郭仁
- 作品数：35 被引量：65H指数：5
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：云南省应用基础研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 合成DNA片段的分离及连接
- 1989年
- 研究设计了一段带终止信号的DNA序列,通过DNA合成仪分为四个片段合成。本文介绍经DNA合成仪合成DNA片段后的处理,纯化及连接过程.经测定DNA的连接效率在65％左右。
- 张建文何俊王虹翟朝阳杨迪刘洪岩杜丹萍胡凝珠郭仁
- 关键词：DNA片段基因工程
- 人白细胞介素-6基因的克隆表达和纯化的研究被引量：6
- 1999年
- 目的：研究人ＩＬ６基因在大肠杆菌中的高效表达及表达产物的纯化。方法：采用ＲＴ－ＰＣＲ方法克隆了人ＩＬ６ｃＤＮＡ，用ｐＢＶ２２０载体对ＩＬ６基因进行了表达调控研究，用阴离子交换柱和凝胶柱对表达产物进行纯化，用ＭＴＴ法测定ｒｈＩＬ６的活性。结果：表达调控研究发现，当ＳＤ序列到ＡＴＧ之间的距离为６ｂｐ和１０ｂｐ时在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ胶上未见明显表达，而当距离为５ｂｐ、７ｂｐ、８ｂｐ、９ｂｐ时均可获高效表达，最高表达量占菌体总蛋白的２６％。表达产物经变性复性及纯化后产品纯度达９８％，比活性为１１×１０８Ｕ／ｍｇ。
- 刘红岩马雁冰李智华姬秋彦李健峰周丽郭仁戴长柏
- 关键词：基因克隆基因表达纯化
- 以痘苗病毒为载体研制重组疫苗的进展
- 1993年
- 痘苗病毒作为真核表达载体已广泛应用于外源基因的表达,并日益受到重视。本文综述痘苗病毒的生物学特性及作为表达载体的可能性,重组痘苗病毒的构建原则及外源基因的表达情况。
- 刘金辉戴长柏郭仁
- 关键词：痘苗病毒重组疫苗疫苗
- 脊髓灰质炎病毒与痘苗病毒重组体的构建及表达
- 1991年
- 含脊髓灰质炎病毒1型(简称 PV1)全基因7.4Kb cDNA 和编码 PV1外壳蛋白 VP12.5Kb 的 cDNA 片段的两株重组痘苗病毒(RV-1和 RV-2)表达了 PV1抗原。经荧光标记的抗 PV1型特异性单克隆抗体检测,感染了 RV-1和 RV-2的 Herp-2细胞呈阳性荧光反应。免疫印迹实验证实两株重组痘苗病毒分别表达 PV1抗原三条和两条特异性蛋白带。免疫家兔后能诱导产生抗 PV1中和抗体。本文对重组病毒表达 PV1抗原的效率进行了初步讨论。
- 戴长柏李奇涵袁天喜胡凝珠苏晔郭仁候云德
- 关键词：脊髓灰质炎病毒
- 云南省昭通市婴幼儿急性胃肠炎中轮状病毒的研究被引量：1
- 1989年
- 本文报道应用PACE、EM、ELISA检测技术,对1982年10月到1985年12月间采自云南省昭通市的婴幼儿急性胃肠炎患者大便标本中的A组轮状病毒(RV)和腺病毒(Adv)的研究结果。从309例标本中共检出169例含有RV,阳性率为54.7％。在不同性别间RV检出率没有显著差异。RV>6月～24月龄患儿组中的检出率(59.1％)显著高于(?)6月龄患儿组(33.3％)(P<0.01)。10月至1月是PV胃肠炎流行的高峰季节,在这一季节中RV的检出率(65.1％)显著高于其它季节(P<0.001)。对RV基因RNA的分子流行病学研究发现,1984年2月至1985年12月间在昭通市流行的RV全为第二亚组。Adv在婴幼儿急性胃肠炎中的检出率为16.7％。结果表明,RV是昭通市婴幼儿急性胃肠炎的主要病原体,它的流行具有明显的季节性。
- 陈元鼎张惠芬孙茂盛丁雪凤戴国珍万新邦王丽春李家喜苏晔郭仁陈孝贤
- 关键词：胃肠炎轮状病毒婴幼儿
- 从粘粒文库分离目的基因的简便方法
- 1997年
- 改良了粘粒（ｃｏｓｍｉｄ）文库分离目的基因的第二次筛选方法用一张硝酸纤维素（ＮＣ）膜，接种近百个初筛阳性菌落，进行第二次筛选获得的三个阳性信号，复筛全部为阳性克隆节约了昂贵的ＮＣ膜。
- 王立言郭仁李鸿钧胡方戴长柏陈淑范
- 关键词：分子克隆粘粒文库原位杂交基因工程
- BALB/c系小鼠自发性乳腺癌的含C型病毒粒子细胞系的建立
- 1991年
- “BMAC”是一株BALB/c系小鼠的含C型病毒颗粒的乳腺癌细胞系,已传112代。细胞呈梭形,最高分裂指数为49‰,细胞增殖迅速且稳定,染色体数目为拟二倍体,众数为40～41。同种移植率100％(15/15),其形态和组织结构与原发肿瘤相似,仍然保持原发肿瘤的生物学特性。
- 唐恩华刘名英阮永良庄俊英徐维明罗其胜郭仁
- 关键词：乳腺癌细胞系BALB/C病毒粒子原发肿瘤细胞超微结构病毒颗粒
- 水蛭素变异体I基因的合成及其在酵母中表达的初步研究被引量：5
- 1998年
- 目的将水蛭素基因转入酵母系统中进行表达，以评价人工合成基因在真核系统中表达的可行性和探讨影响表达水平的因素。方法根据水蛭素变异体Ｉ（ＨＶ１）的氨基酸序列，选择酿酒酵母偏爱的密码子，设计了ＨＶ１基因。将ＨＶ１基因分１２个寡核苷酸片段，进行人工合成，并连接成一个完整的水蛭素基因。经ＰＣＲ扩增后，将扩增产物连到克隆载体ｐＢＳ－ＳＫ（＋）上并进行ＤＮＡ序列分析。用正确的ＨＶ１基因与酵母α因子信号肽基因相连，并一起插入酵母表达载体ｐＹＣ－ＤＥ，经鉴定表明，获得正确的重组表达质粒。将后者转入酿酒酵母ＢＪ１９９０细胞进行初步表达。结果在筛选出的阳性克隆的培养上清中，检测出的水蛭素活性为３０抗凝血酶单位（ＡＴＵ）／ｍｌ。所表达的量高于ＨＶ２在酵母中和ＨＶ１在原核系统的表达水平。Ｎ末端氨基酸序列与天然水蛭素一致。结论采用人工合成的ＨＶ１基因和较强的启动子在酵母中进行表达是一较好途径。
- 昝云红孙茂盛郭仁代长柏
- 关键词：水蛭素基因合成酿酒酵母
- 应用单克隆抗体检测猕猴淋巴细胞亚群
- 1992年
- 应用单克隆抗体检测淋巴细胞表面抗原,是近年来发展起来的一项新技术。这一方法特异性强,结果准确,已得到广泛重视。检测猕猴T细胞表面抗原可获得淋巴细胞分化和功能性亚群的资料,不仅有助于了解猕猴兔疫功能及其与疾病的关系,而且通过与人类T细胞表面抗原比较,在研究灵长类进化及其与人类亲缘关系上也有很大价值。现将我们采用免疫荧光方法检测猕猴T细胞亚群的结果报告如下。材料和方法1.研究对象健康猕猴14只,年龄3～8岁,雄性4只,雌性10只。2.试剂实验中采用的单克隆抗体列于表1,所有单克隆抗体及兔抗鼠异硫氰酸荧光素(FITC)荧光抗体均由史良如教授惠赠3.猕猴淋巴细胞的分离取猕猴静脉血2ml,肝素抗凝,加Ficoll-Hypaque(比重1.077)分层液,离心(1800rpm)20分钟,分离淋巴细胞后,用含5%
- 曲京华褚嘉佑张和君龚春梅郭仁
- 关键词：单克隆抗体检测细胞表面抗原免疫荧光方法淋巴细胞分化FICOLL人体外周血
- 用免疫荧光McAb对286株脊髓灰质炎病毒标本进行定型诊断
- 1991年
- 用PcAb血清NT与F-McAb IF对286株Polio Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型病毒进行定型,结果两者的符合率Ⅰ型为100％,Ⅱ型和Ⅲ型均为99％。Ⅰ型与Ⅱ、Ⅲ型符合率的微小差异,可能是实验技术上的误差所致,也可能是McAb本身识别抗原表位的局限性所致。提示要得到真正理想的型特异McAb,必须用大量有代表性的毒株进行交叉试验。本试验证明,F-McAb IF可以代替PcAb参考血清NT作为Polio病毒的定型方法。IF比NT简单、快速、特异和敏感,是组装试剂盒的理想材料。
- 唐恩华庄俊英刘名英阮永良王宪焘谢天宏王立言文喻呤秦红星郭仁
- 关键词：脊髓灰质炎病毒单克隆抗体
