郝凤霞
- 作品数：5 被引量：16H指数：2
- 供职机构：中国医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金辽宁省教育厅资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 染色质重塑因子1在肺癌中过表达并促进肺癌增殖能力被引量：4
- 2014年
- 目的检测染色质重塑因子1(Rsf-1)对肺癌增殖能力的影响,初步探讨Rsf-1促进肺癌增殖的分子机制。方法应用Western blot方法筛选Rsf-1高表达人肺癌H1299、H460细胞系,通过小干扰RNA(si RNA)方法干扰内源性Rsf-1表达,并检测干扰效率。应用集落形成、流式细胞术检测Rsf-1干扰前后肺癌细胞增殖能力的变化。应用Western blot检测干扰内源性Rsf-1表达前后肺癌细胞中增殖相关因子的变化。结果 Western blot结果显示:肺癌细胞中Rsf-1蛋白表达水平明显高于正常支气管上皮HBE细胞系,其中H1299、H460细胞中存在非常明显的Rsf-1高表达。转染Rsf-1特异的si RNA于高表达Rsf-1的H1299和H460细胞后,其克隆形成明显少于对照组(H1299细胞中对照组和干扰组分别为123±15和83±9;H460细胞中对照组和干扰组分别为218±18和112±17)(P<0.05)。流式细胞术结果显示:干扰内源性Rsf-1表达后,H1299和H460细胞中G1期细胞比例增多(H1299细胞中对照组和干扰组分别为56%±5%和71%±7%;H460细胞中对照组和干扰组分别为53%±4%和70%±6%),S期细胞比例减少(H1299细胞中对照组和干扰组分别为17%±2%和11%±5%;H460细胞中对照组和干扰组分别为19%±2%和10%±5%)。细胞周期相关蛋白检测结果:干扰内源性Rsf-1表达后,H1299和H460细胞中cyclin D1和磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p ERK)水平明显下调。干扰Rsf-1在下调H1299和H460细胞p ERK蛋白表达的作用结果与应用细胞外调节蛋白激酶(ERK)抑制剂U0126相似。结论 Rsf-1可通过cyclin D1/ERK相关通路促进肺癌细胞的增殖。
- 张秀伟郝凤霞贺佳妮谢玲玲付琳董千泽李庆昌
- 关键词：肺癌小干扰RNACYCLIND1
- Wnt/β-catenin信号转导通路与肺腺癌顺铂耐药作用机制研究被引量：9
- 2014年
- 目的:探讨Wnt/β-catenin信号转导通路在肺腺癌顺铂耐药中的分子作用机制。方法:体外常规培养人肺腺癌A549细胞和其顺铂耐药A549/DDP细胞,取对数生长期的细胞用于实验。采用MTT法检测A549和A549/DDP细胞对顺铂的IC50;采用AnnexinⅤ/PI法和Hoechst 33342染色法检测顺铂处理后2种细胞的凋亡率;采用蛋白质印迹法检测2种细胞中β-catenin和Survivin的表达;采用siRNA干扰沉默β-catenin的表达,检测A549/DDP细胞的IC50值、细胞凋亡率及β-catenin和Survivin的表达。结果:顺铂对A549/DDP细胞的IC50值为(28.984±1.404)μmol/L高于A549细胞的(5.888±0.338)μmol/L,t=27.696,P<0.001;20μmol/L顺铂诱导A549/DDP细胞凋亡率为(21.75±0.96)%,显著低于A549细胞的(39.38±0.88)%,t=23.474,P<0.001。A549/DDP细胞中β-catenin蛋白的表达为1.890±0.060,显著高于A549细胞的1.063±0.035,t=20.595,P<0.001;在A549/DDP细胞中Survivin蛋白表达量为1.107±0.061,明显高于A549细胞的0.503±0.025,t=15.814,P<0.001。RNAi技术沉默β-catenin蛋白耐药性(14.615±0.939)μmol/L,显著低于未沉默β-catenin A549/DDP细胞的(28.984±1.404)μmol/L,t=14.732,P<0.001;RNAi技术沉默β-catenin蛋白细胞凋亡率为(37.57±0.64)%,显著高于未沉默β-catenin A549/DDP细胞的(21.75±0.96)%,t=23.699,P<0.001;RNAi技术沉默β-catenin蛋白下游靶基因Survivin蛋白的表达为0.527±0.065,显著低于A549/DDP组的1.027±0.025和瞬时转染阴性对照siRNA组的1.033±0.040,F=116.944,P<0.001。结论:抑制Wnt/β-catenin信号转导通路的活性可以降低A549/DDP细胞对顺铂的耐药性。
- 高原刘赞张秀伟贺佳妮潘泳岐郝凤霞谢玲玲李庆昌
- 关键词：Β-连环蛋白SURVIVIN顺铂耐药
- Rsf-1在肺癌中的表达及其对肺癌迁移侵袭能力的影响
- 前言 近年来肺癌发病率持续升高，已成为恶性肿瘤死因的第一位。而大部分肺癌患者死于肿瘤的转移和复发，因此发现肺癌侵袭、转移的关键靶点具有重要意义。 Rsf-1与hSNF2H形成染色质重塑复合物RSF，在这个复合物中Rs...
- 郝凤霞
- 关键词：肺癌信号途径
- 文献传递
- Rsf-1在非小细胞肺癌中的表达及意义被引量：2
- 2014年
- 目的:分析Rsf-1在非小细胞肺癌中的表达及与临床病理因素的关系。方法:应用Real-time PCR和免疫组化法检测非小细胞肺癌中Rsf-1的mRNA及蛋白表达情况。结果:有84%(21/25)肺癌组织病例中Rsf-1的mRNA含量明显高于对应的正常肺组织(P<0.001),肿瘤组织中Rsf-1的mRNA平均值是其癌旁正常肺组织均值的2.37倍。免疫组化结果显示68.4%(67/98)病例存在Rsf-1蛋白过表达,其过表达与肺癌患者的年龄、性别、肿瘤类型、原发肿瘤分级和淋巴结转移等未发现明显的相关性,而与肺癌的低分化和高p-TNM分期呈正相关(P=0.001;P=0.020)。结论:肺癌中存在Rsf-1基因的扩增和蛋白的高表达,并与低分化和高p-TNM分期相关。
- 张秀伟谢玲玲郝凤霞付琳董千泽李庆昌
- 关键词：非小细胞肺癌实时PCR免疫组织化学
- 肺腺癌细胞A549及其顺铂耐药细胞株A549/DDP中GSK-3β蛋白磷酸化水平的差异被引量：1
- 2013年
- 目的研究人肺腺癌细胞系A549和其顺铂耐药细胞系A549/DDP中GSK-3β的磷酸化和胞内分布以探讨GSK-3β在顺铂耐药中的作用。方法蛋白质免疫印迹法检测A549/DDP和A549细胞质和细胞核中总GSK-3β、p-GSK-3βser9和p-GSK-3βtyr6的表达。MTT法、流式细胞术分别检测顺铂耐药性、肺癌细胞凋亡率。结果 A549/DDP细胞胞质中p-GSK-3βser9水平明显高于A549细胞(P<0.01),顺铂的处理增加了A549/DDP细胞中p-GSK-3βser9的水平(P<0.01),相反却减少了A549细胞中p-GSK-3βser9的水平(P<0.01)。A549/DDP细胞质中p-GSK-3βtyr6水平明显低于A549细胞(P<0.01),顺铂的处理减少了A549/DDP细胞中p-GSK-3βtyr6的水平(P<0.01),却增加了A549细胞中p-GSK-3βtyr6的水平(P<0.01)。结论细胞质中GSK-3β活性受抑可能是非小细胞肺癌顺铂耐药的原因。
- 谢成耀高原张秀伟贺佳妮郝凤霞付琳王晓荣李庆昌
- 关键词：化疗耐药GSK-3Β
