郭庆民
- 作品数：9 被引量：56H指数：5
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程更多>>
- 钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ的制备与活性测定被引量：1
- 2001年
- 目的 从牛心肌中提取纯化钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ (CaMKⅡ )，并测定其活性。方法 采用 DEAE- cellulose柱层析和 Sepharose 4B亲和层析分离纯化蛋白，用γ- 32P掺入法测定 CaMKⅡ及自磷酸化的 CaMKⅡ活性。 结果从牛心肌中提取到钙调蛋白结合的蛋白组分，纯化后得到的 CaMKⅡ比较稳定，产量也较高。此过程比较简单，适合大量制备。经 SDS- PAGE检测，发现酶提取物均质，酶亚基的目的蛋白带相对分子质量为 56 000。在 syntide- 2为底物的反应中，纯化的 CaMKⅡ的特异性酶活性为 7.84 pmol· min－ 1· mg－ 1。 CaMKⅡ可自磷酸化，经过自磷酸化的酶在 Ca2＋和钙调蛋白不存在时也保持活性。结论 通过凝胶层析与亲和层析可提纯 CaMKⅡ。
- 郭庆民孟爱民杨京刘景生
- 关键词：活性测定凝胶层析
- 阿片类药物对NG108-15细胞Ca^(2+)/钙调蛋白依赖的蛋白激酶II信息通路的作用被引量：8
- 2001年
- 目的 观察阿片类依赖时Ca2 + 钙调蛋白依赖的蛋白激酶II信息通路的变化。方法 以NG10 8 15细胞作为体外的细胞模型 ,分别用竞争性蛋白结合法及放射免疫法、PDE法、γ 32 P参入法测定cAMP水平、钙调蛋白(CaM)活性和钙调蛋白依赖的蛋白激酶II(CaMKII)活性。结果 DPDPE作用NG10 8 15细胞 48h可使细胞浆和细胞核CaM和CaMKII活性升高 ,该变化可被CaM特异性拮抗剂W 7所抑制 ;CaMKII特异性抑制剂KN 6 2可抑制CaMKII活性的增高 ,而对CaM活性无明显影响。DPDPE作用NG10 8 15细胞 48h后 ,加入纳洛酮 ,CaM活性、CaMKII活性进一步增高。结论 Ca2 + CaMKII信息通路参与了阿片依赖的机制。
- 郭庆民刘景生
- 关键词：阿片类药物钙调蛋白NG108-15细胞
- Ca2+/Calmodulin、Calmodulin Kinase信息通路在NG108-15细胞阿片类依赖中的作用
- 本研究利用δ阿片受体激动剂DPDPE长时程作用于NG108-15细胞建立的阿片类依赖的体外细胞模型,选择不同浓度的δ阿片激动剂DPDPE及其与纳洛酮配伍、与CaM抑制剂W-7及CaMK抑制剂KN-62,共同长时程作用NG...
- 郭庆民刘景生
- 文献传递
- Ca～（2+）//钙调蛋白依赖的蛋白激酶Ⅱ信息通路在阿片依赖的受体信号转导机制中的作用
- 药理学研究证明存在三种主要的阿片受体，阿片类药物的镇痛作用是由这些受体亚型的作用介导。阿片类药物的显著特点是可以产生药物的耐受依赖和成瘾，其细胞和分子生物学的机制已有大量研究和报道，但目前为止，尚不清楚。
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- 郭庆民
- 关键词：阿片依赖Δ-阿片受体
- 文献传递
- μ阿片受体功能调节被引量：11
- 2000年
- μ阿片受体识别选择性配基的区域还有争论 ,受体的TM内氨基酸的空间取向影响选择性配基的亲和性。阿片受体活性的调节可能并没有涉及到它们将GTP和G蛋白相联系的能力 ,以及相继的异源三聚体的解离能力。激动剂诱导的 μ受体的磷酸化与受体的脱敏是否相关尚无定论。μ受体细胞内过程需要形成多蛋白复合物 ,形成受体信号复合物的细胞蛋白募集很重要。通用转录因子之间的相互作用决定受体基因的转录是很明确的。
- 郭庆民孟爱民刘景生
- 关键词：受体
- Ca^2＋／Calmodulin、Calmodulin Kinase信息通路在NG108—15细胞阿片依赖中的作用
- 2000年
- 郭庆民刘景生
- 关键词：NG108-15细胞阿片类依赖CA^2+/CAM信息通路
- 一氧化氮合酶基因转移在心血管疾病治疗中的研究进展被引量：5
- 2000年
- 基因治疗包括功能基因转移至宿主细胞 ,用于校正特定基因的功能缺陷或减轻疾病的症状。对于心血管疾病的基因转移 ,腺病毒载体最有效。该文从方法学上回顾了血管NOS基因转移领域的最新进展以及NOS基因转移对重要心血管疾病的潜在应用。NOS基因转移方法在动物模型中具有可行性 ,但是 ,当前可用的载体还有许多技术和安全限制。
- 郭庆民刘景生
- 关键词：一氧化氮合酶基因转移心血管疾病基因治疗
- Ca^(2+)/钙调蛋白依赖的蛋白激酶Ⅱ信息通路在DPDPE长时程作用的NG108-15细胞中的作用被引量：8
- 2002年
- 目的 观察阿片类依赖时Ca2 + /钙调蛋白依赖的蛋白激酶Ⅱ (CaMKⅡ )信息通路的变化 ,以及Ca2 + /CaMKⅡ信息通路与cAMP水平之间的关系。方法 以NG10 8 15细胞作为体外的细胞模型 ,分别采用竞争性蛋白结合法及放射免疫法、PDE法、γ 3 2 P参入法以及RT PCR测定cAMP水平、钙调蛋白 (CaM)活性、CaMKⅡ活性和mDOR的mRNA表达水平的变化。结果 DPDPE长时程作用NG10 8 15细胞 ,cAMP水平升高 ,形成阿片依赖 ;细胞CaM活性和CaMKⅡ活性也升高 ,该升高可被CaM拮抗剂W 7所抑制 ,而CaMKⅡ活性的升高可被CaMKⅡ特异性抑制剂KN 6 2所抑制。W 7或KN 6 2可抑制阿片依赖导致的细胞cAMP水平的升高。阿片依赖时 ,加入纳洛酮诱发戒断 ,CaM活性、CaMKⅡ活性进一步增高。而在阿片依赖时 ,δ阿片受体的mRNA表达水平无明显变化。结论 Ca2 + /钙调蛋白依赖的蛋白激酶Ⅱ信息通路可通过调节cAMP水平参与阿片依赖的机制。
- 郭庆民刘景生
- 关键词：阿片类药物NG108-15细胞钙调蛋白信息通路CAMP
- 土鳖虫对红细胞变形性和膜成分的影响被引量：22
- 2000年
- 目的 :研究土鳖虫粉对大鼠红细胞变形性和红细胞膜成分的影响。方法 :给大鼠灌胃土鳖虫粉1次 /d ,15d ,测定大鼠红细胞压积 ,红细胞变形性 ,红细胞膜的MDA、胆固醇含量和膜胆固醇 /磷脂比值。结果 :土鳖虫可降低高脂大鼠红细胞压积 ,增强红细胞变形能力并降低红细胞膜MDA、胆固醇含量和膜胆固醇 /磷脂比值。结论 :土鳖虫增强红细胞变形能力 ,这可能与其降低红细胞膜MDA、胆固醇含量和胆固醇 /磷脂有关。
- 郭庆民刘继兰王菊英周序斌
- 关键词：土鳖虫红细胞变形性药理
