目的:探讨解偶联蛋白2(uncoupling protein 2,UCP2)在酒精性心肌损害中的作用及其分子机制。方法:采用乙醇在体内的代谢产物乙醛作为刺激因素,将培养心肌细胞分为对照组,乙醛组和乙醛+UCP2抑制剂京尼平组(京尼平组),干预24小时后检测心肌细胞中超氧阴离子(superoxide anion,SOA)及一氧化氮(nitric oxide,NO)的水平,并检测UCP2的蛋白表达水平,另一组实验干预72小时后采用TUNEL法检测心肌细胞凋亡率。结果:与对照组比较,乙醛组心肌细胞中SOA水平显著升高(P<0.01),而NO水平显著降低(P<0.01),且UCP2的蛋白水平也较对照组显著增加(P<0.01)。而与乙醛组比较,京尼平组心肌细胞中SOA的水平进一步增加(P<0.01),NO的水平也进一步降低(P<0.01)。与对照组比较,乙醛可诱导培养心肌细胞凋亡(P<0.01),而京尼平组凋亡率较乙醛组则进一步升高(P<0.01)。结论:UCP2在酒精性心肌损害中通过调控SOA/NO的水平发挥代偿性保护作用。
目的研究血管紧张素Ⅱ2型受体（AT2R）体外基因转染对小鼠骨髓源树突状细胞（BMDC）成熟活化及部分免疫功能的影响,探讨AT2R参与动脉粥样硬化斑块进展的免疫机制。方法取C57BL/6J小鼠骨髓,经分离、纯化、分化为BMDC,先转染带有绿色荧光蛋白报告基因的AT2R基因重组腺病毒载体（p Ad CMV/AT2R）或空病毒载体（p Ad-GFP）,再用脂多糖刺激为成熟BMDC,分PBS对照组、脂多糖组、p Ad-GFP组、p Ad CMV/AT2R组及p Ad CMV/AT2R＋PD123319组。采用RT-PCR、免疫荧光和激光共聚焦技术方法检测BMDC中AT2R mRNA及蛋白表达;流式细胞术检测BMDC表面标志CD86和MHCⅡ的表达率;液体闪烁计数检测BMDC刺激同源T淋巴细胞增殖的能力;ELISA法检测培养基中白细胞介素12（IL-12）和γ干扰素（IFNγ）的水平。结果 p Ad CMV/AT2R转染BMDC后48~72 h有AT2R mRNA表达,在激光共聚焦显微镜下胞浆及胞核有绿色荧光表达;同时在胞浆有红色荧光AT2R表达。与PBS对照组比较,p Ad CMV/AT2R组和p Ad CMV/AT2R＋PD123319组CD86和MHCⅡ的表达、同源T淋巴细胞增殖和细胞因子分泌量都显著升高（P〈0.01）,但p Ad CMV/AT2R组与脂多糖组比较显著降低（P〈0.01或P〈0.05）,而p Ad CMV/AT2R＋PD123319组与脂多糖组比较差异无显著性（P〉0.05）。结论体外基因转染BMDC能表达AT2R,AT2R能抑制BMDC成熟诱导的局部免疫炎性反应,且AT2R拮抗剂能阻断此效应,推测AT2R可能介导稳定斑块及抑制动脉粥样斑块进展的作用。
目的探讨超压力负荷左心室心肌β1受体、β2受体和β3受体mRNA表达及钙调神经磷酸酶(Calcineurin,CaN)通路的变化,及美托洛尔改善心肌重构的机制。方法用腹主动脉缩窄法建立大鼠超压力负荷模型,手术组、美托洛尔组及假手术组各10只。用免疫沉淀法检测左心室心肌CaN、活化T细胞核因子(nuclear factor-3 of activated T cells,NFAT3)、锌指转录因子4(zinc finger transcription factor-4,GATA4)磷酸化及蛋白表达以及原癌基因c-myc蛋白表达。结果大鼠术后14d左心室明显肥厚,手术组β1受体mRNA表达较假手术组明显减少(P<0.01),美托洛尔组β1受体mRNA表达明显回升,美托洛尔组与手术组差异有统计学意义(P<0.01);各组间β2受体mRNA表达差异无统计学意义;手术组β3受体mRNA表达较假手术组增加,美托洛尔组与手术组相比差异无统计学意义,与假手术组相比。CaN、GATA4磷酸化增强、c-myc蛋白表达增加(P<0.01),NFAT3磷酸化减弱,美托洛尔明显改善左心室肥厚。结论美托洛尔能明显改善左心室肥厚,其作用机制可能与抑制了CaN信号通路有关。
