陈谦 作品数:19 被引量:38 H指数:3 供职机构: 江苏大学临床医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省普通高校研究生科研创新计划项目 江苏省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 更多>>
中外混合编组PBL教学模式在生物信息学课程中的应用初探 被引量:2 2021年 目的探究中外混合编组PBL教学法在生物信息学课程中的应用效果,并为其他医学新兴辅助学科的教学改革提供参考。方法随机选取我校2017级临床医学专业60名留学生和同年级、同专业的60名中国学生为研究对象,按照随机数字表法分为观察组与对照组,观察组采用中外混合编组,对照组未采用混合编组。各组学生同时完成6次全英文生物信息学PBL案例分析。通过客观(理论知识与文献复现考核)与主观(问卷调查)两种形式,比较两组的考核成绩与能力提升情况,从而评估该模式的教学效果。结果观察组综合考核成绩为(84.00±4.86)分,分别高于对照组的(80.47±4.42)分、(81.37±4.88)分(P<0.05);观察组学生的案例讨论思维发散能力、外语能力、学习积极性、学术创新力、跨文化交流能力5个提升指标均高于对照组;同时72.2%的中外混合编组的学生对课程非常满意、满意。结论中外混合编组PBL教学模式在生物信息学课程中有较大的应用价值,在一定程度上能够为其他医学新兴辅助学科的教学改革提供参考。 潘灿灿 许薇 毛玉红 张志明 陈谦关键词:PBL教学模式 医学生 生物信息学 缺血后处理对大鼠脊髓缺血再灌注损伤的保护作用及对钙敏感受体和Caspase-12表达的影响 被引量:1 2020年 目的:探究缺血后处理(ischemic post-conditioning,IPC)对大鼠脊髓缺血再灌注损伤(spinal cord ischemia-reperfusion injury,SCIRI)的保护作用及其对钙敏感受体(calcium-sensing receptor,CaSR)及内质网应激相关蛋白Caspase-12表达的影响。方法:将50只SD大鼠随机平均分为5组:假手术组,缺血再灌注模型组(IR组),IR模型+IPC组(IPC组),IR模型+IPC+激动剂组(IPC-GdCl 3组)和IR模型+抑制剂组(NPS2390组)。假手术组仅显露大鼠腹主动脉而不用动脉夹夹闭,其他各组夹闭腹主动脉25 min后再开放建立SCIRI模型;IPC组再灌注3 min后予3个循环的IPC;IPC-GdCl 3组在连续2天每天1次尾静脉注射CaSR激动剂GdCl 3后行IPC组操作;NPS2390组提前2天每天1次通过尾静脉注射NPS2390,随后建立IR模型。采用BBB评分法对大鼠后肢运动功能进行评价,采用TUNEL染色检测脊髓组织中神经细胞凋亡数目,采用蛋白质印迹及免疫组织化学定量检测脊髓组织中CaSR及Caspase-12表达。结果:各模型组大鼠BBB评分均明显低于假手术组(P<0.05);IPC组、NPS2390组BBB评分均明显高于IR组(P<0.05);IPC组BBB评分明显高于IPC-GdCl 3组(P<0.05)。TUNEL染色结果显示,假手术组凋亡细胞极少;IR组较IPC组和NPS2390组凋亡神经细胞数量均明显增多(P<0.05);IPC组较IPC-GdCl 3组凋亡神经细胞数量明显减少(P<0.05)。蛋白质印迹结果表明,建模各组较假手术组CaSR及Caspase-12蛋白表达量明显升高(P<0.05);IR组CaSR与Caspase-12表达量均明显高于IPC组和NPS2390组(P<0.05);IPC组较IPC-GdCl 3组CaSR与Caspase-12表达量明显减少(P<0.05)。免疫组织化学各组比较情况与蛋白质印迹一致。结论:IPC对大鼠SCIRI起到保护作用,且可能与抑制脊髓组织中CaSR及Caspase-12的表达有关。 张睿 孙继芾 陈谦 曹苏成 黄永辉关键词:缺血后处理 脊髓缺血再灌注损伤 钙敏感受体 CASPASE-12 高浓度酒精摄入对大鼠学习记忆及海马炎症因子表达的影响 被引量:3 2016年 目的:研究高浓度酒精摄入对大鼠学习记忆能力及海马内炎症因子表达的影响。方法:将20只雄性SD大鼠随机分为酒精组和对照组。酒精组大鼠给予酒精灌胃(50%,8 ml/kg,1次/d,28 d);对照组大鼠给予生理盐水灌胃。利用Morris水迷宫检测大鼠空间学习记忆能力,尼氏染色显示海马结构,免疫组化及免疫印迹检测海马内TNF-α和IL-6的表达。结果:酒精组大鼠学习记忆能力、海马尼氏染色强度均显著低于对照组;而海马TNF-α和IL-6的表达则强于对照组,且阳性细胞为多突起小细胞。结论:高浓度酒精可能通过增强海马内炎症因子表达而影响其功能、导致大鼠空间学习记忆能力下降。 陈谦 钱海 吴华博 刘义灏 邵根宝 龚爱华 张志坚关键词:酒精 海马 肿瘤坏死因子-Α 白介素-6 膳食铁含量和运动对雌性大鼠延髓抗氧化能力的影响 2016年 目的:观察膳食铁含量和有氧运动对雌性大鼠延髓抗氧化活性的影响。方法:断乳雌性Sprague-Dawley大鼠90只,随机分为6组,其中静息组每组12只,运动组每组18只,分别为铁含量缺乏运动组(IDE)、铁含量缺乏静息组(IDS)、标准铁含量运动组(CNE)、标准铁含量静息组(CNS)、铁含量过载运动组(IOE)、铁含量过载静息组(IOS)。用不同铁含量饲料喂养1个月后,运动组开始游泳,每天1次,持续3个月,静息组除不做运动外,其余处理同对应运动组。最后1次运动后,大鼠空腹24 h,测定大鼠体质量以及脏器和脑质量,检测延髓非血红素铁(non-heme iron,NHI)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和羟自由基抑制能力(hydroxyl radical scavenging capability,HRSC)。结果:CNE组延髓NHI含量显著高于CNS组,SOD和HRSC水平显著低于CNS组;IDE组延髓SOD活力显著高于IDS组,IOE组延髓SOD和HRSC水平均显著高于IOS组。结论:虽然长期运动导致标准铁含量大鼠延髓NHI含量增加从而增加大鼠延髓氧化应激风险,但是有氧运动能有效增加膳食铁过载和铁缺乏的抗氧化能力,对改善膳食铁过载和铁缺乏状态有一定作用。 吴华博 陈谦 车力龙 肖德生关键词:铁缺乏 铁过载 铁状态 抗氧化 干细胞标志蛋白在成人鼻黏膜嗅鞘细胞的表达 2012年 目的建立成人鼻黏膜嗅鞘细胞的体外培养方法,探讨干细胞标志蛋白在人嗅鞘细胞的表达及其意义,为嗅鞘细胞自体移植治疗中枢神经系统损伤提供可行性研究资料。方法用鼻内镜自成人(鼻中隔偏曲伴黏膜肥厚者)鼻腔活体钳取部分嗅区黏膜,经胰酶消化制成细胞悬液。细胞接种于玻璃培养瓶,用含10%胎牛血清的F12培养基培养、传代、扩增。用免疫细胞化学或免疫荧光染色和免疫印迹方法检测SOX-2、SOX-10、Nestin、NCAM、NGFRp75和S100-β在第7代嗅鞘细胞的表达。结果成人嗅黏膜细胞经过多次传代培养后,嗅鞘细胞逐渐成为优势细胞,该细胞高表达干细胞标志蛋白和嗅鞘细胞标志蛋白。结论成人嗅黏膜细胞体外培养可获得高产量的许旺细胞(Schwann cells,Scs)样嗅鞘细胞,该细胞具有干细胞特性(stemness)和很强的增殖能力,可作为自体细胞移植治疗中枢神经系统损伤的种子细胞。 黄秋生 陆汉强 周月鹏 贺清华 孙湘兰 陈谦 龚爱华 姜平 张志坚关键词:嗅黏膜 细胞培养技术 干细胞特性 京尼平交联音猬因子复合纤维蛋白支架修复大鼠脊髓损伤 被引量:2 2022年 背景:组织工程支架移植是修复脊髓损伤最有应用前景的治疗手段之一,通过组织工程支架募集内源性神经干细胞并促进其分化为神经细胞,进而修复脊髓损伤。目的:观察京尼平交联的音猬因子复合纤维蛋白支架移植到大鼠脊髓损伤处的修复作用,探讨其作用机制。方法:分别制备纤维蛋白胶、音猬因子复合纤维蛋白支架、京尼平交联音猬因子复合纤维蛋白支架,检测京尼平交联音猬因子复合纤维蛋白支架的体外降解率与缓释性能。将120只雌性SD大鼠随机分为4组,每组30只,A组T10-T11脊髓损伤部位不植入任何材料,B组T10-T11脊髓损伤部位植入纤维蛋白胶,C组T10-T11脊髓损伤部位植入音猬因子复合纤维蛋白支架,D组T10-T11脊髓损伤部位植入京尼平交联音猬因子复合纤维蛋白支架,术后每周对大鼠进行运动功能BBB评分,术后12周取脊髓损伤处及周围脊髓组织,进行组织形态与WesternBlot检测。结果与结论:(1)音猬因子复合纤维蛋白支架14 d基本完全降解,京尼平交联的纤维蛋白支架14 d的降解率不超过20%;音猬因子复合纤维蛋白支架7 d基本完全释放了音猬因子;京尼平交联音猬因子复合纤维蛋白支架在1-3 d爆发释放音猬因子,4-14 d内缓慢释放音猬因子,具有良好的缓释性能;(2)随着时间的延长,各组大鼠的运动功能BBB评分升高,B、C组术后12周的BBB评分高于A组(P<0.05),D组术后12周的BBB评分高于B、C组(P<0.05);(3)苏木精-伊红染色显示,A组脊髓损伤处恢复最差,D组恢复最好;(4)免疫组化染色与WesternBlot检测显示,A组巢蛋白、神经生长相关蛋白43、神经丝蛋白200、髓鞘碱性蛋白表达量最低,胶质纤维酸性蛋白表达最高;D组巢蛋白、神经生长相关蛋白43、神经丝蛋白200、髓鞘碱性蛋白表达量最高,胶质纤维酸性蛋白表达最低;(5)结果表明,京尼平交联音猬因子复合纤维蛋白支架具有良好的缓释性能,� 陈平波 王晶 孙勇 徐晓峰 陈谦 张志坚关键词:京尼平 音猬因子 纤维蛋白 交联 定向多通道纤维蛋白支架对EMSCs迁移分化的影响 被引量:3 2018年 目的:构建具有定向多通道的纤维蛋白支架,并探究该支架对外胚层间充质干细胞(ecto-mesenchymal stem cells,EMSCs)的生长行为及向神经分化的影响,为其用于脊髓损伤修复提供新思路。方法:通过人工造孔和冷冻干燥技术构建具有定向多通道的纤维蛋白支架,扫描电子显微镜(scanning electron microscope,SEM)观察支架内微观结构。大鼠鼻粘膜来源的EMSCs与该支架复合培养7d,倒置荧光显微镜和SEM评估该支架对EMSCs迁移的引导效果,并通过免疫荧光染色技术鉴定其对EMSCs向神经诱导分化的程度。结果:(1)SEM显示支架横截面上有若干通道空洞,支架纵截面显示通道的走向基本与支架长轴一致;(2)EMSCs粘附在定向通道的孔壁上,且沿着支架纵轴的方向延伸;(3)免疫荧光染色显示神经相关蛋白阳性。结论:EMSCs在定向多通道纤维蛋白支架上能够正常生长,且支架的定向多通道对其生长具有引导作用,利于EMSCs的粘附、迁移和向神经方向分化。 杨文静 沈元昊 杨开元 陆浩 崔学文 张志坚 陈谦关键词:纤维蛋白支架 脊髓损伤 咪康唑与纤维蛋白协同促进神经球分化为成髓鞘样细胞 被引量:1 2018年 目的:探讨咪康唑与纤维蛋白能否协同促进神经球分化为成髓鞘样细胞。方法:培养并鉴定胎鼠神经球;通过MTT法确定不同浓度咪康唑对神经球存活的影响;将神经球按培养条件不同分为四组,对照组、咪康唑组(mico组)、纤维蛋白组(fibrin组)及纤维蛋白-咪康唑联用组(fibrin+mico组),培养两周后以免疫荧光染色比较髓磷脂碱性蛋白(MBP)的表达;Western Blot法比较MBP、2’3’环核苷酸磷酸二酯酶(CNPase)、整合素、细胞外调节蛋白激酶及其磷酸化(ERK、p-ERK)的表达。结果:(1)神经球阳性表达巢蛋白(nestin)和CD133:当咪康唑浓度低于或等于1.5μmol/L时,神经球存活在各组之间不存在统计学差异(P>0.05),但2.5μmol/L组显著低于2μmol/L组和1.5μmol/L组(P<0.05)。(2)免疫荧光结果显示:神经球分化所成的成髓鞘样细胞表达MBP阳性,呈多突起形态;fibrin组及mico组MBP相对荧光强度均高于对照组(P<0.05),fibrin+mico组神经球分化为网络状的成髓鞘样细胞团,其相对荧光强度高于其他组(P<0.05)。(3)Western Blot结果显示:fibrin+mico组MBP及CNPase表达显著高于mico组和fibrin组(P<0.05),fibrin+mico组整合素表达及p-ERK/ERK显著高于mico组和fibrin组(P<0.05),同时咪康唑及纤维蛋白对MBP、CNPase、整合素的表达及p-ERK/ERK的效应具有交互作用(P<0.05)。结论:咪康唑与纤维蛋白能协同促进神经球分化为成髓鞘样细胞,其机制可能与ERK磷酸化有关。 崔学文 周焕高 陈平波 杨文静 杨文静 龚爱华 张志坚关键词:咪康唑 纤维蛋白 神经球 SHH缓释的脊髓去细胞支架促进大鼠脊髓损伤修复 被引量:2 2018年 目的:研究可缓释音猬因子(sonic hedgehog,SHH)的脊髓去细胞支架(acellular spinal cord scaffolds,ASCSs)对大鼠脊髓损伤修复的效果。方法:(1)用物理和化学联合法制备ASCSs,并检测其效果。(2)使用京尼平(genipin,GP)作为交联剂,体外制备缓释SHH的ASCSs(ASCSs-GP-SHH),探究其缓释效果。(3)建立大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)模型,随机分为四组(每组20只):单纯SCI组,ASCSs组,ASCSs-GP组(GP交联的ASCSs),ASCSs-GP-SHH组。术后每周记录BBB评分,评估功能恢复。术后12周取出损伤处脊髓组织,行免疫组化和Western Blot检测损伤处相关蛋白Nestin(巢蛋白),GAP43(生长相关蛋白),MBP(髓磷脂碱性蛋白),NF200(神经丝蛋白),GFAP(胶质纤维酸性蛋白)的表达。结果:(1)物理及化学联法制备ASCSs效果良好;(2)ASCSs-GP-SHH具有良好的缓释SHH的性能;(3)ASCS-GP-SHH组BBB评分从术后到12周较其他组高(P<0.05);(4)免疫组化及HE染色结果显示:ASCS-GP-SHH组脊髓横断处有神经元再生。SCI组神经元凋亡明显,纤维瘢痕及空洞大,ASCS-GP组较ASCS组稍好,ASCS组较SCI组稍好;(5)Western Blot结果显示:ASCS-GP-SHH组Nestin,GAP43,MBP,NF200表达高于SCI、ASCS-GP、ASCS组(P<0.05),而GFAP低于SCI、ASCS-GP、ASCS组(P<0.05)。结论:物理和化学联合制备可以有效的制备ASCSs,ASCSs-GP-SHH缓释效果良好,对大鼠脊髓损伤的修复有明显的促进作用。 陈平波 徐晓峰 徐晓峰 毕士奇 史文涛 杨开元 张志坚 张志坚 陈谦关键词:音猬因子 京尼平 缓释 脊髓损伤 大鼠鼻黏膜外胚层间充质干细胞向成骨细胞和神经元的诱导分化 被引量:2 2011年 目的:建立鼻黏膜外胚层间充质干细胞(ectomesenchymal stem cells,ECTO-MSCs)的体外培养方法,探讨该细胞的干细胞特性(stemness)和分化潜能。方法:在观察ECTO-MSCs在大鼠鼻腔呼吸黏膜内分布特征的基础上,体外培养扩增ECTO-MSCs,并用干细胞标志蛋白巢蛋白、CD133、CD44、波形蛋白的抗体进行免疫荧光染色,鉴定该细胞的干细胞特性;分别用成骨诱导培养基(含地塞米松、维生素C和β-甘油磷酸钠)及神经诱导培养基(neurobasal培养液中加入B27、脑源性神经生长因子、全反式维A酸、音猬因子)诱导ECTO-MSCs向成骨细胞和神经细胞定向分化;用组织化学染色和免疫荧光染色方法,评价其诱导分化效果。结果:用成骨诱导剂诱导培养后,ECTO-MSCs碱性磷酸酶活性明显增强,在细胞表面形成大量的茜素红染色阳性的钙结节;用神经诱导培养基诱导培养后,ECTO-MSCs变化为神经细胞样形态,细胞高表达神经细胞标志蛋白NF-200,细胞发出细长突起并互相连接成神经网络。结论:大鼠鼻腔呼吸黏膜内广泛存在ECTO-MSCs,该细胞具有多向分化潜能,可作为种子细胞用于自体移植修复骨和神经组织损伤。 贺清华 周月鹏 陈谦 刘锦波 吴滢 庄琴 孙湘兰 龚爱华 姜平 张志坚关键词:鼻黏膜 诱导分化 成骨细胞 神经细胞