谢丽娜
- 作品数:3 被引量:14H指数:2
- 供职机构:北京大学人民医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- ERG甲基化作为无创产前诊断唐氏综合征标记的可行性研究被引量:12
- 2009年
- 目的探讨ERG基因是否可以作为孕早期血浆中检测胎儿DNA的通用标志物。方法随机选择早期妊娠孕妇70例,并以经体检确定为未孕健康妇女70例、分娩过21-三体胎儿的妇女11例和顺产后3 d妇女20例作为对照组。利用甲基化敏感限制性内切酶HpaⅡ、MspⅠ酶切后进行常规PCR的方法,检测血细胞、绒毛和血浆DNA目的基因ERG21-128序列的甲基化模式,并对妊娠组和对照组样本进行统计学分析。结果位于21号染色体上的ERG基因21-128序列在70例孕8、9、10周孕妇绒毛组织中甲基化而在母体血细胞中未甲基化,绒毛甲基化检出率为100%;在血浆中游离胎儿DNA ERG基因21-128序列的甲基化检出率为77.1%,敏感度为77.1%。其中8、9、10周甲基化差异无统计学意义(P>0.05)。在70例未孕健康妇女、11例生产过21三体胎儿的健康妇女和20例产后3 d妇女的对照组的血浆中ERG 21-128序列均未甲基化。结论在母体和胎儿DNA中,ERG基因21-128区的甲基化有显著性差异,实验方法也比较简单,提示了ERG是无创性产前诊断DS的一个潜在标记物。
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- 关键词:胎儿DNA孕妇血浆无创性产前诊断ERG
- 受体相互作用蛋白140在小鼠原代小胶质细胞中的表达分析
- 2010年
- 目的:分离、纯化和原代培养小鼠的小胶质细胞并检测该细胞中受体相互作用蛋白140(RIP140)的表达模式。方法:以McCarthy等的经典培养方法为基础进行小鼠小胶质细胞的分离,以不换液营养缺失法、机械振摇法纯化和培养小鼠小胶质细胞;用CD11b(MAC-1)对分离的小鼠小胶质细胞进行鉴定;采用实时-聚合酶链反应和western免疫印迹法检测RIP140mRNA和蛋白质在小鼠原代小胶质细胞中的表达模式;用免疫细胞化学确定RIP140在小胶质细胞中的定位表达模式。结果:成功对小鼠小胶质细胞进行了分离、纯化和培养;mRNA和蛋白表达分析显示,RIP140在小鼠原代小胶质细胞中确有表达,免疫组化结果提示RIP140主要在小鼠小胶质细胞的细胞核中表达。结论:利用McCarthy经典改良方法可成功分离纯化出高纯度小鼠原代小胶质细胞;小鼠原代小胶质细胞确实表达RIP140,以细胞核表达为主。
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- 关键词:小胶质细胞
- 受体相互作用蛋白140对神经胶质细胞生物学行为的影响被引量:2
- 2011年
- 目的明确受体相互作用蛋白140(RIP140)基因过表达对小鼠小胶质瘤细胞(BV-2)增殖、凋亡、侵袭及迁移行为的影响。方法采用脂质体转染和G418筛选法构建RIP140过表达的BV-2细胞模型,用实时定量PCR及Western印迹法鉴定过表达模型构建是否成功,用四甲基偶氮唑蓝(Mrrr)法、流式细胞仪和Transwell小室检测RIPl40过表达对BV-2细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移行为的影响。结果成功构建RIP140过表达模型BV-2—1,BV-2—1细胞RIP140mRNA与蛋白表达量均高于BV-2细胞(t=49.794,P〈0.01)。细胞增殖检测显示:BV-2细胞24、48、72h吸光度(A)值分别为1.157±0.013、1.679±0.005、2.609±0.008,BV-2—1细胞3个时间点的A值分别为0.929±0.013、1.188±0.008、1.528±0.012,BV-2,1细胞48及72h增殖率明显低于BV-2细胞(t=6.058、9.245,均P〈0.01)。凋亡检测显示:BV-2—1细胞凋亡率明显高于BV-2细胞[(5.35±0.23)%比(3.46±0.45)%,t=6.619、P=0.003]。侵袭检测显示:BV-2—1细胞侵袭平均数多于BV-2细胞[(166±43)个比(93±32)个,t=3.403,P=0.007]。迁移检测显示BV-2—1细胞迁移平均数高于BV-2细胞[(202±50)个比(101±25)个,t=4.104,P=0.002]。结论RIP140过表达抑制BV-2细胞增殖,促进其凋亡;RIP140过表达促进BV-2细胞的侵袭和迁移能力。
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- 关键词:神经胶质瘤细胞增殖细胞运动