赵鹏伟
- 作品数：10 被引量：23H指数：3
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- 发文基金：山东省优秀中青年科学家科研奖励基金国家自然科学基金现代农业产业技术体山东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金系建设专项资金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 水貂粪便中双歧杆菌的分离与鉴定被引量：8
- 2012年
- 目的运用TPY培养基,从健康水貂的粪便中分离培养、筛选出2个肠道菌株。方法细菌培养、菌落形态观察、染色镜检、分离纯化、生化试验和药敏试验。结果分离培养出的2株菌株为双歧杆菌,其中1株为长双歧杆菌,另1株为青春双歧杆菌;双歧杆菌对氯霉素极其敏感,对阿米卡星耐药。结论本实验为毛皮特种经济动物微生态制剂的研究工作奠定了基础。
- 魏亚松刘国庆赵鹏伟温建新
- 关键词：水貂粪便双歧杆菌
- 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp1蛋白锌指结构1(ZF1)突变体的构建及活性鉴定
- 2013年
- 本试验旨在构建高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)SX-1株非结构蛋白Nsp1的真核表达质粒,并对Nsp1蛋白锌指结构1(ZF1)进行定点突变,检测其在真核细胞中的表达活性。利用TRIzol法提取总RNA,RT-PCR扩增Nsp1目的基因,经双酶切构建pCI-neo-Nsp1真核表达质粒后对Nsp1蛋白锌指结构1的8C、10C、25C和28C的4个位点进行定点突变,成功获得分别突变为A和S的8个突变体。转染HeLa细胞,通过间接免疫荧光方法(IFA)和Western blotting检测Nsp1蛋白的活性。IFA结果显示,Flag抗体检测时蛋白质主要分布在细胞质和细胞核中,Myc抗体检测时蛋白质主要分布在细胞核中。Western blotting结果显示,Flag抗体检测时,S突变体出现大小约为44和20ku条带,A突变体出现约为44ku条带;Myc抗体检测时,S突变体出现大小约为44和27ku条带,A突变体出现大小约为44ku条带。试验结果表明,本试验成功构建了Nsp1突变体的真核表达质粒,证实其能在真核细胞中表达,为进一步研究Nsp1蛋白的锌指结构是否对机体Ⅰ型IFN产生起下调作用提供基础。
- 赵鹏伟吴家强杜以军李俊孙文博丛晓燕时建立彭军于江刘月月王金宝
- 关键词：活性鉴定
- 猪流行性腹泻病毒S基因遗传变异分析和致病性研究
- 引言猪流行性腹泻（PED）是由猪流行性腹泻病毒（PEDV）引起的猪的一种急性,高度传染性肠道疾病,该病以呕吐、水样腹泻、脱水和对哺乳仔猪高死亡率为主要特征。其中S蛋白在受体细胞结合吸附、膜融合等方面发挥重要作用,也是诱导...
- 赵鹏伟吴家强汪明
- 水貂粪便乳酸杆菌的分离与鉴定被引量：2
- 2012年
- 无菌采取健康成年母貂的新鲜粪便,通过选用MRS培养基,对其肠道与粪便微生物进行分离培养,筛选优势菌株,并观察菌落形态、镜检特性、生化试验鉴定、耐酸性试验和药敏试验。结果表明:分离培养出4株乳酸杆菌,嗜酸性乳酸杆菌3株,干酪乳酸杆菌1株。筛选的1株嗜酸性乳酸杆菌和1株干酪乳酸杆菌(A1、A4)能耐受pH值低至4.0的酸性环境,其代谢产物对常见抗生素如庆大霉素、红霉素等有敏感作用,但对于青霉素以及氨苄西林等的耐药性强。
- 刘国庆赵鹏伟温建新刘坤
- 关键词：水貂乳酸杆菌
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5抗体检测ELISA在中和抗体评估中潜在应用的研究被引量：5
- 2015年
- 为评估猪群血清中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)中和抗体水平,本研究以原核表达的重组HP-PRRSV GP5蛋白为包被抗原,通过对反应条件进行优化,建立了检测GP5抗体的间接ELISA(r GP5-ELISA)。结果显示该方法与猪圆环病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、细小病毒、日本乙型脑炎病毒阳性血清均无交叉反应,具有良好的特异性。重复性试验结果显示,组内组间变异系数均小于5.3%。应用建立的r GP5-ELISA方法和IDEXX-ELISA对288份临床血清样品进行检测,结果显示两种方法具有较低的相关性(R=0.831)。中和试验(SN)结果显示,r GP5-ELISA检出阳性血清的中和效价显著高于IDEXX-ELISA(p<0.01)。Western blot复检r GP5-ELISA检测呈阴性的65份猪血清样品,其中58份呈阴性、7份为阳性;而IDEXX-ELISA检测则该65份血清全部呈阳性。对比SN和western blot试验,r GP5-ELISA比商品化IDEXX-ELISA具有更高的SN抗体符合率,因而其检测结果能够更好地反映猪群血清中和抗体水平。本研究建立的方法可以用于大规模猪群PRRSV中和抗体水平评估,并为PRRS流行病学调查提供了技术支持。
- 彭军郭中坤杜以军李俊吴家强于江赵鹏伟邹荣凯柳晓王金宝朱瑞良
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒间接ELISA
- PRRS流行毒株与减毒活疫苗TJM-F92株qPCR区分方法的建立与应用被引量：3
- 2013年
- 为快速准确区分PRRS流行毒株与减毒活疫苗TJM-F92株以及对流行毒株进行定量检测,按GenBank中发表的美洲型PRRSV SX-1分离株、弱毒疫苗株NSP2基因缺失部位的不同设计了一对特异性引物,通过RT-PCR和体外转录的方法,构建了体外转录RNA作为标准品,并对反应条件和反应体系进行优化,旨在建立一种敏感性高、特异性强、重复性和稳定性良好的qPCR鉴别方法。结果表明,该方法最低能检测出1.0×101拷贝/μL的模板,敏感性比常规PCR高100倍;应用该方法对218份临床样本进行鉴别与定量,qPCR检出率较常规RT-PCR高12.9个百分点。研究表明,qPCR鉴别方法的建立实现了对PRRS流行毒株与疫苗毒株的快速区分以及对流行毒株的定量检测,为PRRS的快速诊断提供了依据。
- 刘月月陶海英杜以军王兴东于江赵鹏伟刘思当王金宝吴家强
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征体外转录NSP2基因
- 鸡胚致病性大肠杆菌的分离与鉴定被引量：1
- 2011年
- 对胶州某种鸡场孵化19d出现的死亡鸡胚无菌采取尿囊液和肝脏,集中进行了常规菌的分离与培养。对分离的病原菌进行细菌培养、染色镜检、生化试验、溶血试验和药敏试验,分离鉴定结果表明,该批鸡胚感染了致病性大肠杆菌,并产生溶血现象。药敏试验结果表明,分离到的致病性大肠杆菌对美福仙高度敏感,对庆大霉素、先锋V中度敏感,而对其他几种药物产生了耐药性。
- 刘国庆温建新赵鹏伟李倩倩刘坤
- 关键词：鸡胚致病性大肠杆菌
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp1蛋白锌指结构突变体构建及其活性检测
- 赵鹏伟
- 文献传递
- 水貂粪便中双歧杆菌的分离与鉴定
- 运用TPY培养基,从健康水貂的粪便中分离培养、筛选出2个肠道菌株。细菌培养、菌落形态观察、染色镜检、分离纯化、生化试验和药敏试验。分离培养出的2株菌株为双歧杆菌,其中1株为长双歧杆菌,另1株为青春双歧杆菌;双歧杆菌对氯霉...
- 魏亚松刘国庆赵鹏伟温建新
- 关键词：水貂粪便双歧杆菌
- 文献传递
- 鲁中地区猪高热性疾病的病理变化及病原学调查研究被引量：5
- 2012年
- 为研究鲁中地区猪高热性疾病的病理变化及主要发病原因,对2011年1月-2012年3月患高热性疾病的56个患病猪群109头病猪进行了临诊症状及剖检病变观察,并对发病猪群进行追踪调查,采集363份发病猪群的血清,用ELISA方法检测血清样品的CSFV、PRRSV及PCV2抗体,用RT-PCR和PCR方法检测病料中这3种病原,并对病料进行病理组织学及免疫组化检测。结果显示:患高热性疾病的猪群均已免疫过CSF、部分免疫过PRRS弱毒活疫苗,但均未进行PCVD疫苗免疫;发病猪群的CSF、PRRS及PCV2均有较高的抗体阳性率;病猪以淋巴组织急性炎症、间质性肺炎、病毒性脑炎的病变为主,其病变率分别为92.3%、76.1%和66.1%;CSFV、PRRSV和PCV2的病原检出率分别为30.27%、66.97%、41.28%,其中CSFV与PRRSV、CSFV与PCV2、PRRSV与PCV2二重感染检出率分别为16.51%、6.42%、28.44%,三者共感染检出率为4.59%,8.26%的病料未检测到这3种病原,属其它病原感染所致。序列分析表明CSFV流行株正在向着远离猪瘟兔化弱毒疫苗的方向发展,PRRSV均为高致病性变异毒株,PCV2则为毒力较强的PCV2b型。CSFV、PRRSV、PCV2是目前导致鲁中地区猪高热性疾病的主要病原,其中以PRRSV变异强毒感染最为常见,共感染是导致重症型猪高热性疾病的主要原因,病例还多见支原体、副猪嗜血杆菌等细菌病继发感染的病变,故该区域猪高热性疾病为多病原混合感染所致。
- 刘月月吴家强任庆海张绍武吴好庭张玉玉赵鹏伟彭军李俊杜以军王金宝刘思当
- 关键词：猪瘟猪繁殖与呼吸综合征猪圆环病毒病病理变化病原学
