谭文
- 作品数:5 被引量:5H指数:2
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- 超声联合微泡造影剂介导神经营养因子-3基因转染神经干细胞实验研究
- 目的探讨体外利用超声联合微泡造影剂介导神经营养因子-3(neurotrophin-3,NT-3)基因转染神经干细胞的有效性和适宜超声参数。方法体外培养神经干细胞,在24孔板中加入200μl微泡(3×10~8/ml)和20...
- 宫琳陈芸万圣祥江长青谭文严飞郑海荣
- 关键词:超声微泡造影剂神经营养因子-3神经干细胞基因转染
- 文献传递
- 超声联合微泡体外介导NT.3基因转染神经干细胞的超声占空比探讨被引量:1
- 2012年
- 目的探讨低频超声体外介导神经营养因子-3(neurotrophin-3,NT-3)基因转染神经干细胞的适宜超声占空比条件。方法体外培养神经干细胞,在24孔板中加入200斗l微泡(浓度20%)和20μlpEGFP-NT-3基因重组质粒(1斗g/斗1)混合静置30min。将500山神经干细胞悬液(3×105/m1)加入到微泡和质粒混合液中,采用超声声强1.5W/cm^2,照射时间60s,占空比分别为10%、25%和50%。用1MHz超声探头辐照上述混合液,转染后用流式细胞仪检测各组细胞基因转染率,MrIT法检测神经干细胞存活率。空白对照组为未经超声辐照的质粒与神经干细胞混合物。结果随着超声占空比升高,细胞存活率逐渐降低。占空比为50%时,细胞存活率低于40%;占空比为25%时,细胞存活率高于60%,且基因转染率明显高于占空比10%和50%组,为(18.6±0.90)%。结论通过优化超声占空比条件,证明适宜的超声占空比为25%,神经干细胞转染率最高,且细胞损伤较小。
- 谭文万圣祥陈芸宫琳严飞郑海荣江长青
- 关键词:微泡基因转染神经营养因子-3神经干细胞
- 不同微泡浓度对NT-3基因转染神经干细胞的影响被引量:3
- 2012年
- 目的探讨低频超声下体外介导神经营养因子3(NT-3)基因转染神经干细胞的适宜超声微泡浓度。方法体外培养神经干细胞,在24孔板中加入200μl不同浓度(分别为10%、20%和30%)微泡和20μl pEGFP-NT-3基因重组质粒(1μg/μl)混合静置30min。将500μl神经干细胞悬液(3×105/ml)加入微泡和质粒混合液中,固定声强1.5W/cm2,照射时间60s,占空比10%,用1MHz超声探头辐照。转染后流式细胞仪检测细胞绿色荧光蛋白表达情况,MTT法检测神经干细胞存活率。空白对照组为质粒与神经干细胞的混合物,不经超声辐照。结果微泡浓度为10%时,细胞存活率>80.00%,但细胞转染率只有(6.26±0.58)%;微泡浓度为30%时,细胞存活率<40.00%,同时转染率最低;而当微泡浓度为20%时,细胞存活率较高[(69.66±2.08)%],且细胞转染率最高[(14.39±1.79)%]。结论在一定超声辐照参数条件下,微泡浓度20%的细胞转染率较高,且对细胞损伤较小,可作为神经干细胞基因转染的适宜条件。
- 陈芸宫琳万圣祥江长青谭文严飞郑海荣
- 关键词:超声学微泡基因转移技术神经营养因子3神经干细胞
- 超声联合微泡造影剂促进干细胞移植研究进展被引量:2
- 2012年
- 干细胞移植已应用于多种疾病的治疗研究,但其效果受到移植干细胞存活率、分化率以及靶向性等因素影响。随着超声影像学技术的不断发展,超声联合微泡造影剂不仅能有效介导细胞基因转染,而且能靶向性传递移植细胞,从而提高干细胞移植效果。本文将就近年来超声联合微泡造影剂促进干细胞移植的研究进展作一综述。
- 谭文陈芸万圣祥宫琳
- 关键词:微泡造影剂干细胞移植基因转染靶向性