陈进喜 作品数:16 被引量:84 H指数:6 供职机构: 广西大学动物科学技术学院 更多>> 发文基金: 广西壮族自治区科技攻关计划 广西省自然科学基金 广西科技创新能力与条件建设项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
猪脑心肌炎病毒SYBR Green Ⅰ real-time PCR检测方法的建立 针对猪脑心肌炎病毒(Encephalomyocarditis virus,EMCV)VP1基因序列设计并合成一对引物,构建含有该引物扩增序列的重组质粒作为阳性标准品,建立了检测EMCV核酸的SYBR Green I re... 施开创 陈进喜 屈素洁 许瑞胜 熊毅 刘棋 陈汉忠 李刚关键词:脑心肌炎病毒 荧光定量PCR 文献传递 猪链球菌9型钦州分离株cps9H基因序列分析 被引量:2 2010年 根据已发表的猪链球菌9型(SS9)荷兰5218分离株的基因核苷酸序列保守区域,设计一对特异性引物,以SS9钦州分离株抽提的DNA为模板,通过PCR方法扩增eps9H基因片段,并对其进行克隆、测序和分析。结果表明,4株SS9钦州分离株的cps9H目的基因长为389bp,与已知的7个国内外SS9毒株cps9H基因片段的核苷酸及推导的氨基酸序列比较,同源性分别为96.7%-100%和91.5%~100%。 陈进喜 付薇 覃芳芸 何丹 易春华 刘棋 熊毅关键词:猪链球菌9型 克隆 猪源脑心肌炎病毒GXLC株全基因组序列测定与分析 被引量:16 2010年 对猪源脑心肌炎病毒(EMCV)GXLC株进行全基因组克隆、测序和分析。采用RT-PCR技术分段扩增基因组可读框(ORF),应用3'-RACE和5'-RACE技术扩增3'-UTR和5'-UTR,分别对扩增片段进行克隆和测序,经拼接后获得GXLC株全基因组序列,共7725个核苷酸。与NCBI GenBank登录的国内外参考毒株进行同源性比较及系统进化分析结果表明,GXLC株与GX0601、GX0602、BJC3、HB1等国内分离株以及CBNU、K3、K11、BEL-2887A、EMCV-R、PV21等国外分离株同源性达99%以上;基于全基因组、结构蛋白及非结构蛋白基因序列绘制的系统进化树拓扑结构图相近,所有EMCV分离株可分成两个群:I群和II群,I群可细分为Ia亚群和Ib亚群,其中猪源EMCV属于Ia或Ib亚群、鼠源EMCV属于Ia亚群、野猪源EMCV属于II群,GXLC株与其它中国分离株均属于Ia亚群。 施开创 屈素洁 陈进喜 许瑞胜 郑敏 刘棋 陈汉忠 李刚关键词:脑心肌炎病毒 基因组 同源性比较 系统进化分析 鸡球虫微囊型口服疫苗免疫效果的初步研究 被引量:10 2006年 应用本研究室研制的微囊型口服鸡球虫疫苗,通过拌料口服免疫法,测定了微囊型口服鸡球虫疫苗不同免疫次数的免疫效果。实验结果表明:经两次拌料口服免疫的鸡只在实验性攻虫后,其发病率、死亡率、病变记分、血便记分、料肉比等各项指标均低于一次免疫组和感染对照组,说明在免疫两次后鸡机体对鸡球虫产生了较好的免疫力,有了明显的抵抗鸡球虫的能力,而只免疫一次的鸡只较免疫两次的鸡只抗鸡球虫的能力弱。微囊型口服鸡球虫疫苗使用方便,易于在生产中推广使用。 陈进喜 陈汉忠 谢婷 周天政 李芳 秦辉凌 卢小燕关键词:鸡球虫病 2株鹅细小病毒的主要结构蛋白VP2基因的克隆和序列分析 被引量:4 2008年 将鹅细小病毒PJ分离株和XJ分离株接种于13日龄非免疫鸭胚,收集接毒后24~72h死亡的鸭胚尿囊液。根据Genbank已发表的鹅细小病毒B株基因组核苷酸序列设计1对引物,对2株鹅细小病毒毒株主要结构蛋白VP2基因进行PCR扩增,将扩增产物与pMD18-T载体连接并测序。结果表明:PJ株和XJ株VP2的核苷酸序列全长分别为2 044bp和2 050bp,PJ株与B株、XJ株、台湾株的同源性均为93.5%~96.7%,与YG株、哈尔滨株、广东株的同源性为88.7%左右,与匈牙利株的同源性仅为80.7%,而与番鸭细小病毒的同源性为74.8%~80.7%。XJ株与匈牙利株的同源性为83.5%,与番鸭细小病毒的同源性为76.8%~80.0%,与其他毒株的同源性为91.6%~98.3%。 胡晓静 潘杰 陈进喜 付薇 徐贤坤 何丹 刘棋 熊毅关键词:鹅细小病毒 VP2基因 克隆 猪源脑心肌炎病毒GXLC株全基因组序列测定与分析 对猪源脑心肌炎病毒(EMCV)GXLC株进行全基冈组克隆、测序和分析。采用RT-PCR技术分段扩增基因组开放阅读框(ORF),应用3’-RACE和5’-RACE技术扩增3’-UTR和5’-UTR,分别对扩增片段进行克隆和... 施开创 屈素洁 陈进喜 许瑞胜 郑敏 刘棋 陈汉忠 李刚关键词:同源性比较 系统进化分析 Cloning and Prokaryotic Expression of VP1 Gene of Foot-and-Mouth Disease Virus (FMDV) Type O 被引量:1 2008年 According to the complete genome of foot-and-mouth disease virus(FMDV)type O,a pair of special primers was designed to amplify VP1 gene.The VP1 gene was amplified by RT-PCR and subsequently inserted into the expression vector pGEX-6p-1 and induced by IPTG.Then SDS-PAGE showed the expressed protein was 51 kD in molecular weight.Then the product was purified by GSTrap FF columns.The product was detected through Western-blot that showed the protein has antigenicity.It provided fundamental data and materials for further investigation on diagnosis method of FMDV. 付薇 陈磊 熊毅 潘琼 王常伟 陈进喜 胡晓静 刘棋关键词:VP1 CLONING 猪链球菌9型cps9G基因的克隆与序列分析 被引量:11 2009年 根据GenBank中猪链球菌9型(SS9)基因的核酸序列,设计一对引物,采用PCR方法从确诊为猪链球菌的阳性样品中扩增cps9G基因片段,将其克隆到pMD18-T载体上,转化DH5a感受态细胞,提取重组质粒pMD18T-cps9G,经PCR和酶切鉴定后测序,并与GenBank上SS9相应序列进行同源性分析。结果表明,经PCR扩增,鉴定为SS9的有8株。序列分析发现,8株SS9的cps9G片段的核苷酸序列较稳定,该基因片段长度均为562bp,彼此间的核苷酸同源性达96.8%~99.8%,亲缘关系密切;与GenBank上已发表的SS9参考毒株的同源性介于96.0%~98.6%。 付薇 陈进喜 覃芳芸 王常伟 熊毅 陈汉忠 刘棋关键词:猪链球菌9型 克隆 鸡球虫微囊型疫苗的研制及免疫效果 被引量:4 2008年 研制了微囊型鸡球虫疫苗并对其免疫效果进行探讨。结果表明,强毒微囊组获得的饲养效果最好,其相对增重率和相对饲料转换率分别为104.8%和100%;弱毒水剂组为74.1%和136%,而弱毒微囊组为49.4%和188%。强毒微囊组对球虫病的控制效果也明显好于其他组,其发病率、病变记分、血便记分分别为20%,6分和3分,而弱毒水剂组和弱毒微囊组分别为40%、10分、7分和50%、18分、8分。所研制的这种新型微囊球虫疫苗,具有使用方便,节省人力物力;疫苗大小适中,流动性好容易与小鸡饲料混合均匀等优点。由于微囊型球虫疫苗投服方便,因此能适合各种规模的鸡场使用,也适合鸡场进行多次或长期免疫使用。这种微囊剂型球虫疫苗的进一步完善和推广应用,可为我国鸡球虫病的免疫预防提供新的剂型。 陈汉忠 陈进喜 谢婷 曾晓飞 何木荣 周天政 秦辉凌 韦晓宝关键词:免疫效果 O型口蹄疫病毒结构蛋白基因VP1的克隆与原核表达 被引量:14 2008年 [目的]为进一步研究口蹄疫病毒的诊断方法提供理论依据。[方法]根据GenBank上已公布的O型口蹄疫病毒核苷酸序列,设计合成1对特异性引物,通过RT-PCR扩增VP1基因,将其克隆至表达载体pGEX-6p-1中,经测序鉴定目的基因正确地整合至表达质粒中,用IPTG诱导重组基因表达。[结果]通过PCR扩增获得682 bp的目的片段,所克隆的VP1基因在原核细胞中成功表达,表达产物为融合蛋白,经SDS-PAGE鉴定分子量为51 kD,Western Blot结果表明融合蛋白具有免疫原性。[结论]获得了猪O型口蹄疫VP1融合蛋白,可作为包被抗原用于口蹄疫诊断试剂盒的研制。 付薇 陈磊 熊毅 潘琼 王常伟 陈进喜 胡晓静 刘棋关键词:口蹄疫病毒 VP1 克隆