苏锦坤
- 作品数：32 被引量：120H指数：7
- 供职机构：广东国际旅行卫生保健中心更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目广东出入境检验检疫局科技计划项目质检公益性行业科研专项项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 黄热病现状分析及研究进展
- 黄热病是黄病毒科、黄病毒属的黄热病病毒引起的急性传染病，经蚊媒传播，主要发生在非洲和美洲地区，严重威胁人类健康。目前该病尚无特效药治疗，接种疫苗是最好的预防途径。虽然亚洲地区尚未发现黄热病，但随着全球经济的发展，国际间的...
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- 关键词：黄热病疫苗接种流行病学
- 广东口岸首例输入性卵形疟病例的诊断分析被引量：5
- 2014年
- 广东发现首例输入性卵形疟病例,该患者在缅甸务工1周,回国入境时有发热等症状。right VIEW疟疾快速胶体金检测卡检测为弱阳性;采血制备厚、薄血片镜检,并提取血样DNA,实时荧光PCR检测间日疟原虫、卵形疟原虫和三日疟原虫感染情况,检测结果为卵形疟原虫阳性。给予蒿甲醚抗疟治疗,该患者症状好转。
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- 关键词：输入性疟疾镜检实时荧光PCR
- 应用含内参的多重实时荧光RT-PCR方法快速检测登革病毒和基孔肯雅病毒被引量：7
- 2013年
- 目的建立一种登革病毒、基孔肯雅病毒并含人类基因内参检测的多重实时荧光RT-PCR方法,能在同一反应管内同时检测目前发现的所有来源的登革病毒或基孔肯雅病毒。方法针对登革病毒3′端非编码区和基孔肯雅病毒结构蛋白E2-6K-E1区以及人体各类组织细胞中均能稳定表达的RNAse P基因,设计了3套特异性引物和探针,建立了1套能同时检测登革病毒、基孔肯雅病毒及含有人类基因检测内参的多重实时荧光RT-PCR方法,对其灵敏性和特异性进行了验证,并对临床发热病人标本进行了应用评估。结果该方法对检测体外转录合成的登革病毒和基孔肯雅病毒RNA的灵敏性可达最低每个反应10～100拷贝,对检测登革1型病毒和基孔肯雅病毒的灵敏性分别可达最低每个反应0.1TCID50/mL和1TCID50/mL。用20株登革病毒、4株基孔肯雅病毒和日本脑炎病毒、西尼罗病毒、黄热病毒、盖塔病毒、辛德毕斯病毒各1株进行检测,方法的特异性均为100%。方法应用于189份发热病人血清标本检测,可准确地鉴定出其中登革病毒或基孔肯雅病毒核酸阳性的标本,且所有血清标本均能被内参引物和探针有效地扩增和杂交。结论本研究建立了一种高灵敏性、高特异性且含人类基因内参检测的登革病毒和基孔肯雅病毒多重实时荧光RT-PCR检测方法,可作为登革热或基孔肯雅热病人早期快速鉴别诊断的有效工具,也可用于蚊媒携带登革病毒或基孔肯雅病毒的高通量快速筛查。
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- 关键词：登革病毒基孔肯雅病毒内参
- 巢式PCR法在疟疾检测及虫种鉴别中的应用被引量：19
- 2011年
- 根据疟原虫小亚单位核糖体核糖核酸(SSU rRNA)基因序列设计疟原虫通用型和种特异性的引物,对60份血样进行巢式PCR检测及虫种鉴定,并与血样的吉氏染色镜检结果进行比较。巢式PCR检出40份疟原虫阳性血样,其中22份为恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)阳性、13份为间日疟原虫(P.vivax)阳性、3份为恶性疟原虫和间日疟原虫混合感染、1份为卵形疟原虫阳性(P.ovale)、1份未能分型。与镜检结果一致的血样为46份,占76.7%(46/60),其中恶性疟原虫阳性18份、间日疟原虫阳性11份和阴性17份。将两种检测结果不一致的血样进行扩增片段序列测定和实时荧光PCR分析,检测结果均与巢式PCR结果一致。卵形疟原虫阳性血样扩增片段的序列分析结果显示,该序列与卵形疟原虫SSU rRNA基因序列(GenBank登录号DQ845247)的对应部分同源性为100%,证实该病例为输入性卵形疟原虫感染病例。
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- 关键词：疟疾巢式PCR
- 广东口岸输人性疟疾疫情监测分析
- 目的：了解疟疾的流行情况，为口岸输入性疟疾的预防控制提供依据。方法：对经广东口岸入境疑似疟疾的旅行者和不明原因发热者进行实验室检查和流行病学调查。结果：2006-2010年8月间对226份血样进行检查，共检出疟疾32例，...
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- 关键词：输入性疟疾流行病学
- 2013年广东国境口岸入境发热患者的虫媒传染病检测情况分析被引量：2
- 2015年
- 目的 对广东国境口岸入境发热患者的虫媒传染病发病情况进行分析,为口岸虫媒传染病防控提供理论指导。方法 收集2013年全年广东国境口岸入境所有发热患者血液样本,以实时荧光RT-PCR法检测登革病毒、基孔肯雅病毒、黄热病病毒、埃博拉病毒、西尼罗病毒核酸;抗凝血涂片镜检,检测疟原虫。结果 2013年度共收集400份广东入境发热患者血液样本,其中的195份抗凝血样本中检出21例输入性恶性疟疾阳性病例,检测阳性率为10.8%;从205份血清中检测出14例输入性登革热病例（阳性率为6.8%）和1例输入性基孔肯雅热阳性病例（阳性率为0.5%）。85.7%的登革热患者（12/14）均来自东南亚地区,85.7%的疟疾患者（18/21）均来自非洲地区,1例基孔肯雅热患者来自东南亚地区（菲律宾）。登革热病例中12例男性,2例女性,年龄为20∽50岁,均有发热症状;疟疾阳性患者全部为男性,年龄为28∽50岁,均有发热症状。结论2013年广东口岸虫媒传染病患者体征各有特点,但均具有发热的共同体征;来自东南亚的旅客传播登革热的风险最大,来自非洲的旅客携带疟疾病原的风险最大;检验检疫部门应大力加强口岸传染病防控力度,严防虫媒传染病传入我国并引起国内疫情暴发。
- 李小波黄吉城苏锦坤方盛藩郑夔
- 关键词：虫媒病毒传染病
- 用于疟原虫多重荧光分型检测的引物探针组和试剂盒
- 本发明公开了一种用于疟原虫多重荧光分型检测的引物探针组和试剂盒。本发明的引物探针组的核酸序列如SEQ ID NO：1-12所示。本发明的检测试剂盒包括主反应液混合物和引物探针组，其核酸序列如SEQ ID NO：1-6所示...
- 师永霞黄吉城李燕李小波苏锦坤郑夔方盛藩冯庆文
- 文献传递
- 广东口岸出入境人员百日咳毒素抗体水平监测
- 2017年
- 目的了解广东口岸出入境人群百日咳抗体水平,为口岸预防免疫接种提供科学依据。方法收集2016年出入境体检人员血清,采用ELISA法检测百日咳毒素抗体水平,并对监测结果进行统计分析。结果共监测出入境人员1 700人,百日咳毒素抗体阳性率为42.0%,平均浓度为63.77 IU/ml。阳性人群集中在10~29岁,不同年龄组之间抗体阳性率差异有统计学意义(P<0.05)。男性抗体阳性率46.62%,平均浓度为73.19 IU/ml;女性抗体阳性率37.77%,平均浓度为55.13 IU/ml,不同性别间抗体阳性率和平均浓度差异均有统计学意义(P<0.05)。结论口岸国际旅行卫生保健机构应加强出入境人员的百日咳疫苗接种和自我防护意识,防止百日咳通过口岸传播。
- 苏锦坤陈嘉涂苏林吴健张敏
- 关键词：百日咳抗体
- 一种检测埃博拉病毒、马尔堡病毒、拉沙热病毒和裂谷热病毒的多重PCR试剂盒及其引物
- 本发明提供了一种同时检测埃博拉病毒、马尔堡病毒、拉沙热病毒和裂谷热病毒的多重荧光PCR检测试剂盒及其引物。本发明提供的试剂盒包括RT-PCR缓冲液、RT-PCR酶混合液等常规试剂外，还包括四种病毒的引物和探针，如SEQ ...
- 相大鹏师永霞郑夔黄吉城幸芦琴李小波洪烨苏锦坤钟玉清郭波旋
- 文献传递
- 6种虫媒病毒微孔膜芯片检测方法的研制与应用被引量：1
- 2012年
- 目的研制能同时检测6种口岸重要虫媒病毒的微孔膜芯片。方法针对包括1～4型登革病毒、乙型脑炎病毒、西尼罗病毒、黄热病毒、基孔肯雅病毒和裂谷热病毒等6种虫媒病毒,选择合适的保守基因,设计特异性的PCR引物(5'端标记生物素)和检测探针,通过参数优化建立单管多重RT-PCR扩增体系;然后按每个阵列5×5的格式,并确保点样区域为96孔板的微孔大小,将探针喷点到处理后的尼龙膜上,通过条件优化建立稳定的PCR产物与固化探针的杂交体系;采用碱性磷酸酯酶标记链亲和素和化学显色底物NBT/BCIP来检测特异性的PCR杂交产物。选取2012年1—6月份从口岸输入的疑似登革热发热病例的临床血清标本,提取RNA后,直接采用本研究建立的微孔膜芯片进行未知虫媒病毒的快速检测。结果用1～4型登革病毒、乙型脑炎病毒、西尼罗病毒和基孔肯雅病毒等7种毒株、1种黄热病毒疫苗株和1种裂谷热病毒核酸体外转录的RNA模板验证已建立的微孔膜芯片,获得比较特异和稳定的实验结果。应用该研究建立的方法,从3份疑似登革热发热病例的临床血清标本中检出了1例登革1型病毒和2例登革2型病毒,与实时荧光PCR检测结果相符。结论该研究建立的6种虫媒病毒微孔膜芯片检测方法,具有快速、准确、自动化和高通量等特点,为快速应对口岸输入性发热病例提供了非常有价值的检测手段,也为进一步开发更多指标的病原体检测方法提供良好的示范作用。
- 郑夔丁国允李小波师永霞苏锦坤黄吉城
- 关键词：虫媒病毒
