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一种定量检测DNA双链断裂碎片数的标准品的制备方法及应用: 本发明公开了一种定量检测DNA双链断裂碎片数的标准品的制备方法及应用，其解决了现有DNA双链断裂碎片数目检测中不能定量的问题。主要是采用限制性内切酶完全酶切待分析的完整目标基因(组)获得标准品，再利用标准曲线法对任何已知...; 徐克前邓爽阎祖炜朱燕王雷李鹏; 文献传递

一种定量检测DNA双链断裂碎片数的标准品的制备方法及应用: 本发明公开了一种定量检测DNA双链断裂碎片数的标准品的制备方法及应用，其解决了现有DNA双链断裂碎片数目检测中不能定量的问题。主要是采用限制性内切酶完全酶切待分析的完整目标基因(组)获得标准品，再利用标准曲线法对任何已知...; 徐克前邓爽阎祖炜朱燕王雷李鹏

精子碱性单细胞凝胶电泳法优化条件的建立及效果分析被引量：2: 2015年; 目的:探讨精子碱性单细胞凝胶电泳法(SCGE)的主要影响因素,并优化条件,以利于标准化。方法:采用不同浓度H2O2处理精子,碱性SCGE检测精子DNA碎片(SDF),探讨凝胶层数、DNA解旋及电泳时的p H、DNA解旋及电泳时间、计数精子数对结果的影响,分析优化后方法的重复性,并用于检测40例精液标本。结果:3层琼脂糖凝胶可降低本底,DNA解旋及电泳缓冲液最佳p H值为10,最佳DNA解旋及电泳时间分别为40 min和30 min,计数50个精子即可保证结果的可靠性。优化后的碱性SCGE,用尾部DNA含量百分比表示,其批内、批间变异系数(CV)分别为3.12%、7.13%,用DNA损伤得分表示,其批内、批间CV分别为2.38%和6.09%。与健康生育男性相比,少弱畸形精子症不育男性精液SDF显著升高(P<0.05)。结论:优化后的精子碱性SCGE,重复性好,易于标准化,可用于不育男性SDF检测,适合在临床推广应用。; 邓爽范烺伍细言朱燕徐克前; 关键词：精子 DNA损伤精子DNA碎片

DNA损伤检测技术被引量：3: 2013年; 检测DNA损伤的方法有很多,根据其原理大致可以分为3类:基于损伤DNA理化性质的改变检测DNA损伤、基于分子杂交检测DNA损伤以及基于DNA损伤后形成的产物检测DNA损伤。检测DNA损伤的方法目前还在不断快速发展、完善中。本文就DNA损伤的检测方法及其发展做一综述。; 邓爽徐克前; 关键词：DNA损伤分子杂交

超高效液相色谱-荧光法检测精液中DNA甲基化水平: 2015年; 目的建立超高效液相色谱-荧光法（UPLC-FLD）定量分析精液标本中DNA甲基化水平。方法精液样本DNA提取、水解后,以100 mmol/L 2-溴苯乙酮为衍生试剂,在0.51 mol/L乙酸乙腈溶液中80℃加热60 min,生成脱氧胞嘧啶核苷（d C）和5-甲基脱氧胞嘧啶核苷（5md C）的荧光衍生物（λex=306 nm,λem=378 nm）。取1μL上清液进样,经Agilent C18色谱柱（2.1×100 mm、1.8μm）分离[流动相为28%甲醇＋10%乙腈＋62%水溶液（含0.1%甲酸）,柱温40℃,流速0.3 m L/min]及统计学分析,并用临床样本进行验证。结果在上述最佳衍生反应与色谱分离条件下,7 min即可将精液DNA中的d C与5md C完全分离,无需消除RNA干扰;本法中5md C的检测限为2.5 pg/μL,线性范围为0.025-0.75 ng/μL,r〉0.99,日间、日内变异系数（CV）〈5.6%,衍生化合物室温条件放置30 h内比较稳定。临床精液样本结果表明,少弱畸精子症患者的DNA甲基化水平低于健康男性。结论建立的UPLC-FLD法可快速、简便、准确、稳定地检测基因组DNA甲基化水平。; 范烺邓爽伍细言徐克前; 关键词：DNA甲基化精液衍生化

鲍曼不动杆菌的同源性及碳青霉烯酶基因分析被引量：15: 2012年; 目的:研究临床分离鲍曼不动杆菌的耐药性演变、同源性、产碳青霉烯酶类型及碳青霉烯酶基因型。方法:收集临床分离的72株鲍曼不动杆菌,采用VITEK-II药敏分析系统对72株鲍曼不动杆菌进行18种抗菌药物的敏感性检测。采用肠杆菌科基因间一致重复序列聚合酶链技术(ERIC-PCR)进行基因分型和同源性比对。用改良Hodge试验检测杆菌的产碳青霉烯酶表型,对碳青霉烯酶基因blaOXA-23,blaOXA-40和blaOXA-58进行PCR扩增及序列分析。结果:72株鲍曼不动杆菌对头孢哌酮/舒巴坦的耐药率最低,为8.33%,其次是阿米卡星,对其余抗菌药物的耐药率均高达70%以上。ERIC-PCR技术将其分为7个基因型,同源性分析显示其中4个基因型在医院内流行。产碳青霉烯酶的菌株有56株,blaOXA-23扩增阳性的有61株,blaOXA-58扩增阳性的有1株。结论:鲍曼不动杆菌耐药严重,且存在院内感染传播的现象;产碳青霉烯酶的菌株较多,主要的碳青霉烯酶基因型为blaOXA-23;湖南省存在blaOXA-58阳性鲍曼不动杆菌株。; 晏群邓爽李虹玲邹明祥; 关键词：鲍曼不动杆菌

单细胞凝胶电泳检测非小细胞肺癌患者淋巴细胞DNA损伤被引量：2: 2015年; 目的探讨单细胞凝胶电泳(SCGE)检测淋巴细胞DNA双链断裂(DSBs)水平在非小细胞肺癌(NSCLC)诊疗中的应用价值。方法收集132例NSCLC患者、39例肺部良性疾病以及42例体检健康者血液标本,分离外周血淋巴细胞,用SCGE检测DNA DSBs情况,并分析尾部DNA百分含量(%Tail DNA)及Olive尾距(OTM)与NSCLC患者病理类型、临床分期和疗效间的关系。结果 SCGE结果表明,NSCLC患者%Tail DNA和OTM均高于肺部良性病变组(t=2.637、2.460,P<0.05)及健康对照组(t=8.832、9.682,P<0.05);NSCLC组%Tail DNA和OTM与患者病理类型及临床分期之间无关(P均>0.05);NSCLC治疗有效患者治疗后淋巴细胞DSBs水平显著低于治疗前(P<0.05)。结论 SCGE分析淋巴细胞DNA DSBs可能成为NSCLC辅助诊断和疗效评价的新指标。; 宋娜娜黄宏君吴白平邓爽熊志敏徐克前; 关键词：DNA损伤非小细胞肺癌淋巴细胞单细胞凝胶电泳

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邓爽