钞安军
- 作品数:18 被引量:38H指数:4
- 供职机构:河南农业大学更多>>
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- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 表达猪圆环病毒Ⅱ型ORF2基因的重组猪伪狂犬病病毒的免疫原性
- 将PCV2 ORF2基因插入到PRV通用载体pG中,利用脂质体LipofectamineTM2000试剂盒将重组转移质粒pGO与猪PRV弱毒HB98株DNA共转染猪睾丸(ST)细胞,通过3轮蚀斑纯化重组病毒。将重组病毒、...
- 陈红英崔保安钞安军付朋飞郭晓庆高晓云
- 关键词:灭活疫苗基因重组猪伪狂犬病病毒免疫效力
- 文献传递
- 猪圆环病毒2型和猪细小病毒混合感染的PCR检测被引量:1
- 2013年
- 2012年9月河南省新乡市某养猪场发生一例以初产母猪流产、死产,断奶仔猪精神沉郁、呼吸困难、食欲不振、轻微腹泻、渐进性消瘦为特征的疾病。采用PCR技术进行检测,结果表明猪圆环病毒2型和猪细小病毒均为阳性,结合发病情况、临床症状及剖检变化,初步确定为PCV2和PPV混合感染。
- 吴宇阳陈龙彪王林青崔保安卢权威钞安军李坤陈红英魏战勇
- 关键词:猪圆环病毒2型猪细小病毒PCR检测
- 表达猪圆环病毒Ⅱ型ORF2基因的重组猪伪狂犬病病毒的免疫原性
- 将PCV2 ORF2基因插入到PRV通用载体pG中,利用脂质体LipofectamineTM 2000试剂盒将重组转移质粒pGO与猪PRV弱毒HB98株DNA共转染猪睾丸(ST)细胞,通过3轮蚀斑纯化重组病毒。将重组病毒...
- 陈红英崔保安钞安军付朋飞郭晓庆高晓云
- 关键词:ORF2基因伪狂犬病病毒重组病毒免疫效力
- 文献传递
- 表达猪圆环病毒Ⅱ型ORF2基因的重组猪伪狂犬病毒毒株及其制备方法
- 本发明公开了一种表达猪圆环病毒Ⅱ型ORF2基因的重组猪伪狂犬病毒毒株,重组猪伪狂犬病毒(Herpesviridae)毒株,CCTCC NO:V201315。本发明将 PCV2 ORF2基因插入到通用载体PG中,构建了转移...
- 陈红英崔保安钞安军郑兰兰朱前磊魏战勇李新生李坤
- 文献传递
- 猪细小病毒河南地方株HP104的分离与生物学特性鉴定被引量:3
- 2013年
- 采用PCR方法对河南采集的疑似PPV病料进行PCR检测,PCR检测为阳性的病料接种猪睾丸细胞,分离到1株病毒,命名为HP104。通过观察细胞病变(CPE)、病毒滴度TCID50和血凝效价的测定、理化特性试验等研究病毒的特性,利用电镜观察病毒的形态,NSI基因PCR扩增及测序分析。该病毒在sT细胞上连续盲传10代后,细胞出现了较稳定的CPE,传代至第15代时病毒血凝效价基本稳定为2,到第20代时TcID50达到10TCID/0.1mL左右。该毒株对热、pH3.0酸、氯仿、胰蛋白酶有抗性。在电镜下可观察到近似球形的病毒粒子,大小约23~26nm。PCR扩增产物与预期一致,与其他PPV毒株NSI基因序列同源性高达99%以上。该病毒特征与猪细小病毒特征基本相符,初步证实分离的病毒为猪细小病毒。
- 吴宇阳陈龙彪崔保安王林青卢权威钞安军李坤魏战勇陈红英
- 关键词:猪细小病毒
- 猪α-干扰素复合制剂的制备方法
- 本发明公开了一种猪α-干扰素复合制剂的制备方法,它的步骤如下:(1)人工合成150bp的短小乳酸杆菌信号肽序列,构建出pUCK-SP载体;(2)构建出pUCK-SP-IFN-α质粒,pUCK-SP-IFN-α质粒经<I>...
- 陈红英崔保安李坤马世杰魏战勇钞安军李新生
- 文献传递
- 猪TOLL样受体7全基因的扩增、克隆及生物信息学分析被引量:4
- 2013年
- 根据猪Toll样受体7基因(TLR7)序列设计、合成1对引物,直接从三元猪外周血淋巴细胞中提取总RNA,应用RT-PCR技术扩增三元猪TLR7全基因,并进行克隆和测序。测序结果表明,获得了三元猪TLR7全基因序列,其大小为3 160 bp,包含一个完整阅读框(3 153 bp),编码1 051个氨基酸残基,有15个潜在的N-糖基化位点和4个潜在的磷酸化位点,信号肽切割部位位于第29~30位氨基酸之间,跨膜基因序列为第844~866位。TLR7基因存在种属的差异性,亲缘关系越近,同源性越高。三元猪TLR7基因的成功克隆为进一步研究猪TLR7基因表达、生物学功能、揭示ssRNA病毒入侵宿主的致病机制以及猪抗病毒免疫及育种的相关研究奠定了基础。
- 钞安军吴宇阳李坤卢权威崔保安陈红英
- 关键词:三元猪克隆进化分析
- 猪细环病毒两种基因型双重PCR检测方法的建立被引量:3
- 2013年
- 为建立检测猪细环病毒两种基因型(PTTV1和PTTV2)的双重PCR方法,本研究根据GenBank中PTTV1、PTTV2的UTR基因序列,设计合成了2对特异引物,并通过对扩增条件的筛选,建立了PTTV1和PTTV2的双重PCR检测方法。该方法可以同时扩增PTTV1的324 bp和PTTV2的522 bp特异性片段,而扩增猪圆环病毒2型和猪细小病毒DNA结果均为阴性,对PTTV1和PTTV2的最低检出量分别为100 copies和10 copies。该方法适合对PTTV1和PTTV2的联合检测。
- 李坤钞安军王子馨王淑娟朱前磊吴宇阳卢权威陈红英
- 关键词:双重PCR
- 一种鸡传染性喉气管炎双价核酸疫苗及其制备方法
- 本发明公开了一种鸡传染性喉气管炎双价核酸疫苗,在真核表达载体pIRES的2个多克隆位点中分别插入了ILTV HN1株gB和ChIL-18完整基因,所述双价核酸疫苗共表达鸡传染性喉气管炎病毒gB基因和鸡IL-18基因。本发...
- 陈红英崔保安魏战勇邵攀峰刘金朋王淑娟朱前磊王子馨钞安军
- 文献传递
- 表达猪圆环病毒Ⅱ型ORF2基因的重组猪伪狂犬病病毒的免疫原性被引量:13
- 2014年
- 【目的】为研制预防猪圆环病毒II型(PCV2)感染的重组伪狂犬病病毒(PRV)活载体疫苗。【方法】将PCV2 ORF2基因插入到PRV通用载体pG中,利用脂质体LipofectamineTM2000试剂盒将重组转移质粒pGO与猪PRV弱毒HB98株DNA共转染猪睾丸(ST)细胞,通过3轮蚀斑纯化重组病毒。将重组病毒、商品化PCV2灭活苗及DMEM培养液分别免疫6周龄雌性昆明小鼠,4周后加强免疫1次,首免后第8周用PCV2强毒NY株对小鼠进行攻毒。【结果】成功获得表达ORF2基因的重组病毒PGO,首免重组病毒后小鼠体内抗PCV2的ELISA抗体水平很低,二免后小鼠PCV2特异的ELISA抗体水平明显升高,并且重组病毒组能够激发PCV2特异的淋巴细胞增殖效应。攻毒试验表明重组病毒组和PCV2灭活疫苗组均能有效抵抗PCV2强毒攻击。【结论】表明表达ORF2基因的重组病毒PGO具有良好免疫原性。
- 钞安军付朋飞郭晓庆高晓云崔保安陈红英
- 关键词:猪圆环病毒II型ORF2基因伪狂犬病病毒重组病毒免疫效力