陈华剑
- 作品数：5 被引量：17H指数：1
- 供职机构：重庆市急救医疗中心更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 锌指蛋白281对肝癌细胞增殖的影响被引量：1
- 2018年
- 目的:研究锌指蛋白281(zinc finger protein 281,ZNF281)对肝癌细胞增殖的作用。方法:用realtime PCR检测80例健康人群及206例肝癌患者外周血单个核细胞中ZNF281的mRNA表达水平,并分析肝癌患者单个核细胞中ZNF281的表达水平与多个临床病理参数的相关性。采用real-time PCR及Western blot实验分别检测ZNF281在肝癌细胞和永生化肝细胞中的mRNA及蛋白表达水平。利用小干扰RNA靶向沉默Huh-7细胞和SKHep-1细胞中ZNF281的表达,然后用MTS法检测肝癌细胞活力的变化;EdU标记实验检测肝癌细胞增殖能力的变化;平板集落形成实验检测肝癌细胞集落形成能力的变化;软琼脂集落形成实验检测肝癌细胞锚定非依赖生长能力的变化。结果:与正常健康人群相比,肝癌患者的外周血单个核细胞中ZNF281的mRNA表达水平明显增高,且其增高水平与肿瘤的大小、分期以及血管侵袭性存在正相关。肝癌细胞中ZNF281表达水平高于永生化肝细胞(P<0.05)。沉默ZNF281可以抑制肝癌细胞的活力,抑制肝癌细胞增殖,DNA合成降低,集落数量减少,锚定非依赖性生长能力减弱(P<0.05)。结论:ZNF281可促进肝癌细胞的增殖。
- 陈华剑张钦红张薇
- 关键词：肝细胞癌细胞增殖
- 4380株医院感染病原菌的临床分布及耐药性分析被引量：15
- 2013年
- 目的了解4 380株医院感染病原菌的临床分布及其耐药性。方法对重庆市急救医疗中心住院患者的标本按常规进行病原菌分离、鉴定和抗菌药物敏感性试验,结果用WHONET5.6软件进行分析。结果医院感染检出率前5位的科室为神经外科、神经内科、创伤科、肿瘤科和中心重症监护病房;7 326例临床送检标本中,分离到4 380株病原菌,检出率约为59.8%,其中革兰阴性杆菌占75.3%(3 300/4 380),革兰阳性球菌占19.0%(831/4 380),真菌占5.7%(249/4 380),排名前10位病原菌依次为:铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、大肠埃希菌、白色念珠菌、凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、肠球菌属、阴沟肠杆菌、洛菲不动杆菌。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检出率为49.1%,耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)检出率为81.2%,均未检出对糖肽类耐药的葡萄球菌,产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)阳性的大肠埃希菌检出率为58.9%,ESBLs阳性肺炎克雷伯菌检出率为28.9%。结论多种因素致患者免疫力低下,是条件致病菌引起医院感染的主要原因;病原菌以革兰阴性杆菌为主,其中铜绿假单胞菌上升尤为明显,真菌感染比例也有明显上升趋势。肠杆菌科细菌对碳青霉烯酶类、阿米卡星和哌拉西林/他唑巴坦等抗菌药物耐药率较低,铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌呈现多重耐药趋势。
- 李科杨晏陈华剑王忠诚
- 关键词：耐药性病原菌医院感染
- 用于精液分离检测的双趋化型微流控装置
- 本实用新型涉及精液分离技术领域，具体涉及一种用于精液分离检测的双趋化型微流控装置，包括基座，基座的上方设置有PDMS板，基座和PDMS板之间设置有用于在PDMS板下端面形成均匀的温度场的加热单元，PDMS板上设置有精液入...
- 陈华剑聂萃谢国明杨宇君
- HMMR通过MEK/ERK信号通路促进肝细胞癌侵袭转移
- 2022年
- 目的探讨透明质酸介导的细胞游走受体(hyaluronan-mediated motility receptor,HMMR)对肝细胞癌侵袭转移的影响及潜在机制。方法采用qRT-PCR和Western blot法检测肝癌细胞系和肝癌组织,以及免疫组化检测肝癌组织中HMMR的表达;通过划痕实验、Transwell小室观察沉默/过表达HMMR对肝癌细胞迁移和侵袭能力的影响;通过小鼠肝癌肺转移模型观察沉默HMMR对肝癌肺转移的影响;采用Western blot检测HMMR对E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、p-MEK、p-ERK等蛋白水平的影响。结果肝癌细胞系中HMMR呈高表达。肝癌组织中HMMR的表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05),并且转移组癌组织中HMMR的水平明显高于非转移组(P<0.05)。沉默HMMR后细胞的迁移侵袭能力明显低于对照组(P<0.01),并且E-cadherin表达上调,N-cadherin、Vimentin表达下调(P<0.01);而过表达HMMR后细胞迁移侵袭能力显著增强(P<0.01),并且N-cadherin、Vimentin表达上调,E-cadherin表达下调(P<0.01)。体内实验结果显示基因敲减HMMR的肝癌细胞导致的肺转移病灶数显著低于对照组(P<0.05);过表达HMMR后p-MEK和p-ERK表达上调(P<0.01),而MEK、EKR无明显变化(P>0.05)。MEK抑制剂削弱了过表达HMMR介导的细胞的迁移侵袭(P<0.01)。结论HMMR在肝癌中高表达并且可能通过调控MEK/ERK信号通路从而促进肝细胞癌侵袭转移。
- 李逊严娇蔡顺礼陈华剑
- 关键词：肝细胞癌上皮-间质转化
- 蛋白酶激活受体2对肝癌细胞增殖及凋亡的影响被引量：1
- 2019年
- 目的探讨蛋白酶激活受体2(protease activated receptor 2,PAR2)对肝癌细胞增殖及凋亡的影响。方法 RT-qPCR检测100例肝癌组织及相应的癌旁组织中PAR2 mRNA的表达,并分析肝癌患者临床病理参数与PAR2表达水平之间的相关性。RT-qPCR及Western blot检测原代肝细胞、永生化肝细胞及肝癌细胞中PAR2 mRNA及蛋白的表达。采用siRNA靶向沉默PAR2的表达,MTS法及软琼脂集落形成实验检测沉默PAR2对肝癌细胞增殖的影响,流式细胞术及PARP的剪切检测沉默PAR2对肝癌细胞凋亡的影响。RT-qPCR筛选PAR2调控的凋亡靶基因,并用Western blot进行验证。结果肝癌组织中PAR2 mRNA的相对表达量为(1.86±1.26),明显高于癌旁组织(0.96±0.66,P<0.001),且PAR2在肝癌组织中表达上调与肿瘤的长径以及分期均相关(P=0.002)。PAR2在肝癌细胞中的表达高于永生化肝细胞和原代肝细胞(P<0.05)。沉默PAR2抑制肝癌细胞SK-Hep-1和PLC/PRF/5的活性(P<0.01)及集落形成能力(P<0.01),沉默PAR2导致SK-Hep-1和PLC/PRF/5细胞凋亡比例分别增加109%(P<0.01)和112%(P<0.01);且沉默PAR2增加了Bax mRNA和蛋白表达水平。结论 PAR2可通过影响Bax的表达而影响肝癌细胞的增殖与凋亡。
- 张薇陈华剑
- 关键词：蛋白酶激活受体2肝癌细胞细胞增殖细胞凋亡
