邹昌勇
- 作品数:8 被引量:9H指数:2
- 供职机构:武汉生物制品研究所更多>>
- 发文基金:国家科技攻关计划“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域:医药卫生化学工程更多>>
- 低血清培养杂交瘤细胞及提高单克隆抗体产量的研究——Ⅰ、静止培养条件下的研究
- 1989年
- 单克隆抗体(McAb)在诊断,免疫纯化和治疗等领域的应用日益广泛,使得对McAb的需求量不断增加。小鼠腹水法简便易行,但腹水含有大量杂蛋白,包括小鼠正常Ig,这就给提纯工作带来了困难。所以目前多用体外培养法大量生产McAb。
- 魏林娜黄丹萍杜厚明邹昌勇董之昌
- 关键词:单克隆抗体杂交瘤细胞血清培养培养法小鼠
- 大规模提取体内治疗用单克隆抗体的工艺被引量:1
- 1998年
- 用两步法从WuT3细胞培养上清中提取WuT3单克隆抗体(McAb),首先将培养上清直接上SP离子交换柱,再上DEAE柱,获取提纯的McAb。该工艺的确定及放大均在Pharmacia产Biopilot中试纯化系统上进行。一次投料20L,纯化规模达2g,纯化的McAb经SDS-PAGE测定,纯度基本达到95%,免疫荧光活性为66±9%。热原质合格,支原体、残余DNA均为阴性,达到体内制剂质控要求。
- 詹骞邹昌勇雷继军冷武军陈明洁刘建朱俊铭喻远祥陈晓玲董之昌
- 关键词:单克隆抗体
- 治疗用抗HFRS病毒单克隆抗体质量分析
- 2001年
- 邹昌勇雷继军邬义安杜厚明喻远祥杨明赵良赵亚杰孙可芳
- 应用生物反应器大规模培养杂交瘤细胞生产体内治疗用WuT3单克隆抗体被引量:6
- 1998年
- 用3.5L和14L生物反应器培养WUT3杂交瘤细胞,结果表明用人血清可以代替牛血清培养WuT3细胞,在1%人血清培养液中添加适当营养成分,可达到10%小牛血清浓度下的细胞浓度(1.5×106/ml)和单抗产量(大于50μg/ml)。放大到75L生物反应器中采用半连续方式培养,建立了中试培养工艺流程和质控点,收获时细胞浓度为1.0×106~1.5×106/ml,单抗产量为40~70μg/ml,平均日产单抗达1g。在3.5L、14L、75L逐级放大培养过程中,细胞支原体为阴性,收获上清中单抗免疫活性合格,热原试验合格。
- 邹昌勇杜厚明冷武军朱俊铭喻远祥雷继军陈明洁齐建新杨明詹骞刘建陈晓玲董之昌
- 关键词:杂交瘤细胞单克隆抗体生物反应器
- WuT3无血清培养上清中单抗的纯化工艺建立
- 目的:对WuT3杂交瘤细胞无血清生物反应器培养上清中单克隆抗体进行分离纯化,建立中试分离纯化工艺。
方法:采用二步离子交换层析法结合硫酸铵盐析法分离纯化wul3单抗。在通过小量试验优化纯化参数后,进行中量放大和...
- 詹骞齐建新王志友董之昌邹昌勇杜厚明冷武军雷继军杨明端义坤孙可芳侯胜桐
- 关键词:无血清培养离子交换层析纯化生物制品
- 文献传递
- WuT3无血清培养上清中单克隆抗体纯化工艺的建立被引量:2
- 2007年
- 目的对WuT3杂交瘤细胞生物反应器无血清培养上清中单克隆抗体进行分离纯化,建立中试分离纯化工艺。方法采用两步离子交换层析法结合硫酸铵盐析法分离纯化WuT3单抗。在通过小量试验优化纯化参数后,进行中量试验和中试放大。结果建立的纯化方法可以放大到中试规模,每批投料30000ml培养上清,可收获单抗达1.5g,单抗总回收率大于60%。经分离纯化后,单抗IgG纯度大于95%,采用免疫荧光法检测抗体活性合格。结论建立了一条生物反应器无血清培养杂交瘤细胞大规模分离纯化单抗的工艺路线。
- 詹骞邹昌勇杜厚明冷武军雷继军杨明端义坤孙可芳侯胜桐齐建新王志友董之昌
- 关键词:无血清培养杂交瘤细胞单克隆抗体纯化工艺
- 细菌内同源重组构建人p21^(WAF1)基因重组腺病毒
- 2006年
- 目的构建人p21WAF1基因重组腺病毒载体,并在293细胞中包装制备重组腺病毒。方法将人p21WAF1基因亚克隆连接到腺病毒转移质粒pshuttle-cmv,得到阳性重组转移质粒psh-p21。先将腺病毒骨架质粒pAdEasy-1转化BJ5183菌,筛选得到AdBJ5183菌,再将PmeⅠ线性化的psh-p21转化AdBJ5183菌,经细菌内同源重组法构建重组腺病毒质粒pAdp21。经PacⅠ和BstXⅠ酶切及PCR鉴定,将正确的重组腺病毒质粒pAdp21转染293细胞包装病毒,用RT-PCR和PCR鉴定重组腺病毒及其稳定性。结果所构建的重组腺病毒质粒pAdp21,经PCR鉴定,可扩增出约500bp的片段,与预期大小相符。转染293细胞可包装成p21WAF1基因重组腺病毒,经电镜观察,具有典型的腺病毒特征。结论已成功地构建了重组腺病毒质粒pAdp21,并制备出重组腺病毒rAdp21。
- 邹昌勇杨京生全家妩田生和
- 关键词:腺病毒同源重组P21^WAF1基因
- 应用无血清培养中试的三批WuT3单抗的质量分析
- 2001年
- 邹昌勇冷武军杜厚明詹骞邱义安孙可芳赵亚杰赵良
- 关键词:无血清培养