董丽
- 作品数：15 被引量：45H指数：4
- 供职机构：中国辐射防护研究院更多>>
- 发文基金：山西省自然科学基金山西省青年科技研究基金青年科技基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 猪脱细胞真皮基质修复兔腹壁缺损的实验研究
- 2011年
- 目的研究猪脱细胞真皮基质修复兔腹壁缺损的效果,探讨异种脱细胞真皮基质应用的可行性。方法健康小白猪1头,取背部及两侧皮肤制备脱细胞真皮基质。26只日本大耳白兔,雌雄不限,体重2.2～2.3 kg,随机分为对照组(n=6)和实验组(n=20)。对照组制备5.0 cm×0.5 cm腹壁缺损,单纯缝合关闭缺损。实验组制备5.0 cm×2.5 cm腹壁缺损,用同样大小的猪脱细胞真皮基质补片(简称"补片")修复,补片基底膜面朝向肠管。术后观察是否有疝形成,比较两组腹腔内脏器粘连情况,以及对照组腹壁肌筋膜单纯缝合处和实验组补片-腹壁肌筋膜吻合处的最大张力,组织学观察补片是否有纤维血管组织长入及其在体内的生物学转归。结果实验动物均无疝形成。术后5周,实验组补片和腹壁融为一体,补片皮肤面和脏器面均有纤维血管组织长入,补片处于新生组织掺入重建过程。实验组1只动物补片和腹腔内脏器粘连较重(2级),5只发生了轻微粘连(1级),12只无粘连(0级);对照组1只轻微粘连(1级),5只无粘连(0级);两组粘连分级比较差异无统计学意义(Z=—0.798,P=0.425)。术后5周,实验组补片-腹壁肌筋膜吻合处的最大张力为(13.0±5.5)N,对照组腹壁肌筋膜单纯缝合处为(13.6±4.0)N,差异无统计学意义(t=—0.410,P=0.683)。组织学观察显示,术后5周,实验组补片中有大量小血管,并有中性粒细胞及淋巴细胞为主的炎性浸润,补片边缘偶见巨噬细胞,补片-腹壁肌筋膜吻合处由纤维结缔组织连接;术后6个月,补片及周围炎性反应消退,胶原纤维结构发生了改建,补片和肌筋膜层由有纤维结缔组织愈合。结论补片修复兔腹壁缺损取得了较好效果,补片-腹壁肌筋膜层愈合,其吻合处的力学强度达到了自体腹壁单纯缝合吻合的力学强度,补片胶原纤维结构发生了改建。
- 马绍英王旭昇董丽李幼忱周沫赵亚平李宝兴
- 关键词：猪脱细胞真皮基质腹壁缺损
- 一种组织工程皮肤构建新方法
- 本发明提供了一种组织工程皮肤构建方法，该方法采用人表皮干细胞、真皮成纤维细胞作为种子细胞，以经过人胎盘IV型胶原修饰的同种无细胞真皮基质作为支架，利用气液界面分离培养法复合构建为一种有活性的双层组织工程皮肤。该方法构建的...
- 李宝兴董丽李宝明马绍英李靖张乃丽周沫王旭昇刘晓明张育敏陈学英李幼忱赵亚平
- 文献传递
- 异种(猪)脱细胞真皮基质修复大鼠全层皮肤缺损的实验研究被引量：9
- 2010年
- 目的比较猪脱细胞真皮基质(porcine acellular dermal matrix,PADM)加大鼠自体刃厚皮与单纯大鼠自体刃厚皮修复全层皮肤缺损的效果,组织学观察PADM在大鼠体内的转归。方法健康雌性SD大鼠20只,体重200～225g。于每只大鼠背部左侧翻起4.0cm×2.5cm皮瓣,达深筋膜,皮下植入4.0cm×2.5cm拉网的PADM,10～14d待植入的PADM血管化后,沿原切口处将左侧4.0cm×2.5cm皮瓣切下,右侧背部也制作4.0cm×2.5cm全层皮肤缺损创面,两侧切除的全层皮肤用鼓式取皮机反取为0.2mm厚刃厚皮片,分别植入左侧PADM上(实验组)和右侧皮肤缺损(对照组)。术后2、4、8、20周,观察创面愈合情况,计算创面愈合率和创面收缩率,并对创面行组织学观察。结果术后2周大体观察,实验组自体刃厚皮与PADM贴合良好,大部分复合皮泛红成活;对照组自体刃厚皮创面绝大部分泛红成活。组织学观察,实验组PADM内有大量成纤维细胞长入,少量中性粒细胞和淋巴细胞浸润,周围可见巨噬细胞;对照组自体刃厚皮下纤维结缔组织充填。术后4～8周大体观察,实验组大部分创面愈合,复合皮挟起时皮片厚,柔软、丰满,有弹性;对照组创面基本愈合,但挟起时皮片薄弱。组织学观察,实验组PADM内炎性浸润逐步消退;对照组自体刃厚皮下层状排列的胶原纤维束平行于表面。术后20周大体观察,实验组复合皮与周围皮肤结合部平坦,复合皮柔软、丰满;对照组皮片薄,弹性较差。组织学观察,PADM内及周围未见炎性浸润,胶原纤维组织结构与自体皮接近;对照组自体刃厚皮皮片薄,内见残存皮肤附件结构,皮下被平行于表面的瘢痕组织充填。实验组4、8周创面愈合率低于对照组(P<0.05);创面收缩率有较对照组低的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论大鼠自体刃厚皮与PADM支架复合移植修复全层皮肤缺损,复合皮片厚,弹性好,PADM在体内逐步被自体胶原所替代。
- 马绍英李宝明王旭昇李幼忱康悦董丽陈学英赵亚平李宝兴
- 关键词：异种(猪)脱细胞真皮基质皮肤缺损
- 腺病毒介导的hVEGF基因转染细胞修复大鼠放射性皮肤溃疡的效果研究
- 2015年
- 目的评价转染人血管内皮生长因子165（hVEGF165）重组腺病毒载体的成纤维细胞体外表达状态及转染细胞修复放射性皮肤溃疡的效果。方法构建hVEGF165基因过表达重组腺病毒载体，转染大鼠原代成纤维细胞，通过荧光定量PCR、免疫细胞化学和Westernblot观察hVEGF165体外过表达状态；清洁级sD雄性大鼠24只，50Gy1射线局部照射，照后7d于受照局部注射转染hVEGF165细胞，通过荧光定量PCR，分析转染基因在注射部位的表达状况，外观观察和组织学观察动物体内转基因细胞对放射性皮肤溃疡愈合效果的影响。结果hVEGF转染组细胞体外实验中hVEGFmRNA表达显著上调，约为空转染组的88373倍，胞质中出现hVEGF蛋白强阳性表达，且于相对分子质量23000附近出现VEGF蛋白的特异性条带；受照后约2周局部出现溃疡，hVEGF转染组平均溃疡面积为40．2mm2，比空转染对照组减少57％，愈合时间缩短约6d，处理后3d、1周皮肤组织中hVEGFmRNA相对表达量分别为空转染组的5．15和4．15倍（t=3．385、3．220，P〈0．05）。结论转染hVEGF165重组腺病毒载体的大鼠成纤维细胞能够在体外过量表达VEGF，且该转染细胞注射体内能够缩短放射性皮肤溃疡的愈合时间，增强损伤的愈合效果。
- 董丽马绍英李晶杨凯杨婷陈学英李宝兴
- 关键词：放射性皮肤溃疡人血管内皮细胞生长因子转染
- 无细胞真皮支架与同种细胞相容性的动态观察被引量：3
- 2008年
- 背景:无细胞真皮作为真皮替代材料已广泛应用于临床皮肤缺损的修复,能否将其应用范围扩展使其作为真皮支架用于组织工程皮肤的构建呢?目前国内外对这一方面都在进行着大量的研究。目的:动态评价同种无细胞真皮基质的细胞相容性,验证其作为皮肤组织工程支架材料的可行性。设计、时间及地点:单一样本观察,于2007-10/2008-03在中国辐射防护研究院组织工程实验室完成。材料:试验中皮肤样品源自武警山西总队医院行包皮环切术的健康儿童切除的包皮。方法:采用高渗盐-SDS-胰蛋白酶法制备同种无细胞真皮,组织块贴壁法培养人成纤维细胞,使其接种于支架材料上,通过苏木精-伊红染色以及扫描电镜观察成纤维细胞在支架材料上的贴附、生长、增殖以及迁移情况。主要观察指标:①同种无细胞真皮基质的形态结构。②无细胞真皮基质的细胞相容性。结果:同种无细胞真皮基质肉眼观察为乳白色,柔韧有弹性,苏木精-伊红染色和扫描电镜显示表皮以及真皮乳头层和网状层细胞以及细胞成分已经完全去除,且真皮的胶原网状支架保留完整;接种该支架材料上的成纤维细胞生物学行为活跃,不仅能够在其表面贴附、生长、增殖,并沿细胞间隙向真皮内部浸润生长,穿过乳头层达到网状层,而且分泌细胞外基质,填充细胞间隙形成膜片样结构。结论:通过高渗盐-SDS-胰蛋白酶法制备的无细胞真皮具有良好的细胞相容性,可作为真皮支架材料用于组织工程皮肤的构建。
- 董丽马绍英赵亚平李幼忱周沫康悦徐勇杰李宝兴
- 关键词：无细胞真皮成纤维细胞细胞相容性
- 组织工程皮肤的构建及组织形态学观察被引量：6
- 2011年
- 背景:应用于临床的组织工程皮肤具有血管化速度慢、力学强度差以及无法永久性保留等局限,因此,需要对相关技术环节进行改进以制备一种合适的永久性皮肤替代物。目的:建立一种构建有活性的双层组织工程皮肤的方法,并对其组织形态学进行观察。方法:以Ⅳ型胶原和成纤维细胞联合修饰的同种脱细胞真皮基质为支架,与表皮干细胞复合后依次经浸没式培养和气液分离界面培养构建组织工程皮肤,利用光镜和扫描电镜对其组织学特点进行观察和分析。结果与结论:以表皮干细胞和同种脱细胞真皮基质制备的组织工程皮肤具有表、真皮双层结构,其中表皮由多层不同分化程度的表皮细胞组成,真皮为天然三维孔隙结构,胶原纤维完整,且表皮层与真皮层紧密连接,形成整体结构,可满足全层皮肤替代物的基本组织学要求。
- 董丽王旭昇马绍英张乃丽周沫赵亚平李宝兴
- 关键词：表皮干细胞成纤维细胞组织工程皮肤扫描电镜
- 一种组织工程皮肤构建新方法
- 本发明提供了一种组织工程皮肤构建方法，该方法采用人表皮干细胞、真皮成纤维细胞作为种子细胞，以经过人胎盘IV型胶原修饰的同种无细胞真皮基质作为支架，利用气液界面分离培养法复合构建为一种有活性的双层组织工程皮肤。该方法构建的...
- 李宝兴董丽李宝明马绍英李靖张乃丽周沫王旭昇刘晓明张育敏陈学英李幼忱赵亚平
- 异种(猪)无细胞真皮基质的制备及体外生物相容性被引量：8
- 2009年
- 背景:人同种无细胞真皮基质作为一种永久性真皮支架,已成功应用于烧伤创面修复及美容医学等领域,但由于来源有限,限制了其应用。目的:研制异种(猪)无细胞真皮基质,并对其体外生物相容性进行评价。设计、时间及地点:体外细胞学对比观察实验,于2007-08/2008-06在中国辐射防护研究院生物材料与制药技术研究所实验室完成。材料:实验猪由中国辐射防护研究院实验动物中心提供;人成纤维细胞来自武警山西总队医院健康儿童包皮环切术切除的包皮组织。方法:无菌条件下获取健康小白猪猪皮,用高渗盐溶液-去污剂、胰酶消化及超声清洗的方法,制备猪无细胞真皮基质。体外培养人成纤维细胞,用猪无细胞真皮基质浸提液法及人成纤维细胞和猪无细胞真皮基质直接贴附法,评价猪无细胞真皮基质体外生物相容性。主要观察指标:①猪无细胞真皮基质的组织学形态。②猪无细胞真皮基质的体外生物相容性。结果:制备的猪无细胞真皮基质,完全去除了表皮和真皮中的细胞成分,保留了胶原基质。猪无细胞真皮基质浸提液对人成纤维细胞增殖无明显影响。人成纤维细胞可以在猪无细胞真皮基质上贴附、增殖。结论:此种方法制备的无细胞真皮基质完全去除了表皮和真皮中的细胞成分,有较好的体外生物相容性。
- 马绍英李宝明董丽王旭昇李宝兴赵亚平康悦
- 组织工程皮肤构建用可固定式气液分离支架
- 本实用新型涉及皮肤组织构建的器械装置，具体涉及一种组织工程皮肤构建用可固定式气液分离支架。其结构包括相互嵌合在一起的外套、内套和网，所述的外套和内套呈圆环形，所述的网的圆形边沿镶嵌在外套与内套之间，在所述的外套顶面设有若...
- 董丽李宝明李靖王旭昇李宝兴
- 文献传递
- 可塑形脱矿骨基质/透明质酸骨泥的制备与细胞相容性被引量：2
- 2013年
- 背景:应用预制成形的材料修复不规则骨缺损时,常出现材料与骨缺损形状不匹配的问题,制备可任意塑形骨泥对促进不规则骨缺损的愈合具有重要意义。目的:构建可塑形脱钙骨基质/透明质酸骨泥,筛选最佳复合比例并评价其细胞相容性。方法:选取合格供体皮质骨制备脱钙骨基质。分别配置浓度为0.75%,1.5%,3%,4.5%的透明质酸溶液并检测其黏度,以450 mg脱钙骨基质与上述各浓度透明质酸溶液1 mL混合,制备不同比例的脱钙骨基质/透明质酸骨泥。37℃条件下将骨泥浸泡在PBS平衡液中,观察其离散时间,筛选最佳复合比例的脱钙骨基质/透明质酸骨泥。应用脱钙骨基质/透明质酸骨泥浸提液培养L-929小鼠成纤维细胞,1,4,7 d采用CCK-8法检测骨泥的细胞毒性。结果与结论:随透明质酸浓度的增加其溶液黏度增大,脱钙骨基质/透明质酸骨泥的离散时间延长,3%浓度的透明质酸与450 mg脱钙骨基质复合制备的骨泥具有良好可塑形能力,离散时间为8 h,为最佳复合比例。脱钙骨基质/透明质酸骨泥浸提液培养L-929小鼠成纤维细胞1,4,7 d的细胞增殖率分别为93.72%,101.65%,97.68%,细胞毒性级别为0或1级。表明脱钙骨基质/透明质酸复合质量比为15∶1制备的骨泥具有良好的可塑形能力及抗离散能力,细胞毒性轻微。
- 张乃丽张育敏周沫杨婷王旭昇马绍英徐伟俊董丽李宝兴
- 关键词：材料生物相容性骨组织构建透明质酸细胞相容性
