袁犁
- 作品数：9 被引量：29H指数：4
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- 卵巢癌紫杉醇耐药细胞耐药性和髓样分化因子88关系的研究被引量：1
- 2012年
- 目的:研究卵巢癌亲本A2780细胞与卵巢癌紫杉醇耐药细胞A2780/Taxol生物学特性及与髓样分化因子(Myeloid dif-ferentiation factor 88,MyD88)的关系。方法:应用CCK-8法检测A2780细胞和A2780/Taxol细胞的耐药性和耐药指数,采用流式细胞法检测A2780和A2780/Taxol细胞的细胞周期。应用罗丹明123(Rhodamine 123,Rh123)排出实验测定P-糖蛋白(P-gly-coprotein,P-gp)表达。应用Western blot检测A2780和A2780/Taxol细胞中P-gp的表达情况。应用细胞免疫化学检测A2780和A2780/Taxol细胞中MyD88、P-gp的表达情况。结果:A2780与A2780/Taxol相比,A2780/Taxol生长缓慢,呈G1期阻滞;CCK-8结果显示A2780/Taxol细胞对紫杉醇的IC50为(36.81±2.05)μg/ml,A2780细胞对紫杉醇的IC50为(1.40±0.18)μg/ml;两者的耐药指数(Resistance index,RI)为26.35。Rh123排出实验显示A2780/Taxol平均荧光强度显著降低。Western blot检测发现A2780/Taxol的P-gp表达比A2780明显升高(P<0.05)。细胞免疫化学检测发现A2780/Taxol中的P-gp和MyD88表达明显高于A2780细胞。结论:A2780/Taxol细胞株具有明确的耐药性,紫杉醇耐药与MyD88的表达密切相关,该细胞株可用于卵巢癌紫杉醇耐药的基础研究。
- 袁犁周琦徐发良李少林邹冬玲
- 关键词：紫杉醇耐药卵巢癌P-糖蛋白髓样分化因子88
- miR-124在卵巢癌中的表达及其对卵巢癌细胞生物学行为的影响被引量：8
- 2014年
- 目的:探讨微小RNA(microRNA,miRNA,miR)-124在卵巢癌组织中的表达及其对卵巢癌细胞生物学行为的影响。方法 :应用实时荧光定量PCR法检测35例卵巢癌组织及其邻近癌旁组织中miR-124的表达水平。将miR-124模拟物片段(has-miR-124 mimic)转染入卵巢癌SKOV3细胞中,应用CCK-8(cell counting kit-8)法和FCM法检测miR-124对卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响,Transwell小室法检测其对SKOV3细胞迁移和侵袭能力的影响,蛋白质印迹法检测SKOV3细胞中磷脂酰肌醇-3-激酶催化亚单位α(phosphatidylinositol-3 kinase catalytic subunit alpha,PIK3CA)、AKT和磷酸化AKT(phospho-AKT,p-AKT)蛋白表达水平的变化。结果:卵巢癌组织中miR-124的表达水平明显低于邻近的癌旁组织(P<0.05)。has-miR-124 mimic转染组SKOV3细胞的增殖、侵袭和迁移能力明显低于空白对照组(只转染lipofectamine)和阴性对照组[转染miR-124模拟物对照片段(has-miR-124 mimic control)](P<0.05),早期凋亡细胞所占比例明显增加(P<0.01),PIK3CA和p-AKT蛋白的表达水平明显下降(P<0.01),总AKT蛋白的表达水平无明显变化(P>0.05)。结论:卵巢癌组织中miR-124的表达水平下降。卵巢癌SKOV3细胞中miR-124过表达可明显抑制细胞的增殖、迁移和侵袭并诱导细胞凋亡,这一作用可能与抑制卵巢癌细胞中磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol-3 kinase,PI3K)/AKT信号通路的活性有关。
- 舒锦袁犁刘兴明李少林周琦
- 关键词：卵巢肿瘤微RNAS细胞SKOV3
- CXCR4在不同转移潜能肝癌细胞中的表达及意义被引量：5
- 2012年
- 目的研究趋化因子受体CXCR4在高、低转移潜能肝癌细胞中的表达,并探讨其在肝癌细胞增殖和侵袭转移过程中的作用。方法利用3B肝癌细胞株对人工基底膜穿透能力的差异获得不同转移潜能肝癌细胞亚系,并通过Transwell小室侵袭实验比较两细胞亚系的侵袭能力从而对其进行验证,应用RT-PCR和Western blot检测CXCR4在两细胞亚系中的表达。CCK8法检测两细胞亚系生长曲线和倍增时间,流式细胞仪检测两细胞亚系细胞周期和凋亡率。结果成功筛选出高、低转移潜能肝癌细胞亚系,并通过Transwell小室侵袭实验证实高转移潜能肝癌细胞的侵袭能力高于低转移潜能肝癌细胞;RT-PCR和Western blot均显示高转移潜能肝癌细胞在基因水平和蛋白水平的CXCR4表达均显著高于低转移潜能肝癌细胞;且两细胞亚系体外生长速度、倍增时间、细胞周期和凋亡率差异均具有统计学意义。结论上述结果表明CXCR4在肝癌进展中发挥重要的作用,可能为未来肝癌的诊疗提供理论依据。
- 王勃李少林张俊胡敏袁犁
- 关键词：肝癌趋化因子受体CXCR4TRANSWELL
- PI3K特异性抑制剂对卵巢癌紫杉醇耐药细胞逆转耐药作用机制的研究
- 目的： 研究磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase)特异性抑制剂LY294002对卵巢癌紫杉醇耐药细胞株(A2780/Taxol)多药耐药逆转作用机制。 第一部分紫杉醇耐药细...
- 袁犁
- 关键词：紫杉醇卵巢癌特异性抑制剂逆转机制
- 周疗在宫颈癌同步放化疗中的作用被引量：5
- 2015年
- 目的评价周疗在宫颈鳞癌同步放化疗中的作用。方法对该院2003年1月至2007年10月收治的Ⅲb期宫颈鳞癌168例分为两组,其中观察组86例采用紫杉醇+顺铂周疗+同步放疗,对照组82例采用紫杉醇+顺铂3周疗法+同步放疗,比较两组的5年生存率和不良反应。结果观察组5年生存率为52.3%(45/86),对照组为42.7%(35/82),两组比较差异无统计学意义(P>0.05);观察组有效率(CR+PR)为94.2%(81/86),对照组为92.7%(76/82),两组比较差异无统计学意义(P>0.05);观察组Ⅲ度以上骨髓抑制发生率为9.3%(8/86),对照组为20.7%(17/82),两组比较差异有统计学意义(P<0.05);观察组Ⅲ度以上胃肠道反应发生率为8.1%(7/86),对照组为19.5%(16/82),两组比较差异有统计学意义(P<0.05);观察组放疗完成时间(54.72±4.76)d,对照组(61.12±6.71)d,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论宫颈鳞癌同步放化疗中周疗较3周疗法疗效不良反应更少,疗效相当。
- 唐郢王冬袁犁
- 关键词：子宫颈肿瘤同步放化疗顺铂
- miR-124通过靶向PDCD6抑制卵巢癌细胞及诱导凋亡机制的研究
- 背景： 卵巢恶性肿瘤（Ovarian cancer,OC）是女性生殖器常见的恶性肿瘤之一。近二十年来，由于有效化疗方案的应用，使卵巢上皮癌的疗效也发生明显的变化，5年生存率已经接近45%，虽然其发病率位于子宫颈癌和子宫...
- 袁犁
- 关键词：卵巢癌细胞凋亡
- γ分泌酶抑制剂阻断Notch1信号通路对人结肠癌耐药细胞化疗敏感性的影响被引量：3
- 2012年
- 目的探讨应用γ分泌酶抑制剂(Gamma-secretase inhibitor,GSI)阻断Notch1信号通路后对人结肠癌耐药细胞株SW480/L-OHP化疗敏感性的影响。方法应用人结肠癌细胞系SW480,以反复诱导、逐渐递增奥沙利铂(L-OHP)浓度的方法,体外构建耐药细胞株SW480/L-OHP。采用CCK-8法检测细胞株对L-OHP的耐药指数,RT-PCR法检测survivin、notch1、hes1、cyclinD1基因mRNA的转录,Western blot检测Notch1和Hes1蛋白的表达。将耐药细胞分成对照组、L-OHP组(3.0μmol/L)、GSI组(10μmol/L)和GSI+L-OHP组,分别处理后,检测各组细胞的抑制率、凋亡率及survivin、notch1、hes1、cyclinD1基因mRNA的转录水平和Notch1、Nicd、Hes1蛋白的表达水平。结果与SW480亲本细胞相比,SW480/L-OHP细胞中survivin、notch1、hes1和cyclinD1基因mRNA转录水平及Notch1和Hes1蛋白表达水平均上调。GSI组耐药细胞的增殖受到抑制,GSI+L-OHP组抑制作用更明显;GSI组耐药细胞survivin、hes1、cyclinD1基因mRNA转录水平下调,Nicd和Hes1蛋白表达水平下调,GSI+L-OHP组下调更明显。结论 GSI通过阻断Notch1胞内段Nicd的释放,影响下游Hes1基因和蛋白的表达,从而抑制SW480/L-OHP细胞增殖,提高其化疗敏感性;且与L-OHP联合使用具有协同作用。
- 胡敏李少林袁犁王勃
- 关键词：结肠肿瘤NOTCH1
- PI3K特异性抑制剂LY294002对卵巢癌紫杉醇耐药细胞株逆转作用的研究被引量：4
- 2012年
- 目的:研究磷脂酰肌醇-3-激酶(P13K)特异性抑制剂LY294002对卵巢癌紫杉醇耐药细胞株(A2780/Taxo1)多药耐药逆转的影响。方法:将P13K特异性抑制剂LY294002处理卵巢癌紫杉醇耐药细胞24 h后,用CCK-8(Cell CountingKit-8)法检测细胞的增殖速度、对紫杉醇敏感性的分析;采用流式细胞技术检测细胞周期和凋亡。应用Western blot检测细胞中P-glycoprotein(P-gP)、Akt和p-Akt蛋白的表达情况。结果:用LY294002处理A2780/Taxol细胞后细胞增殖速度变慢、对紫杉醇的半数抑制浓度(IC_(50))降低。实验组和对照组细胞的凋亡率分别是(2.64±0.90)%和(10.98±1.16)%(P<0.05)。LY294002处理后的Go/G,期细胞增加,S期明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。LY294002处理后的细胞与对照组相比P-gP和p-Akt的蛋白表达降低。结论:LY294002能够有效的逆转卵巢癌紫杉醇耐药细胞A2780/Taxol产生的多药耐药。
- 袁犁周琦徐发良李少林甘霖邹冬玲
- 关键词：LY294002P-GLYCOPROTEIN卵巢癌紫杉醇
- miR-124抑制人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的生长和转移被引量：3
- 2014年
- 目的:探讨微RNA-124(microRNA-124,miR-124)对人卵巢癌细胞株SKOV3裸鼠皮下移植瘤生长和远处转移的影响。方法:采用脂质体转染法将miR-124-模拟物(mimics)及其阴性对照(miR-124-mimics-negative control,miR-124-mimics-NC)分别瞬时转染至人卵巢癌SKOV3细胞中,随后将转染后的SKOV3细胞接种于裸鼠皮下,建立SKOV3细胞肿瘤模型。待成瘤后将miR-124-mimics或miR-124-mimics-NC联合脂质体每隔4 d进行一次瘤内定点注射治疗,至47 d后处死小鼠,绘制肿瘤生长曲线图并计算抑瘤率;采用实时荧光定量-PCR检测移植瘤组织中miR-124的表达情况;免疫组织化学法检测移植瘤组织中Ki-67及caspase-3的表达情况;观察肿瘤在小鼠中肝脏转移的情况,并对肝组织进行HE染色。结果:miR-124-mimics转染SKOV3细胞后,SKOV3细胞中miR-124的表达水平明显上调;47 d后处死小鼠,最终miR-124过表达组裸鼠皮下移植瘤的体积明显小于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05),抑瘤效果明显;移植瘤中miR-124的表达上调,Ki-67表达明显下调,caspase-3表达明显升高;HE染色结果显示,空白对照组和阴性对照组裸鼠肝组织中都出现了肿瘤细胞浸润,而miR-124过表达组的裸鼠未出现肝转移。结论:miR-124对人上皮性卵巢癌裸鼠移植瘤生长和远端转移均具有抑制作用,有望成为卵巢癌基因治疗的新靶点。
- 舒锦袁犁刘兴明周琦
- 关键词：卵巢肿瘤微RNA
