韦连登
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：广西医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 癌睾丸抗原OY-TES-1氨基端截短蛋白的基因克隆、表达及纯化
- 目的:构建OY-TES-1氨基端截短蛋白/(OY-TES-1-N/)重组质粒、体外表达OY-TES-1-N蛋白,对表达产物进行纯化和鉴定,为OY-TES-1后续研究奠定基础。
方法:/(1/)提取人睾丸组织总R...
- 韦连登
- 关键词：OY-TES-1融合蛋白克隆纯化
- 文献传递
- 肿瘤睾丸抗原OY-TES-1氨基端截短蛋白及其多克隆抗体的制备被引量：1
- 2011年
- 目的获得原核表达的OY-TES-1氨基端截短蛋白(OY-TES-1-N),并制备其多克隆抗体。方法扩增编码OY-TES-1-N 268个氨基酸(A6-R273)的cDNA序列;将PCR产物插入原核表达载体pMAL-C2,构建重组质粒,并转化DH5α菌;通过蓝白斑筛选、DNA测序筛出阳性菌;在优化条件下用IPTG对阳性菌进行诱导表达MBP/OY-TES-1-N融合蛋白;上Amyloseresin亲和层析柱纯化,行Western blot鉴定。以融合蛋白作为抗原免疫新西兰白兔制备抗血清,经活化琼脂糖微球纯化后,采用ELISA法及Western blot法分别检测抗血清的效价和多克隆抗体的特异性。结果成功诱导表达出MBP/OY-TES-1-N融合蛋白。以该蛋白免疫新西兰兔制备抗血清,抗体效价为1∶1 000,Western blot检测证实该抗体能与目的蛋白发生特异性结合。结论成功地表达并纯化了MBP/OY-TES-1-N融合蛋白,并制备了特异性多克隆抗体。
- 陈玉升韦连登范蓉罗彬何少健林永达陈芳谢小薰肖绍文
- 关键词：OY-TES-1融合蛋白克隆纯化多克隆抗体
