韩雪洁
- 作品数：10 被引量：2H指数：1
- 供职机构：内蒙古大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 一种增强牛胚胎干细胞的多能性和代谢活力的培养体系和培养方法
- 本发明公开了一种增强牛胚胎干细胞的多能性和代谢活力的培养体系和培养方法。涉及细胞生物学和分子生物学技术领域。包括MEF、TeSR<Sup>TM</Sup>‑E5/E6 Basal Medium、TeSR<Sup>TM</...
- 李雪玲许文强张晖郝瑞峰李琛韩雪洁
- 一种提高牛胚胎干细胞多能性的方法
- 本发明提供一种提高牛胚胎干细胞多能性的方法，包括向牛胚胎干细胞体外培养体系中添加终浓度为10‑40μg/mL的抗肿瘤药物naringenin进行维持培养。通过多能性检测，结果表明naringenin可显著增强牛胚胎干细胞...
- 李雪玲李琛韩雪洁相金柱岳永莉
- 文献传递
- 牛滋养层干细胞的培养与鉴定
- 在哺乳动物胚胎发生过程中滋养层细胞的分化是首次分化事件,对胎盘的形态和生理起着重要作用.利用含有两个小分子抑制剂的培养系统，成功地从牛体外受精囊胚获得牛滋养层干细胞样细胞.这些细胞可以在添加B27,N2,Glutamax...
- 黄翔华韩雪洁乌云毕力格云亭赵宇航李荣风李雪玲
- 关键词：胚胎发育滋养层细胞体外分化
- 文献传递
- 提高牛体外胚胎制备效率的方法
- 本发明提供一种提高牛体外胚胎制备效率的方法，包括牛卵母细胞的体外采集、卵丘‑卵母细胞复合体的体外成熟培养、牛卵母细胞的体外受精以及体外发育培养等步骤。其中，体外发育培养所使用的培养液中含有0.01‑70μM的C<Sub>...
- 李雪玲韩雪洁王晨周正伟
- 文献传递
- 猪体细胞转人凝血因子IX和hfat-1基因的研究
- 猪在解剖学,神经生物学、心脏血管、胃肠道和基因组方面与人相似,因此在研究人类疾病时,猪被认为是更好的动物模型,还可作为异种器官移植的供体。由于异种器官移植的深入研究,又将转基因猪的研究推向一个新的高峰。本研究构建两种表达...
- 韩雪洁
- 关键词：CRE重组酶
- 文献传递
- 一种增强牛胚胎干细胞的多能性和代谢活力的培养体系和培养方法
- 本发明公开了一种增强牛胚胎干细胞的多能性和代谢活力的培养体系和培养方法。涉及细胞生物学和分子生物学技术领域。包括MEF、TeSR<Sup>TM</Sup>‑E5/E6 Basal Medium、TeSR<Sup>TM</...
- 李雪玲许文强张晖郝瑞峰李琛韩雪洁
- 猪体细胞转入凝血细胞因子Ⅸ和hfat-1基因的研究
- 猪在解剖学，神经生物学、心脏血管、胃肠道和基因组方面与人相似，因此在研究人类疾病时，猪被认为是更好的动物模型，还可作为异种器官移植的供体。由于异种器官移植的深入研究，又将转基因猪的研究推向一个新的高峰。本研究构建两种表达...
- 韩雪洁
- 关键词：CRE重组酶
- 文献传递
- 人凝血因子Ⅸ乳腺特异表达载体的构建及细胞转染被引量：1
- 2014年
- 【目的】人凝血因子Ⅸ(human coagulation factorⅨ,hFIX)是凝血过程中的关键因子,对临床治疗血友病有着极其重要的意义。研究旨在构建人凝血因子Ⅸ乳腺表达载体,在猪乳腺上皮细胞中验证其乳腺特异表达能力,获得hFIX转基因雌性乳腺上皮细胞和猪胎儿成纤维细胞,为克隆乳腺特异表达人凝血因子Ⅸ的转基因猪做准备。【方法】按照TaKaRa公司RNAiso Reagent和Prime Script RT-PCR试剂盒的说明书,从人胎儿肝脏中提取RNA并扩增出人凝血因子Ⅸ(human coagulation factorⅨ,hFIX)cDNA序列,利用PCR方法扩增牛生长激素(BGH)polyA序列,将hFIX的cDNA序列与BGH polyA序列分别连接到表达载体pbCSN2-RC的牛酪蛋白(CSN2)启动子之后,构建带有新霉素抗性和红色荧光蛋白双筛选标记的乳腺特异性表达载体pbCSN2-hFIX-pA-RC。取本地屠宰的泌乳期猪乳房组织,利用组织块种植法培养猪乳腺细胞,并通过控时消化分离纯化猪乳腺上皮细胞,进行染色体分析后,挑选含有正常染色体数目的细胞,通过脂质体法将表达载体导入,经过G418筛选获得稳定表达红色荧光蛋白的转基因细胞,反转录、实时定量PCR验证乳腺表达载体构建的合理性和有效性。为了只对雌性胎儿成纤维细胞进行转基因操作,首先对培养的猪胎儿成纤维细胞进行SRY基因PCR扩增,确定其性别。之后,利用脂质体将证明有效的表达载体导入细胞,并进行G418和红色荧光蛋白表达筛选,对经过鉴定的阳性细胞进行扩大培养和冷冻保存,为下一步的体细胞克隆做准备。【结果】经PCR和酶切鉴定,人凝血因子ⅨcDNA和BGH PolyA成功克隆到载体pbCSN2-RC中,获得具有双筛选标记的pbCSN2-hFIX-pA-RC。转染后G418和红色荧光蛋白表达阳性的猪乳腺上皮细胞,经实时定量PCR鉴定,hFIX有高效表达,证明所构建载体具有指导人FIX在乳腺特异表达的能力,可以用于生产乳腺特异表达的动物。将构建�
- 韩雪洁萨日娜梁浩李雪玲李荣凤
- 关键词：人凝血因子IX转染
- 一种提高牛胚胎干细胞多能性的方法
- 本发明提供一种提高牛胚胎干细胞多能性的方法，包括向牛胚胎干细胞体外培养体系中添加终浓度为10‑40μg/mL的抗肿瘤药物naringenin进行维持培养。通过多能性检测，结果表明naringenin可显著增强牛胚胎干细胞...
- 李雪玲李琛韩雪洁相金柱岳永莉
