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SSEA-1、Oct-4在人胚胎生殖细胞的表达被引量：3: 2006年; 目的体外培养人胚胎生殖细胞（EG细胞）,通过检测培养的细胞中SSEA-1、Oct-4的表达,鉴定人胚胎生殖细胞.方法取5～9周人胚胎的生殖腺嵴和肠背系膜,进行组织块体外培养,采用流式细胞术及免疫细胞化学检测培养细胞的SSEA-1、Oct-4表达;取5～9周人胚胎的生殖腺嵴,制备石蜡切片,利用免疫组织化学方法,检测原始生殖细胞的SSEA-1表达.结果组织块体外培养得到的细胞,经免疫细胞化学及流式细胞仪显示的单个细胞或细胞集落,均阳性表达SSEA-1、Oct-4.石蜡切片免疫组织化学显示,人胚胎生殖腺嵴中有许多SSEA-1阳性表达的原始生殖细胞.结论组织块体外培养所获得细胞来源于原始生殖细胞,为未分化的人胚胎生殖细胞.; 陈永珍陈谦李芳朱旻张苏; 关键词：原始生殖细胞胚胎生殖细胞 OCT-4 流式细胞术

传代培养人胚胎生殖干细胞的生物学鉴定被引量：1: 2006年; 目的：通过对传代培养至第5代细胞分子标记物的表达分析,鉴定传代培养的细胞为人胚胎生殖干细胞(embrgonic germ stem cells,EGCs)。方法：取5～10周人胚胎的生殖腺嵴和肠背系膜,进行组织块体外培养人EGCs,挑选传代培养至第5代生长良好的细胞,采用免疫细胞化学法分别检测SSEA-1、SSEA-3、Oct-4、hTERT的表达。结果：组织块体外培养得到的细胞,经免疫细胞化学法显示的单个细胞或细胞集落,均阳性表达SSEA- 1、SSEA-3、Oct-4、hTERT。结论：组织块体外传代培养第5代所获得的细胞,为未分化的人EGCs。; 陈永珍张苏朱旻陈谦; 关键词：OCT-4 人端粒酶逆转录酶

人胚胎生殖细胞的原代、传代培养及生物学鉴定: 目的：鉴定组织块培养法体外培养人胚胎生殖腺嵴和背侧肠系膜所获得的细胞为未分化的人胚胎生殖细胞(人EG细胞);尝试不同时间和不同方法对人EG细胞进行传代培养，探讨最佳传代时机和传代方法;并确定传代培养的细胞仍为未分化的人E...; 陈谦; 关键词：人胚胎生殖细胞传代培养组织块培养法体外培养; 文献传递

SSEA-1、SSEA-3、Oct-4及hTERT在人胚胎生殖细胞中的表达被引量：2: 2007年; 分离5~9周人胚胎生殖腺嵴和背侧肠系膜,采用组织块法进行体外培养,免疫细胞化学染色法检测SSEA-1、SSEA-3、Oct-4及hTERT在人胚胎生殖细胞中的表达,以证实利用组织块体外培养所获得的细胞为未分化的人胚胎生殖细胞。结果表明:组织块体外培养得到的细胞或细胞集落均阳性表达SSEA-1、SSEA-3、Oct-4及hTERT,说明组织块体外培养获得的细胞为未分化的人胚胎生殖细胞。; 李芳陈永珍陈谦朱旻张苏; 关键词：人胚胎生殖细胞 OCT-4 HTERT

转录因子Oct-4和端粒酶在人胚胎生殖细胞的表达被引量：1: 2008年; 目的体外培养人胚胎生殖细胞（EGC），通过检测培养的细胞中转录因子Oct-4、端粒酶的表达，鉴定EGC。方法取5～10周人胚胎的生殖腺嵴和肠背系膜，进行组织块体外培养，采用免疫细胞化学检测Oct-4、端粒酶表达。结果组织块体外培养得到的细胞，经免疫细胞化学法显示的单个细胞或细胞集落，均阳性表达转录因子Oct-4、端粒酶。结论组织块体外培养所获得细胞来源于原始生殖细胞（PGCs），为未分化的EGC。; 张苏陈永珍朱旻陈谦; 关键词：胚胎生殖细胞端粒酶

人胚胎生殖细胞的传代培养被引量：6: 2007年; 目的探求人胚胎生殖细胞最适宜的传代时间及最佳的传代方法。方法取8周人胚胎的生殖腺嵴和肠背系膜,进行组织块体外培养人胚胎生殖细胞,选择原代培养第8天和第16天的细胞,采用挑取传代法和消化传代法,其中的消化传代法采用三种不同的消化液进行传代培养,记录各代培养的细胞集落数。结果在原代培养第8天时,挑取传代法传2代后获得的细胞集落数减少;消化传代法传4代后获得的细胞集落数明显增多。原代培养第16天时未能传代培养,但却看到人胚胎生殖细胞集落的分化。结论人胚胎生殖细胞传代培养最适宜的传代时间为原代培养第8天,最佳的传代方法为消化传代法。; 陈永珍张苏朱旻陈谦; 关键词：胚胎生殖细胞传代培养

人胚胎成纤维细胞对人胚胎生殖细胞生长的作用被引量：9: 2005年; 目的:研究人胚胎成纤维细胞对人胚胎生殖细胞(EG细胞)生长的作用。方法:采用组织块体外培养法体外培养人EG细胞,不添加任何细胞因子,利用源于胚胎组织自身的成纤维细胞作为饲养层,收集培养3 d和9 d的上清液,用抗体夹心ABC- ELISA法定量检测其白血病抑制因子(LIF)、干细胞生长因子(SCF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的含量。培养的细胞用免疫细胞化学法进行SSEA-3、OCT-4的检测。结果:培养9 d的上清液中3种因子均含量为LIF 55．25 pg／ml、SCF90．39 pg／ml、 bFGF 26．06 pg／ml,均高于培养3 d相应的平均含量。培养的细胞SSEA-3、OCT-4呈强阳性表达。结论:上清液中LIF、SCF和bF- GF的含量与胚胎成纤维细胞的生长呈正比,胚胎成纤维细胞能分泌这些细胞因子,以维持EG细胞体外增殖并抑制其分化。; 陈永珍李芳陈谦余水长朱旻张苏; 关键词：生殖细胞成纤维细胞胚胎细胞生长

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陈谦