郝建军
- 作品数：64 被引量：203H指数：9
- 供职机构：第四军医大学口腔医学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 小鼠釉丛蛋白成熟肽编码区cDNA克隆被引量：1
- 2000年
- 目的 :克隆小鼠釉丛蛋白 (tuftelin)成熟肽编码区基因。方法 :设计引物 ,以小鼠牙胚cDNA文库为模板 ,利用PCR方法 ,扩增出小鼠釉丛蛋白成熟区的基因片段 (约 12 0 0bp) ,将所得基因片段插入pBS质粒载体 ,转化到大肠杆菌XL - 1-Blue后挑选阳性克隆 ,提取重组质粒DNA ,通过限制性酶切和部分核苷酸序列分析鉴定阳性克隆。结果 :重组质粒pBS -tuftelin的酶切图谱和序列分析结果与国外文献报道一致。结论 :克隆到小鼠釉丛蛋白成熟肽编码区基因。
- 顾淑萍郝建军史俊南费俭王丽珍吴补领肖明振刘正江卫民
- 关键词：CDNA聚合酶链反应小鼠
- 永生化细胞株的建立
- 2002年
- 建立永生化细胞株是细胞生物学的新进展。除了自发性永生化,人们通常将外源性永生化基因,包括病毒、原癌基因和p53突变体,通过基因转染技术导入目的细胞内,建立永生化细胞株。永生化的机理基于细胞的M1/M2期模式。目前已建立起十余种口腔医学相关永生化细胞株,但它们具有一定的局限性。
- 王捍国郝建军肖明振赵守亮
- 关键词：永生化细胞株基因转染细胞生物学口腔医学
- 碱性成纤维细胞生长因子对培养的人牙周膜细胞增殖和分化的作用被引量：6
- 2003年
- 目的 :观察人重组碱性成纤维细胞生长因子 (hu manbasicfibroblastgrowthfactor,hbFGF)对人牙周膜细胞(periodontalligamentcells,PDLC)增殖和分化的效应 .方法 :对hbFGF (5 0 μg·L-1 )刺激后 3,9,1 5和 2 1d的细胞进行计数 ,同时行HE和免疫组织化学染色 .结果 :hbFGF (5 0 μg·L-1 )可促进PDLC细胞生长 ,在培养的 3,9,1 5和 2 1d时 ,其细胞计数分别是 38× 1 0 3 ,80× 1 0 3 ,1 0 6× 1 0 3 ,99× 1 0 3 .但不改变PDLC的形态和生长方式 ;与对照组相比PDLC的ConA ,WGA凝集素受体表达无差异 .两组细胞均未出现钙化现象 .结论 :hbFGF可促进体外PDLC的增殖 。
- 王宇钱凤兰汪平杨亚宁郝建军
- 关键词：碱性成纤维细胞生长因子牙周膜细胞凝集素受体体外
- 小鼠成釉蛋白成熟肽编码区cDNA序列的克隆被引量：1
- 1999年
- 目的：克隆小鼠成釉蛋白（ＡＭＢＮ）成熟肽编码区基因。方法：用异硫氰酸胍一步法从昆明新生小鼠磨牙牙胚组织中抽提总ＲＮＡ，用Ｏｌｉｇｏ（ｄｔ）作引物逆转录合成牙胚ｃＤＮＡ，然后利用ＰＣＲ方法，从ｃＤＮＡ中扩增出小鼠成釉蛋白成熟区的基因片段（约１．１ｋｂｐ），将所得基因片段插入ｐＴＺ１８质粒载体，转化到大肠杆菌ＤＨ５α后挑选阳性克隆，提取重组质粒ＤＮＡ，通过限制性酶切和核苷酸序列分析鉴定阳性克隆。结果：重组质粒ｐＴＺ－ＡＭＢＮ的酶切图谱和部分序列分析结果与国外文献报道一致。
- 江卫民史俊南郝建军郝建军顾淑萍麻孙恺顾淑萍郭礼和
- 关键词：CDNA聚合酶链反应
- 人成牙本质细胞样细胞的原代培养被引量：17
- 2002年
- 目的 :培养人原代成牙本质细胞。方法 :取引产的 8月龄死胎 ,剥离乳磨牙胚牙乳头 ,组织块法培养。然后采用滤纸片法挑取了 3个与成牙本质细胞形态相似的细胞克隆 ,扩大培养。对培养细胞从形态学、矿化结节、碱性磷酸酶 (alkalinephosphatase,ALP)活性、人牙本质基质蛋白 - 1(humandentinmatrixprotein- 1,hDMP - 1)和人牙本质涎磷蛋白 (humandentinsialophosphoprotein ,hDSPP)在mRNA水平上的表达等方面进行鉴定。结果 :有一个克隆来源的细胞呈梭形、有单侧较长细胞突起 ,未见核极化 ,同时它们具矿化功能 ,表达人成牙本质细胞特异性标志hDMP - 1、hDSPPmRNA。结论 :该培养细胞为人成牙本质细胞样细胞 ,为进一步的有关研究奠定了基础。
- 王捍国肖明振赵守亮郝建军
- 关键词：成牙本质细胞细胞培养
- 羟基磷灰石、氢氧化钙对鼠牙髓细胞碱性磷酸酶活性的影响被引量：2
- 1997年
- 目的：检测羟基磷灰石和氢氧化钙颗粒对鼠原代牙髓细胞碱性磷酸酶活性的影响。方法：采用０．５％胰酶－０．１％ＥＤＴＡ消化法获取ＳＤ鼠原代牙髓细胞。细胞接种后，分别加入氢氧化钙和羟基磷灰石颗粒（＜５０μｍ），在７ｄ或１４ｄ分别测定鼠原代牙髓细胞的碱性磷酸酶活性。结果：氢氧化钙抑制牙髓细胞碱性磷酸酶活性与其高浓度抑制细胞生长有关；羟基磷灰石具有良好的生物相容性，但其能够显著抑制牙髓细胞碱性磷酸酶的活性，抑制率（０．６ｍｇ／ｍｌ）在７ｄ时为５４．６％，１４ｄ时为４９．０％。结论：羟基磷灰石颗粒的作用可能与牙髓细胞去分化过程有关，两种材料对牙髓细胞的活性存在着不同的作有机制。
- 荀文兴唐文杰唐文杰岳玲郝建军
- 关键词：牙髓治疗术羟基磷灰石氢氧化钙碱性磷酸酶
- 小鼠牙本质涎磷蛋白成熟蛋白编码区cDNA克隆与部分序列分析被引量：5
- 1999年
- 目的 克隆小鼠牙本质涎磷蛋白 (dentinsialophosphoprotein ,DSPP)成熟蛋白编码区基因。方法 用异硫氰酸胍一步法从昆明新生小鼠磨牙牙胚组织中抽提总RNA ,用Oligo(dt)作引物逆转录合成牙胚cDNA ,然后利用PCR方法 ,从cDNA中扩增出小鼠DSPP成熟区的基因片段 (约 3kbp) ,将所得基因片段插入pBluescriptKS质粒载体 ,转化到大肠杆菌XL1 Blue后挑选阳性克隆 ,提取重组质粒DNA ,通过限制性酶切和核苷酸序列分析鉴定阳性克隆。结果 重组质粒pBS DSPP的酶切图谱和部分序列分析结果与国外文献报道一致。结论 克隆到小鼠DSPP成熟编码区基因 ,正在进行该基因的表达和活性鉴定。
- 郝建军汪平麻孙恺江卫民费俭刘正
- 关键词：磷蛋白类牙本质CDNA
- 人牙本质涎磷蛋白成熟肽cDNA的克隆、序列分析和原核表达被引量：1
- 2002年
- 目的 克隆人牙本质涎磷蛋白 (DSPP)成熟肽编码区基因片段并进行原核表达 .方法 用异硫氰酸胍一步法从人牙乳头组织中抽提总 RNA,用 Oligo(dt)作引物逆转录合成牙乳头 c DNA,然后利用 PCR法 ,从 c DNA中扩增出人DSPP成熟肽基因片段 (约 6 0 0 bp) ,将所得基因片段插入p Bluescript质粒载体 ,转化到大肠杆菌 XL 1- Blue后挑选阳性克隆 ,提取重组质粒 DNA,通过酶切分析和核苷酸序列分析鉴定阳性克隆 ;将 DSPP基因重组入表达载体 p GEX- 3X中构建表达载体 ,并在大肠杆菌 BL 2 1中进行表达 .结果 酶切图谱和序列分析与国外文献报道一致 ,DSPP蛋白在大肠杆菌中得到表达 .结论 克隆到人 DSPP成熟肽编码区基因片段 ,并在原核中得到表达 ,为进一步研究其功能奠定基础 .
- 张莹史俊南顾淑萍汪平郝建军费俭
- 关键词：牙本质涎磷蛋白基因克隆原核表达成熟肽
- 光固化型与化学固化型玻璃离子水门汀细胞毒性的比较被引量：3
- 1998年
- 目的：检测玻璃离子水门汀的细胞毒性，比较人牙周膜成纤维细胞、牙髓成纤维细胞和标准细胞株Ｌ９２９的敏感性。方法：用四唑盐（ＭＴＴ）显色法观察４种光固化型和化学固化型玻璃离子水门汀浸渍液的原液、１／２原液、１／４原液、１／８原液４个浓度对３种细胞的毒性作用。结果：光固化型玻璃离子水门汀Ｖｉｔｒｅｂｏｎｄ、化学固化的ＧＩ－１浸渍液的原液和１／２原液有较强的毒性，与对照组相比差别显著。其余两种和ＧＩ－１浸渍液的１／４原液和１／８原液呈较弱的体外细胞毒性。并且４种材料对３种细胞的毒性结果一致。结论：玻璃离子水门汀的细胞毒性与固化方式没有直接关系，原代培养的人牙周膜成纤维细胞。
- 郝建军李晨军史俊南于宏王鑫源洪法廉
- 关键词：玻璃离子水门汀细胞毒性MTT法
- 牛肌腱胶原凝胶体在人牙髓成纤维细胞等原代培养中的应用被引量：14
- 1994年
- 在铺有牛肌腱胶原玻璃培养瓶中进行人牙髓和牙周组织原代培养，牙髓和牙周组织的成功率分别为９／２１和５／１５，与不铺胶原的对照组（１／２１和０／１５）相比有显著差异（Ｐ＜０．０１和Ｐ＜０．０５）。这可能是细胞特异的高亲和力受体与胶原结合，使两者成为一个整体，增加了组织块贴壁率和细胞培养的成功率。本研究提示牛肌腱胶原铺制技术可以大大提高人牙髓和牙周组织培养的成功率。
- 郝建军汪平史俊南张郁孙叶芳
- 关键词：胶原牙髓成纤维细胞牙周膜
