赵少志
- 作品数：3 被引量：10H指数：2
- 供职机构：四川大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 恒河猴piwil4基因的鉴定与表达分析被引量：1
- 2011年
- 为了研究人类近亲恒河猴中PIWI家族蛋白PIWIL4的结构和表达情况,文章首次利用同源比对和RT-PCR方法克隆了恒河猴piwil4基因,检测了其mRNA在恒河猴心脏、脑、结肠、附睾和睾丸5种组织中的表达情况,利用生物信息学的方法对恒河猴piwil4基因和人的PIWIL4(HIWI2)基因编码的蛋白产物进行了同源性分析和结构域分析,并进一步利用免疫组化的方法比较了PIWIL4蛋白在成人、成年恒河猴和性未成熟恒河猴睾丸组织中的表达分布。结果表明,恒河猴piwil4 mRNA在多组织中表达,恒河猴和人的PIWIL4蛋白的氨基酸序列同源性达97%以上,均含有PAZ和Piwi结构域,它们在两物种成年个体睾丸组织中空间分布一致,但在不同发育阶段恒河猴睾丸组织中的分布发生了改变,幼猴中PIWIL4蛋白主要表达于生精小管细胞的细胞核,在成年猴睾丸组织中则表达于各种细胞的胞浆中。上述结果提示,piwil4基因在人类和恒河猴精子发生过程中作用类似,PIWIL4蛋白在幼猴和成年猴睾丸组织中的表达差异提示它们在不同发育阶段功能的改变。
- 赵少志李玥江雪卢亦路陶大昌刘运强马用信
- 关键词：恒河猴免疫组织化学
- 人急性淋巴细胞白血病细胞株T细胞电转染条件的优化被引量：7
- 2011年
- 目的优化人急性淋巴细胞白血病细胞株细胞(Jurkat T细胞)的电转染条件。方法采用电穿孔的方法,将pEG-FP-C1导入Jurkat T细胞中,通过改变电转时的电压来检测细胞存活率,调节电压、细胞密度、电转质粒数、电转缓冲液,通过流式细胞仪检测质转染效率。结果电转条件在电压140 V、细胞密度107个/毫升、质粒数30μg、电转缓冲液为优化培养基时,电转染效率可达(79.2±3.21)%。本研究为外源基因电转染Jurkat T细胞提供了可靠的试验参数依据。结论本实验通过优化Jur-kat T细胞电转染条件能够有效地提高Jurkat T细胞的电转染效率。
- 江雪杨平李玥赵少志马用信
- 关键词：电转染转染效率PEGFP-C1
- 恒河猴piwil1基因的表达被引量：2
- 2012年
- 为了解人类近亲恒河猴piwil1基因的结构、表达和功能差异,利用RT-PCR方法克隆了恒河猴piwil1基因,并对其编码产物进行了相应的生物信息学分析,随后检测了piwil1 mRNA在成年恒河猴10种组织中的表达情况,最后利用免疫组化方法比较了PIWIL1蛋白在成人、成年恒河猴和幼年恒河猴睾丸组织中表达的异同.结果表明,恒河猴piwil1基因全长2 586 bp,编码861个氨基酸,氨基酸数目与人类piwil1基因相同.恒河猴PIWIL1蛋白与人的PIWIL1蛋白序列同源性达99%,均含有PAZ结构域和Piwi结构域.在成人和成年恒河猴的睾丸组织中,PIWIL1蛋白均在精母细胞和精细胞的胞浆中表达,而在幼年恒河猴睾丸组织中,PIWIL1表达与成年恒河猴相比存在差异,表达量相对较低,且主要表达于生精小管的细胞的细胞核上.上述结果提示,PIWIL1蛋白在成人和成年恒河猴可能具有相同作用,但是在不同的发育阶段中PIWIL1蛋白的功能不同.
- 李玥赵少志江雪卢亦路陶大昌刘运强马用信
- 关键词：恒河猴基因表达免疫组织化学
