陈志华
- 作品数：17 被引量：35H指数：4
- 供职机构：福建医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金福建省教育厅科技项目福建省科技重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 结直肠癌中Kiss-1基因启动子甲基化与Kiss-1基因表达的关系
- 2013年
- 目的:研究结直肠癌中Kiss-1基因启动子甲基化状态对Kiss-1基因表达的影响。方法:应用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测73例结直肠癌、正常结直肠组织和人结直肠癌细胞HCT116、SW480、W1116、LoVo中Kiss-1基因启动子甲基化状态,应用realtime-PCR、Western-blot技术检测相应组织和细胞中Kiss-1基因mRNA和蛋白质(Metastine)的表达量。结果:结直肠癌中Kiss-1基因甲基化阳性率(82.19%)高于正常组织(6.31%)(P<0.05);结直肠癌组织中,甲基化阳性组Kiss-1基因mRNA和Metastine表达量均明显低于甲基化阴性组(P<0.05)。而HCT116、SW116和SW480细胞中Kiss-1基因启动子甲基化阳性,LoVo细胞甲基化阴性;定量分析Kiss-1基因mRNA和matestin表达量,结果显示LoVo>SW480>SW1116>HCT116,差异有统计学意义(p<0.05)。结论:结直肠癌中Kiss-1基因启动子甲基化可能引起Kiss-1基因表达下调。
- 林素勇陈志华陈绍勤戴起宝
- 关键词：结直肠癌KISS-1基因甲基化
- 无创正压通气在呼吸衰竭患者中的应用被引量：1
- 2020年
- 目的:探究无创正压通气应用于呼吸衰竭患者的应用方法与临床效果。方法:回顾性分析2017年5月~2019年5月具备无创正压通气适应证的呼吸衰竭患者45例的干预方法与干预效果。结果:经无创正压通气干预后,患者的呼吸频率、心率均较干预前显著降低,P<0.05;患者的PaCO2较干预前降低,P<0.05;PaO2与SpO2、pH值较干预前增高,P<0.05;治疗总有效率为86.89%。结论:无创正压通气避免了有创机械通气气管插管、气管切开损伤呼吸道,其具有安全、无创且有效的特点,应用于呼吸衰竭的疗效值得肯定,能有效改善患者的动脉血气指标,改善其心率与呼吸频率,治疗时需要把握适应证与禁忌证,当发现治疗无效时及时转为有创通气。
- 魏庆辉金咏絮刘晓毅林利峻连秋明唐剑南陈志华
- 关键词：无创正压通气呼吸衰竭
- 后疫情时代临床专业型硕士研究生科研能力培养的思考
- 2023年
- 针对后疫情时代临床专业型硕士研究生培养中存在的问题,提出加强研究生临床科研能力培养,构建适应时代特点的研究生培训机制,完善研究生科研能力评价体系。
- 陈绍勤陈志华林素勇翁翔巍林桦高骥
- 关键词：医学教育
- Kiss-1基因下调丝裂原活化蛋白激酶信号传导通路抑制人结直肠癌HCT116细胞转移能力被引量：1
- 2016年
- 目的观察Kiss-1基因通过下调促细胞丝裂原细胞外激酶-胞外信号调节激酶．丝裂原活化蛋白激酶信号传导通路（MEK—ERK—MAPK）途径对人结直肠癌HCTl16细胞侵袭、转移能力的影响。方法重组LV．Kiss-1基因慢病毒为载体转染人结直肠癌HCT116细胞，实验分为空白对照组（CON组）、慢病毒空载体阴性对照组（NC组）、Kiss-1基因过表达组（OE组）。细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测转染前后细胞增殖能力的变化，Transwell法分别检测转染前后细胞的侵袭和迁移能力的变化。应厢Westernblot法检测3组细胞中MAPK信号通路的关键分子丝裂原细胞外激酶（MEK）表达含量的变化以及下游效应蛋白肌球蛋白轻链（MLC）磷酸化水平的变化。结果OE组HCTll6细胞中MEK的表达含量为0．3920±0．0107，较CON组的0．8284±0．0167、NC组的0．8405±0．0092明显降低（P〈0．05），下游效应蛋白MLC磷酸化水平OE组为0．1783±0．0072，较CON组的0．5246±0．0122、NC组的0．5441-4-0．0135亦明显下降（P〈0．05），差异有统计学意义。OE组较CON、NC组细胞增殖受到明显抑制（P〈0．05），细胞侵袭、迁移能力亦出现明显抑制（P〈0．05）。结论LV-Kiss-1基因慢病毒转染人结直肠癌HCTl16细胞后，可能通过MEK—ERK—MAPK信号传导通路途径抑制其增殖、侵袭和迁移能力。
- 高骥苏小宝林素勇陈志华陈绍勤
- Kiss-1基因通过NF-κB信号传导通路抑制人结直肠癌HCT116细胞迁移被引量：7
- 2015年
- 目的探讨Kiss-1基因抑制人结直肠癌细胞转移能力与NF-κB信号传导通路的相关性。方法构建重组p GC-LV-Kiss-1-EGFP慢病毒载体并转染人结直肠癌HCT116细胞,实验分为空白对照组(CON组)、慢病毒空载体阴性对照组(NC组)、Kiss-1基因过表达组(OE组)。CCK-8(Cell Counting Kit-8)法检测转染前后细胞增殖能力的变化,Transwell法分别检测转染前后细胞的侵袭和迁移能力的变化。Western-blot法检测转染前后NF-κB信号传导通路中抑制性蛋白I-κB以及下游效应蛋白MMP-9表达量的变化。结果 OE组HCT116细胞中I-κB的表达含量较CON组、NC组明显升高(P<0.05),下游效应蛋白MMP-9的表达量明显下降(P<0.05),差异具有统计学意义。OE组较CON组、NC组细胞增殖受到明显抑制(P<0.05),细胞侵袭、迁移能力亦出现明显抑制(P<0.05)。结论重组p GC-LV-Kiss-1-EGFP慢病毒转染人结直肠癌HCT116细胞后,可能通过NF-κB信号传导通路途径抑制其增殖、侵袭和迁移能力。
- 陈绍勤苏小宝高骥韩宏景陈志华林素勇
- 关键词：人结直肠癌KISS-1NF-ΚB
- 自动诊室血压、动态血压、家测血压与高血压患者早期靶器官损害的相关性研究
- 目的:本文旨在探究AOBP（Automated office blood pressure,自动诊室血压）与其他血压测量方式所测得的血压值差异及AOBP与高血压患者早期靶器官损害的相关性。方法:采用横断面研究方法,连续入...
- 陈志华
- 关键词：高血压靶器官损害
- 结直肠癌组织中Kiss-1基因启动子甲基化对其表达水平的影响及其临床意义被引量：2
- 2014年
- 目的:研究结直肠癌组织中Kiss-1基因启动子甲基化状态对Kiss-1基因表达的影响,分析其与结直肠癌临床病理特性的关系及临床意义。方法:收集126例结直肠癌组织及其癌旁正常结直肠组织,采用甲基化特异性PCR(MSP)检测Kiss-1基因启动子区甲基化状态,采用实时荧光定量PCR和Western blotting法检测结直肠癌组织和正常结直肠组织中Kiss-1基因mRNA和蛋白的表达水平。结果:结直肠癌组织中Kiss-1基因启动子甲基化阳性率(83.33%)高于癌旁正常结直肠组织(30.16%)(P<0.05)。结直肠癌组织中Kiss-1基因启动子甲基化阳性组Kiss-1基因mRNA和蛋白表达水平均低于Kiss-1基因启动子甲基化阴性组(P<0.05)。结直肠癌组织中T3+T4组Kiss-1基因启动子甲基化阳性率高于T1+T2组(P<0.05),但Kiss-1基因mRNA和蛋白表达水平低于T1+T2组(P<0.05);中和低分化组Kiss-1基因启动子甲基化阳性率高于高分化组(P<0.05),Kiss-1基因mRNA表达水平低于高分化组(P<0.05);淋巴结转移组甲基化阳性率高于无淋巴结转移组(P<0.05),但Kiss-1基因mRNA及蛋白表达水平低于无淋巴结转移组(P<0.05);远处转移组Kiss-1基因启动子甲基化阳性率显著高于无远处转移组(P<0.05),但Kiss-1基因mRNA及蛋白表达水平低于无转移组(P<0.05)。Kiss-1基因启动子甲基化阳性率与患者的性别、年龄、肿瘤部位和大小无明显关联(P>0.05)。结论:结直肠癌组织中Kiss-1基因启动子甲基化与Kiss-1基因表达水平及结直肠癌的恶性转化特性(特别是转移)有关联,Kiss-1基因甲基化状态有望成为评估结直肠癌转移风险的重要指标。
- 陈志华林素勇陈绍勤戴起宝韩宏景
- 关键词：结直肠肿瘤KISS-1基因DNA甲基化
- 慢病毒转染KISS1基因对人结直肠癌HCT116细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响被引量：3
- 2017年
- 目的:探讨慢病毒转染KISS1基因过表达对结直肠癌HCT116细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响,并阐明其作用机制。方法:选取KISS1基因低表达结直肠癌细胞株,构建慢病毒载体并转染KISS1基因,分为对照组(PBS处理)、空载体组(转染空载体)和过表达组(转染含KISS1载体)。荧光显微镜检查转染的荧光率(MOI),Real-time PCR和Western blotting法检测各组细胞中KISS1 mRNA和蛋白(metastin)的表达量,采用CCK-8法检测各组细胞增殖活力,Transwell小室法检测各组细胞侵袭和迁移能力。结果:LoVo、SW620、SW480、HCT-116和HT29细胞中,HCT-116细胞中KISS1 mRNA和蛋白表达量相对最低,因此筛选其作为研究载体。包装有KISS1基因的慢病毒感染HCT-116细胞后,能够稳定表达增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因,MOI均>80%。与对照组和空载体组比较,过表达组细胞中KISS1 mRNA和蛋白表达量明显升高(P<0.05),细胞增殖活力明显降低(P<0.05),侵袭能力和迁移能力亦明显下降(P<0.05);与对照组比较,空载体组细胞增殖活力、侵袭能力和迁移能力差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:慢病毒转染KISS1基因能够过表达KISS1蛋白及抑制结直肠癌细胞增殖、侵袭及迁移能力,其机制可能与KISS1蛋白表达有关。
- 陈志华林素勇韩宏景苏小宝陈绍勤戴起宝
- 关键词：结直肠肿瘤转染
- 5-杂氮-2'-脱氧胞苷对人结直肠癌HCT116细胞KISS1基因表达及侵袭迁移的影响被引量：5
- 2014年
- 目的:应用甲基化转移酶抑制剂5-杂氮-2'-脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-dC)干预人结直肠癌HCT116细胞,分析KISS1基因启动子甲基化与KISS1表达的关系及对细胞生物学特性的影响。方法:分别采用甲基化特异性-PCR、实时荧光定量-PCR和蛋白质印迹法检测不同剂量的5-Aza-dC干预不同时间后HCT116细胞中KISS1基因启动子的甲基化状态、mRNA和蛋白表达的影响;并应用Transwell小室法检测细胞侵袭和迁移能力的变化,细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)法检测细胞增殖能力的变化。结果:5-Aza-dC干预后,HCT116细胞KISS1基因启动子甲基化转为阴性。5-Aza-dC干预5 d后,各个浓度处理组KISS1 mRNA及蛋白的表达量均较对照组有明显增高(P<0.05),且随着浓度的增加,mRNA和蛋白的表达量逐渐上调,但5μmol/L组与10μmol/L组之间,差异无统计学意义(P>0.05);干预后各组细胞的侵袭和迁移能力也较对照组明显下降(P<0.05)。结论:DNA甲基化转移酶抑制剂5-Aza-dC能够逆转KISS1基因启动子的甲基化,并通过上调KISS1基因表达抑制结直肠癌HCT116细胞的侵袭和迁移能力。
- 陈绍勤陈志华林素勇戴起宝
- 关键词：结直肠肿瘤脱氧胞苷甲基化肿瘤转移
- PKC信号通路在KISS1基因抑制人结直肠癌HCT116细胞侵袭迁移的作用被引量：2
- 2017年
- 目的:探讨PKC信号通路在KISS1基因发挥抑制结直肠癌细胞HCT116侵袭迁移的作用。方法:构建p GC-LV-KISS1-EGFP慢病毒载体感染人结直肠癌细胞HCT116,分空白对照组(CON组)、空载体对照组(NC组)、过表达组(OE组)。q RT-PCR和Western blot检测KISS1基因m RNA和Metastin、PKC信号通路的关键分子PKCα、PKCβII及下游E钙黏蛋白表达量的变化。Transwell法检测细胞侵袭、迁移能力的变化。结果:转染后能够稳定表达报告基因EGFP,荧光率均>80%,且OE组KISS1基因m RNA、Metastin表达量较CON组和NC组均明显升高(P<0.05)。转染后,PKCβⅡ的蛋白表达量(0.288 2±0.023 7)较CON组(0.530 9±0.013 3)和NC组(0.511 7±0.008 5)明显下降(P<0.05),而PKCα的表达水平无明显变化(P>0.05);下游效益蛋白E钙黏蛋白表达量(0.633 2±0.017 4)较CON组(0.232 2±0.019 6)和NC组(0.252 3±0.018 2)明显升高(P<0.05)。OE组细胞侵袭、迁移能力较CON组和NC组均明显下降(P<0.05)。结论:KISS1基因可能通过下调PKCβⅡ后上调下游蛋白E钙黏蛋白的表达而发挥抑制结直肠癌细胞HCT116侵袭、迁移作用,有望成为防治结直肠癌转移的新靶点。
- 陈志华韩宏景林素勇苏小宝戴起宝陈绍勤吴佩文
- 关键词：结直肠癌PKC
