定量PCR(qRT-PCR)比较253J细胞和253J/DOX细胞对多柔比星的敏感性、P-糖蛋白表达水平和FGFR2Ⅲc表达水平的差异。Western blot法检测253J细胞和253J/DOX细胞E-cadherin和vimentin表达。划痕愈合实验比较253J细胞和253J/DOX细胞迁移能力的差异。结果与亲代细胞相比,253J/DOX细胞P-糖蛋白表达上调并对多柔比星明显耐药(P<0.05)。FGFR2Ⅲc mRNA在253J/DOX细胞的表达明显高于253J细胞。同时,与亲代细胞相比,253J/DOX细胞E-cadherin表达上调,vimentin表达下调,体外迁移能力下降。结论 FGFR2Ⅲc在化疗耐药的膀胱癌细胞表达上调,可能通过诱导间质-上皮转化促进肿瘤迁移灶形成。; 陈玉乐张林琳吴开杰曾津高杨王新阳李宏宏张心湜贺大林; 关键词：膀胱癌化疗耐药迁移

一种前列腺捥除镜: 本发明属于医疗器械技术领域，具体的说是一种前列腺捥除镜；包括导向插管；导向插管内螺纹连接有螺纹管螺纹，且螺纹管内固定有支撑管；支撑管的圆周内壁插接有医用拉绳；螺纹管的外壁螺纹连接有螺纹转盘，且螺纹转盘的端面通过转动环转动...; 梁亮高杨; 文献传递

一种前列腺捥除镜: 本发明属于医疗器械技术领域，具体的说是一种前列腺捥除镜；包括导向插管；导向插管内螺纹连接有螺纹管螺纹，且螺纹管内固定有支撑管；支撑管的圆周内壁插接有医用拉绳；螺纹管的外壁螺纹连接有螺纹转盘，且螺纹转盘的端面通过转动环转动...; 梁亮高杨; 文献传递

RAMP2参与膀胱癌进展的机制研究: 2020年; 目的探讨受体活性调节蛋白2(RAMP2)参与膀胱癌进展的潜在分子机制。方法从TCGA数据库获得人膀胱癌组织mRNA表达谱,并将标本分成高表达和低表达RAMP2两组,通过基因富集分析(GSEA)探讨RAMP2参与膀胱癌进展的可能分子机制;通过对人膀胱癌组织中关键分子的免疫组织化学染色验证上述分析结果。结果GSEA分析结果表明上皮细胞间质转化(EMT)相关基因于RAMP2高表达组织富集。通过免疫组织化学对RAMP2及EMT标志蛋白E-钙黏素(E-cadherin)、N-钙黏素(N-cadherin)进行染色后发现,E-cadherin低表达及N-cadherin高表达均可预示膀胱癌患者不良预后,N-cadherin在膀胱癌组织中的表达与RAMP2表达具有相关性。结论RAMP2可能通过N-cadherin促进膀胱癌恶性进展。; 宦梦溪高杨王宇钊杨文杰吕伟陈玉乐; 关键词：膀胱癌上皮细胞间质转化预后

酰基缩肽1经SHH通路下调Gli和Bcl-2表达诱导肾癌细胞凋亡被引量：3: 2014年; 目的探讨酰基缩肽1(ADEP1)对肾癌细胞凋亡及SHH信号通路相关蛋白Gli-1和Bcl-2表达的影响。方法 50μmol/L ADEP1处理肾癌ACHN细胞和769-P细胞48 h,采用光学显微镜观察细胞凋亡的细胞形态学和细胞核形态变化,MTT法检测细胞增殖,实时定量PCR(qRT-PCR)检测SHH信号通路SHH和Gli-1 mRNA的表达,Western blot法检测Gli-1和Bcl-2蛋白的表达。结果 ADEP1可诱导肾癌细胞发生凋亡,降低SHH和Gli-1 mRNA表达,以及Gli-1和Bcl-2蛋白的表达。结论ADEP1可通过抑制SHH信号通路相关蛋白表达,诱导肾癌细胞发生凋亡。; 徐珊杜冲马振坤高杨石琦王新阳张海龙贺大林郭鹏; 关键词：肾癌细胞凋亡 SHH BCL-2

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高杨