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重组人神经红蛋白的圆二色光谱研究: ＜正＞神经红蛋白（Neuroglobin,NGB）是一种新颖的脊椎动物珠蛋白类型,它主要在脑和其他神经组织中表达,在视网膜中具有较高的浓度。虽然它的氨基酸序列与血红蛋白（Hb）和肌红蛋白（Mb）的同源性很低（20-25...; 李连之赵超; 文献传递

重组人神经红蛋白的圆二色光谱研究被引量：4: 2006年; 神经红蛋白(neuroglobin,NGB)是近期在人和其他脊椎动物脑中发现的一种新颖的血红素蛋白.利用远紫外圆二色(CD)光谱的方法,研究了NGB的浓度、溶剂性质、溶液pH值以及温度对NGB二级结构的影响.结果表明,NGB浓度小于10μmol/L时,它主要以α-螺旋形式存在,浓度大于10μmol/L时,随着浓度的增大其α-螺旋含量逐渐减少,当浓度达到40μmol/L后基本不再变化,可能是由于NGB在浓度较高时其分子间可以形成二硫键以及蛋白分子间可相互聚集所造成的.NGB在醇中的α-螺旋含量比在水中稍有增加,也表明NGB对醇类溶剂具有较高的稳定性.在酸性或碱性溶液中,NGB的二级结构都有不同程度的破坏.随着温度的逐渐升高,NGB的α-螺旋含量逐渐减少,但温度高达110℃时仍有16.8%的α-螺旋存在,说明NGB具有高热稳定性.; 赵超李连之王莉冀海伟; 关键词：圆二色光谱稳定性

神经红蛋白的表达、分离纯化和谱学表征被引量：4: 2005年; 报道了神经红蛋白(NGB)的基因表达、分离纯化和谱学表征.将载有NGB基因的pET3a质粒转入E.ColiBL21(DE3)plys细菌,于TB培养基中进行表达,其表达量占菌体总蛋白的10%左右.依次经硫酸铵分级沉淀,DEAE-Sepharose阴离子交换柱,Hiload16/60Superdex75凝胶过滤柱和Hiprep16/10QFF阴离子交换柱纯化,得到了电泳纯的血红色可溶性蛋白.电喷雾质谱测得其分子量为16930.0Da.紫外-可见吸收光谱表明,还原态的NGB在425nm有一强吸收峰,在531和559nm处有弱吸收峰,它们可分别归属为金属卟啉的γ,β和α吸收带,氧化态的NGB在413nm处有强吸收,则对应于金属卟啉的γ吸收带,是电子在卟啉环中非定域化π电子的轨道跃迁(π→π?)的结果.荧光激发谱最大波长为281nm,发射谱最大波长为338nm.圆二色谱表明其二级结构为典型的α螺旋结构,在410nm处有一血红素正峰.酸稳定性研究表明,pH>4时蛋白稳定.; 李连之冀海伟赵超许涛刘国富付崇罗闫华超; 关键词：谱学表征分离纯化紫外-可见吸收光谱荧光激发谱 GB基因凝胶过滤

神经红蛋白突变体(F28Y,F106Y)的构建、表达与表征被引量：5: 2006年; 构建了神经红蛋白F28Y,F106Y的两种突变体,并进行了表达、纯化和谱学表征.电喷雾质谱表明突变体蛋白的分子量与理论值一致.氧化型和还原型F28Y及F106Y的紫外-可见吸收光谱与野生型相似,仅氧化型F28Y的Soret带有2 nm的蓝移,说明这两种突变体蛋白仍保持六配位形式.F28Y的荧光最大发射峰明显红移(340 nm→347 nm),表明其荧光基团更加暴露于极性环境中.圆二色光谱表明,突变体蛋白的α-螺旋含量降低且F28Y产生了β-折叠,这是由于F28相对于F106则位于疏水腔外部且更加接近于溶剂表面所致.热稳定性顺序为NGB>F28Y>F106Y,F106Y最不稳定,是因为其与血红素间存在着较强的疏水作用,突变使F106与血红素间的作用力减弱,从而导致血红素在热变性条件下更容易从蛋白中解离出来.; 赵超李连之冀海伟王莉许涛刘金凤; 关键词：突变体稳定性

神经红蛋白突变体(V68S)的制备、表征和稳定性: 神经红蛋白(Neuroglobin，NGB)是近期发现的血红素蛋白家族中的新成员(Fig. 1)。与血红蛋白和肌红蛋白不同,在没有外源配体存在时,它具有六配位形式(双组氨酸配位)的血红素结构。但到目前为止其具体的生物功能...; 李连之赵超; 关键词：突变体稳定性; 文献传递

神经红蛋白突变体（F28Y、V68S、Y88F、F106Y）的基因表达、分离纯化和性能分析: 神经红蛋白(Neuroglobin，NGB)是近期由德国科学家Burmester,T.等在人和鼠脑中发现的一种新颖的珠蛋白类型，主要在脑和其它神经组织中表达。本文选择了几个氨基酸残基作为突变位点，设计了F28Y,F106...; 赵超; 关键词：突变体基因表达分离纯化; 文献传递

黑斑蛙过氧化物酶活性测定条件的研究被引量：5: 2006年; 本文报道了测定黑斑蛙过氧化物酶活力的两套方法。应用细胞组织化学的方法,对黑斑蛙的肝组织过氧化物酶的原位染色,以显示过氧化物酶在细胞中的分布。此外,还探讨了一种新的过氧化物酶活性检测方法,以联苯胺为底物,利用分光光度法测定反应液的吸光度,以吸光度的变化速率来表征过氧化物酶的活力。通过试验确定了该方法适宜的工作条件,包括酶浓度、温度、pH值等,得到酶活性变化的相关数据。; 闫华超赵超冯兴水; 关键词：过氧化物酶联苯胺酶活力分光光度法黑斑蛙

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赵超