苗阳阳
- 作品数:23 被引量:56H指数:6
- 供职机构:甘肃农业大学草业学院草业生态系统教育部重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金贵州省科学技术基金国家牧草产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 赤霉素对根瘤菌运移、定殖及苜蓿幼苗生长的影响被引量:11
- 2017年
- 【目的】研究赤霉素对荧光标记根瘤菌运移和定殖的动态及接种对甘农5号紫花苜蓿(Medicago sativa L.Gannong No.5)幼苗生长的影响,为增强根瘤菌向苜蓿体内尤其向繁殖器官转移并定殖的能力,促进苜蓿种植业发展提供理论依据和技术支持。【方法】分别向Ensifer meliloti LZgn5f(gn5f)和Ensifer meliloti 12531f(12531f)两种根瘤菌液内添加0.5、1、10和100 mg·L^(-1)赤霉素,测定第1、3、5、7和9天两种根瘤菌OD600吸光度值,同时将添加不同赤霉素的菌液分别浇灌于幼苗根部,于接种后第15、30、45和60天检测根瘤菌在根和地上各组织内运移和定殖及对苜蓿幼苗生长的情况。【结果】添加10 mg·L^(-1)赤霉素稍可促进12531f生长,但效果并不明显;而1 mg·L^(-1)赤霉素对gn5f生长初期效果较好,但随着时间的延长则无明显作用。10 mg·L^(-1)赤霉素促进12531f运移并定殖到下部茎、上部茎和上部叶内,1 mg·L^(-1)赤霉素促进gn5f运移并定殖到下部茎和下部叶内,以无菌水为对照的各组织内未检测到两种荧光标记根瘤菌。单独接种12531f和gn5f,均促进了叶绿素的形成,而添加赤霉素后接种均抑制了叶绿素的形成,但12531f添加10 mg·L^(-1)赤霉素、gn5f添加1 mg·L^(-1)赤霉素接种可使幼苗单株结瘤数、单株根瘤重、单株叶片数、株高、根长、地上干重和根干重则均达最高。其中12531f添加10 mg·L^(-1)赤霉素接种后苜蓿单株结瘤数分别高出对照和单独接菌处理75.71%和11.82%,但差异不显著(P>0.05);单株根瘤重分别高出对照和单独接菌处理1 136.11%和55.05%,差异显著(P<0.05);单株叶片数分别高出对照和单独接菌处理113.94%和78.28%,差异显著(P<0.05);株高分别高出对照和单独接菌处理83.33%和50.24%,差异显著(P<0.05);根长分别高出对照和单独接菌处理115.28%和29.17%,差异显著(P<0.05);地上干重分别高出对照和单独接菌处理214.27%和206.43%,差异显著(P<0.
- 苗阳阳师尚礼康文娟
- 关键词:赤霉素荧光标记根瘤菌运移定殖
- 一种荧光标记根瘤菌的构建方法
- 本发明公开了一种以灭菌紫花苜蓿叶片替代无菌滤膜作为三亲本杂交载体,以提高根瘤菌荧光标记菌株荧光质粒转移接合转移效率的方法,可用于高效构建根瘤菌CFP青色荧光蛋白基因标记菌株,该方法具体为:取紫花苜蓿的幼嫩叶片,用蒸馏水清...
- 师尚礼陈力玉李剑峰张淑卿曹文侠霍平慧苗阳阳
- 文献传递
- 几种外源物质对内生根瘤菌侵染苜蓿芽苗并在植株体内运移的影响被引量:10
- 2015年
- 内生根瘤菌普遍存在于豆科植物的种子及植株体内,但其在苜蓿体内的运移通道、运移规律及运移的影响因素尚不明确。本研究用菌液中分别混合3-吲哚乙酸、LaCl3和其他根瘤菌的胞外聚合物(EPS)(过滤除去活菌菌体)对‘甘农5号’紫花苜蓿(Medicago sativa‘Gan Nong 5’)芽苗浸根处理,比较青色荧光蛋白(CFP,cyan fluorescent protein)标记根瘤菌在芽苗体内的运移动态及数量分布,探明内源根瘤菌(分离自宿主植株根瘤)与外源根瘤菌(购自中科院菌种保存中心)在宿主体内的运移差异。结果表明:胞外聚合物使Rhizobium meliloti.GNf(内源标记菌)在芽苗根和茎内的数量为对照(未添加外源物质的菌液处理)的11.43和1.71倍。50mg·L^(-1)的LaCl_3使根内R.meliloti GNf和S.meliloti 12531f(外源标记菌)的菌体增加656.83%和303.19%,且使S.12531f在茎内的菌体仅为对照的3.64%。IAA处理使芽苗根内R.GNf和S.12531菌体增加18.34和12.11倍,使茎中S.12531增加163.09%,但R.GNf降低为对照的75.45%。IAA处理能降低芽苗子叶内R.GNf数量至对照的4.13%,表明三种外源物均能增加标记菌在芽苗根系中的数量。无外源物时,标记菌在芽苗各部位的数量差异表明,根瘤菌由根系向茎和子叶的运移通道存在仅允许内源菌通过的选择性屏障。
- 李剑峰张淑卿师尚礼苗阳阳霍平慧
- 关键词:胞外聚合物
- 一种目标根瘤菌在苜蓿植株体内运移和定殖的促进方法
- 本发明公开了一种目标根瘤菌在苜蓿植株体内运移和定殖的促进方法,是采用三亲本杂交方法获得携带青色荧光CFP特性的內源荧光标记根瘤菌<i>R</i>.GN5f菌液,添加的天然植物源抑菌剂苦参碱混合接种...
- 师尚礼苗阳阳
- 一种荧光标记根瘤菌的构建方法
- 本发明公开了一种以灭菌紫花苜蓿叶片替代无菌滤膜作为三亲本杂交载体,以提高根瘤菌荧光标记菌株荧光质粒转移接合转移效率的方法,可用于高效构建根瘤菌CFP青色荧光蛋白基因标记菌株,该方法具体为:取紫花苜蓿的幼嫩叶片,用蒸馏水清...
- 师尚礼陈力玉李剑峰张淑卿曹文侠霍平慧苗阳阳
- 文献传递
- 一种目标根瘤菌在苜蓿植株体内运移和定殖的促进方法
- 本发明公开了一种目标根瘤菌在苜蓿植株体内运移和定殖的促进方法,是采用三亲本杂交方法获得携带青色荧光CFP特性的內源荧光标记根瘤菌<I>R</I>.GN5f菌液,添加的天然植物源抑菌剂苦参碱混合接种生殖生长期的甘农5号紫花...
- 师尚礼苗阳阳尹国丽祁娟康文娟周彤李焱
- 文献传递
- 外源2,4-表油菜素内酯对NaCl胁迫下紫花苜蓿幼苗光合特性及离子吸收、运输和分配的影响被引量:12
- 2016年
- 为明确外源2,4-表油菜素内酯(2,4-epibrassinolide,EBR)诱导紫花苜蓿幼苗抗盐性的效果及其可能的生理调节机制,采用营养液水培法,以紫花苜蓿品种‘中苜3号’和‘陇中苜蓿’为材料,研究NaCl胁迫下施用外源EBR对紫花苜蓿幼苗光合色素含量、气体交换参数及离子吸收、运输和分配的影响。结果表明,1)150mmol/L NaCl胁迫下,苜蓿幼苗叶片的光合色素含量显著降低,光合能力及地上、地下生物量显著下降,苜蓿幼苗体内无机离子的吸收、运输和分配等代谢过程失调。2)NaCl胁迫下,施用0.1μmol/L外源EBR后,苜蓿幼苗叶片的Chla、Chlb、Chla+b、Chlx·c含量及Chla/Chlb显著提高,Chl/Car显著降低,Pn、Tr、Gs、WUE均显著提高,光合能力增强,促进了地上、地下生物量的积累。苜蓿幼苗不同器官(叶片、茎秆、根系)中的Na^+、Cl^-含量及Cl^-/Na^+显著下降,K^+、Ca^(2+)、Mg^(2+)含量及K^+/Na^+、Ca^(2+)/Na^+、Mg^(2+)/Na^+显著升高,体内无机离子的运输比及阳离子的运输选择性比率得到有效调控。3)说明外源EBR能够有效缓解盐胁迫对苜蓿幼苗造成的光抑制,增强有机物的合成和积累,促进对无机离子的选择性吸收和运输,维持体内的离子代谢平衡,提高苜蓿幼苗的耐盐性。
- 寇江涛康文娟苗阳阳师尚礼
- 关键词:紫花苜蓿NACL胁迫
- 不同保存方法对紫花苜蓿种子内生根瘤菌数量的影响
- 为探索不同保存方法对紫花苜蓿种子内生根瘤菌数量的影响,本试验以7种不同处理的甘农5号紫花苜蓿种子(结荚期g切、g浇、g+苦、1切、1浇、1+苦和对照)为试验材料,常温风干两个月后,采用25℃,-4℃,4℃三种不同温度保存...
- 苗阳阳师尚礼周彤
- 关键词:紫花苜蓿种子
- 贮藏方法对紫花苜蓿种子内生根瘤菌定殖的影响被引量:3
- 2018年
- 为探索贮藏方法对紫花苜蓿种子内生根瘤菌定殖的影响,将甘农5号紫花苜蓿在结荚期用3种根部接种方法(主根微破损浇灌、根部浇灌、添加苦参碱浇灌)接种两种荧光标记根瘤菌Ensifer meliloti LZgn5f(gn5f)和Ensifer meliloti 12531f(12531f),同时根部浇灌无菌蒸馏水获得的种子,采用信封、信封+布袋、铝箔3种包装材料,分别在25℃、25℃硅胶干燥、-4℃和4℃条件下贮藏6个月后,检测种子内根瘤菌的定殖数量。结果表明:主根微破损接种gn5f获得的种子在-4℃以信封包装贮藏时内生根瘤菌的定殖数量(25.54cfu/粒)显著高于信封+布袋和铝箔的两种包装材料(P<0.05),主根微破损接种12531f获得的种子在-4℃以铝箔包装贮藏时内生根瘤菌的定殖数量最高(14.98cfu/粒),但与另外两种包装材料无显著差异(P>0.05)。根部浇灌接种gn5f和12531f获得的种子,在25℃干燥贮藏,分别以信封(22.08cfu/粒)和信封+布袋(40.84cfu/粒)包装时内生根瘤菌的定殖数量显著高于其贮藏条件(P<0.05),添加苦参碱根部浇灌接种gn5f和12531f获得的种子以铝箔为包装材料,分别在-4℃(25.00cfu/粒)和25℃硅胶干燥(18.08cfu/粒)温度下贮藏种子内生根瘤菌的定殖数量最多,显著高于其他贮藏条件(P<0.05)。接种相同目标根瘤菌获得的种子以25℃硅胶干燥和-4℃贮藏时内根瘤菌数量高于25℃和4℃。
- 苗阳阳周彤师尚礼张运婷康文娟
- 关键词:贮藏方法紫花苜蓿种子
- 苜蓿根瘤菌cfp荧光标记株的构建及筛选方法被引量:4
- 2015年
- 荧光标记根瘤菌在研究根瘤菌侵染宿主形成结瘤时具有良好的示踪效果。本研究以辅助菌株Escherichia coli pRK2073,受体菌苜蓿中华根瘤菌Sinorhizobium meliloti 12531和苜蓿根瘤菌Rhizobium meliloti GN5,及cfp青色荧光基因供体菌E.coli pMP45179为供试菌株,以三亲本杂交法进行结合转导,并以无氮培养基和TY培养基对标记菌株进行荧光表达及固氮特性的遗传稳定性检测,再对初选菌株以甘农5号紫花苜蓿为宿主进行回接验证,测定了回接植株的生物量,结瘤数和标记菌的占瘤率等指标。结果表明,1)三亲本杂交转导法适用于苜蓿根瘤菌cfp标记菌株的构建,获得大量S.meliloti 12531和R.meliloti GN5的荧光标记株;2)经逐层筛选获得的荧光标记菌中,S.meliloti 12531-cfp6和R.meliloti GNf-cfp5遗传稳定性好,荧光表达量高,结瘤促生能力强;3)与现有抗生素平板分离筛选相比,无氮培养基结合耐药平板筛选能显著提高荧光标记根瘤菌株的甄别筛选效率;4)三亲本杂交法获得的苜蓿根瘤菌荧光标记株个体间差异较大,对标记株固氮及荧光表达能力遗传稳定性的验证和对宿主植物的结瘤促生能力的检测是cfp荧光标记根瘤菌筛选的必要手段。
- 张淑卿李剑峰陈力玉师尚礼苗阳阳
- 关键词:苜蓿根瘤菌荧光标记菌种筛选根瘤